第2届CVD会议幻灯.ppt
缺血性脑血管疾病急性期的升高血压治疗,首都医科大学宣武医院 矫黎东 贾建平 周冀英,背 景,缺血性脑卒中是临床上的常见病、多发病，是致死及致残的主要病因 。 约3/4的缺血性卒中患者急性期血压有不同程度升高，原因是缺血脑组织的血流量与血压水平密切相关。,背 景,缺血性卒中目前证实有效的方法为溶栓治疗，因此寻找新的、安全、简便、有效的治疗是必然方向。 国外有研究提示升高血压能够改善缺血性卒中患者的神经功能。,研究目的,研究卒中急性期升压治疗的有效性和安全性 初步探讨升压治疗的可能机制,实验方法（分组）,缺血升压组：根据升压时间分为H3、H4、H6 三组,分别代表在缺血2h、3h、5h开始输入苯肾上腺素,升高血压30，维持1小时。 单纯缺血组：根据缺血时间分为I3、I4、I6 三组,分别代表在缺血2h、3h、5h开始输入等量0.9生理盐水,维持1小时。,实验方法（基本操作）,股动脉插管: 分离暴露右侧股动脉 动脉插管 连接血压监测仪 股静脉穿刺： 分离暴露左侧股静脉 静脉穿刺 连接微量输液泵 线栓法MCAO模型制作： Koizumi 方法改良,实验方法（指标检测） 第一部分,血 压监 测：连续监测 血 气分 析：MCAO前30min、MCAO后60min、升压结束 脑梗塞体积：脑组织取材切6片TTC染色37水浴30min 4多聚甲醛固定24小时拍照图像分析 梯形法体积计算公式 缺血灶体积(An.T） 脑水肿程度：图像分析,实验方法（指标检测） 第一部分,光镜观察： 4多聚甲醛灌注固定取材后固定24h石蜡包 埋切片HE、尼氏染色光镜观察 电镜观察： 4多聚甲醛灌注固定取材2.5戊二醛后固定 水洗、梯度酒精脱水、环氧乙烷置换纯树脂包 埋半薄切片定位超薄切片电镜观察,实验结果（第一部分）,实验结果（第一部分）,7.403 2.710×102 39.69 2.32 88.95 2.97,7.401 1.969×102 40.72 2.34 88.36 4.23,7.3851.509×102 40.931.79 90.124.35,pH PCO2（mmHg） PO2 （mmHg）,升压治疗结束,MCAO后60min,MCAO前30min,表2 MCAO前后及升压后血气分析结果（ X SD ,mmHg）,注：MCAO前、后及升压治疗后血气比较无统计学差异P0.05,实验结果（第一部分）,实验结果（第一部分）,实验结果（第一部分）,实验结果（第一部分）,图2 相对脑水肿程度,图5 正常皮层尼氏染色 细胞层次清晰,排列有序。 ×200,图6 I3组皮层缺血中心尼氏染色 神经元固缩，胞体缩小变形。 ×200,实验结果（第一部分）,图7 I3组缺血中心边缘尼氏染色 细胞稀疏、部分神经元固缩。×200,图8 H3组缺血中心边缘尼氏染色 少量神经元固缩，多数细胞结构清楚 ×200,实验结果（第一部分）,图12 H3组缺血中心边缘区尼氏染色 多数神经元结构尚清晰 ×400,图13 正常神经元 5,000×,实验结果（第一部分）,图17 正常神经毡 各种细胞突起没有明显肿胀 ×6,300,实验结果（第一部分）,图22 I4组缺血中心区 毛细血管周围星形细胞足突高度肿胀 ×5,000,图21 正常毛细血管 ×8,000,实验结果（第一部分）,实验方法（指标检测） 第二部分,脑血流测定 测定原理：主要利用激光多普勒效应，激光发生器内二极管产生连续波激光通过探头发射光纤进入生物介质散射回的光信号被探头内接受光纤接受光敏元件将其转换为电信号经过滤波、放大、模数转换成相对的流量单位PU值。 PU值的变化直接反应了rCBF的改变 MCAO立体定位仪定向固定监测并记录rCBF 记录方法：左侧右侧升压时右侧 立体定位：以前囟为原点向左右侧旁开2.0mm、向后端3.0mm 钻开直径1.5mm骨窗,实验方法（指标检测） 第二部分,生化检测 处死冰盘上取材称重脑组织匀浆上清分 装备测蛋白定量 丙二醛（MDA）含量测定 测定意义：氧自由基-攻击生物膜中的多不饱 和脂肪酸-引发脂质过氧化生成脂质过氧化物 降解后生成MDA 测定原理：MDA可以与硫代巴比妥酸缩合形成红 色产物，在 532nm有最大吸收峰，通过测定吸光 度值计算MDA含量,超氧化物歧化酶（SOD）活性检测 测定意义：SOD对机体氧化和抗氧化平衡起着至 关重要的作用，能清除超氧阴离子自由基O2 保护细胞免受损伤 测定原理： O2能够氧化羟胺亚硝酸盐呈现紫 红色用比色法测定吸光度SOD能够专一抑制 O2吸光度降低,实验方法（指标检测） 第二部分,实验结果（第二部分）,H3 H4 H6,组别,实验结果（第二部分）,图4 大鼠MCAO及升压治疗后脑血流的变化,实验结果（第二部分）,55.905.46,实验结果（第二部分）,实验结果（第二部分）,结 论,MCAO后3小时内升高血压可明显缩小脑梗塞体积。 梗塞后6小时升压仍可提高rCBF 39%，且不加重脑水肿。 大鼠MCAO后6小时内升高基础血压的30%未见脑出血、颅内高压等副作用。 缺血性脑卒中急性期升压治疗的主要机制可能有提高缺血半暗带脑血流；减少自由基生成；提高超氧化物歧化酶活性等。,谢谢！,
