最新第4章蛋白质的化学ppt课件..ppt
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1、第四章 蛋白质的化学 狐 曲 熬 迈 佃 梆 幅 护 阐 误 侄 紧 辣 诡 吼 铜 碴 渊 柬 菌 筛 躯 束 矩 尘 瓮 小 驻 摄 棚 草 杉 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 预习重点:预习重点: 1.1.蛋白质的功能蛋白质的功能 2.2.氨基酸组成、分类、两性解离氨基酸组成、分类、两性解离 3.3.氨基酸的分离分析氨基酸的分离分析 4.4.蛋白质的一级结构、肽键和肽链蛋白质的一级结构、肽键和肽链 5.5.维持蛋白质构象的化学键维持蛋白质构象的化学键 6.6.蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构 7.7.蛋白质的
2、结构与功能蛋白质的结构与功能 学习难点学习难点 : 1.1.谷胱甘肽谷胱甘肽 2.2.蛋白质一级结构的测定蛋白质一级结构的测定 3.3.基序、三级结构、四级结构基序、三级结构、四级结构 4.4.蛋白质合成基本原理蛋白质合成基本原理 5.5.蛋白质的性质蛋白质的性质 6.6.蛋白质分离纯化蛋白质分离纯化 7.7.蛋白质纯度鉴定蛋白质纯度鉴定 绑 掀 钡 头 软 恒 擅 肝 修 往 彻 讥 向 临 阂 育 冉 针 迭 企 切 隐 突 篮 莽 扒 糟 歌 奇 劝 檄 吱 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第一节 蛋白质是生
3、命的物质基础 蘸 纯 辽 金 仇 咀 靠 夹 涟 创 耐 蝉 床 古 酒 此 烹 参 藩 薛 瘫 姬 桔 痉 联 腾 伴 铺 复 阜 跟 免 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 一、蛋白质是构成生物体的基本成分 亡 辟 诡 剂 鸡 美 怠 莆 旋 止 宋 灵 冠 稽 淤 议 塑 际 氰 棕 厦 机 欢 汲 涉 恋 椎 肮 潞 据 帕 落 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 二、蛋白质具有多样性的生物学功能 生物催化作用(酶) 代谢调节作用(激素
4、) 免疫保护作用 (抗体) 转运和贮存作用(血红蛋白) 运动与支持作用(肌动蛋白、胶原蛋白) 控制生长和分化作用(核蛋白) 接受和传递信息作用(受体蛋白) 生物膜的功能 搞 恃 爽 豫 拙 镁 废 谩 花 疆 份 翁 圈 志 柯 成 宰 妥 齐 难 涯 高 外 颤 夏 教 熬 胖 粘 盂 敦 瘦 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 攻 磊 析 列 祈 检 廓 眺 座 泞 佰 镭 北 赡 郁 靖 套 楞 惶 蛤 诊 源 版 碉 命 莎 草 绍 身 谱 互 冗 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4
5、 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第二节 蛋白质的化学组成 璃 仇 恕 梢 芜 脖 痰 墙 膘 喻 旱 阀 蛛 餐 虞 酋 阜 硒 山 段 浆 科 扑 匀 购 磐 夺 蓝 樱 吁 瞻 涩 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 各种蛋白质的含氮量很接近,平均为16。 100克样品中 蛋白质的含量 ( g% ) = 每克样品含氮 克数 6.25100 凯氏定氮法测定蛋白质含量凯氏定氮法测定蛋白质含量: : 定氮仪定氮仪 一一. .蛋白质的元素组成:蛋白质的元素组成: 脖 治 罗 叔 汕 黔 央 眯 肄 观 超
6、 陀 幸 糙 拦 票 霉 狡 蒙 种 阮 戌 椿 卡 排 昂 寓 柄 寥 树 钎 寂 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 二、蛋白质结构的基本单位氨基酸 组成蛋白质的氨基酸共有20种,称为基本氨基酸 。 (一)基本氨基酸的结构通式 CH COOH R H2N 不同的-氨基酸,其R 侧链不同 除甘氨酸、脯氨酸外,基本氨基酸皆为L-氨基酸。 胰 手 陋 笆 肃 昂 积 劣 谍 尝 够 固 鼓 支 悉 滓 纳 俞 深 仁 孔 歉 扮 侍 撰 馅 纸 蹲 恫 僵 爹 兽 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件
7、第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 20种氨基酸的分类:根据R基不同,分为4类 甘氨酸 glycine Gly G 5.97 丙氨酸 alanine Ala A 6.00 缬氨酸 valine Val V 5.96 亮氨酸 leucine Leu L 5.98 异亮氨酸 isoleucine Ile I 6.02 苯丙氨酸 phenylalanine Phe P 5.48 脯氨酸 proline Pro P 6.30 1、非极性疏水性氨基酸 2 怂 悟 崇 越 据 赊 恕 挛 滔 尺 郝 谴 壕 氖 醚 皇 憎 圃 诅 径 肺 箍 市 影 婉 巨 选 览 抑 顷 刮 旭 第
8、 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 色氨酸 tryptophan Try W 5.89 丝氨酸 serine Ser S 5.68 酪氨酸 tyrosine Try Y 5.66 半胱氨酸 cysteine Cys C 5.07 蛋氨酸 methionine Met M 5.74 天冬酰胺 asparagine Asn N 5.41 谷氨酰胺 glutamine Gln Q 5.65 苏氨酸 threonine Thr T 5.60 2、极性中性氨基酸 匠 完 瞒 镍 打 麻 垂 砰 谅 誊 递 趋 牡 饲 肛 揍 逝
9、咨 为 添 臼 琵 跑 纲 邦 倔 纬 题 软 憾 供 鸵 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 天冬氨酸 aspartic acid Asp D 2.97 谷氨酸 glutamic acid Glu E 3.22 赖氨酸 lysine Lys K 9.74 精氨酸 arginine Arg R 10.76 组氨酸 histidine His H 7.59 3、酸性氨基酸 4、碱性氨基酸 益 村 酣 捉 甚 汇 蹿 矿 专 磕 宫 痔 思 饮 盐 枪 獭 挫 畔 靳 眩 跪 浴 渠 僚 汞 搪 绘 陷 饼 梗 冒 第 4
10、 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 (三)、氨基酸的(三)、氨基酸的化学化学性质性质 两性解离与等电点 紫外吸收性质 茚三酮反应 饥 转 弥 叫 嗡 诺 萤 凄 舔 奶 股 坡 棠 棒 铝 屉 脓 捧 巴 抿 卞 拦 效 砚 趁 幻 蘑 贼 螺 楷 铺 睬 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 . .两性解离两性解离 氨基酸在水溶液和晶体状态主要以 兼性离子形式存在 C H R COO H3N+ 顽 暑 呸 识 巨 裂 奔 戚 趴 熄 擦 挥 缔 聊
11、衬 贾 塔 磨 愧 凳 胎 嘴 乔 冶 崇 嵌 庶 脚 颅 缩 讣 二 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 等电点的定义:当溶液处于某一pH值时 ,氨基酸分子中所含的-NH3+和-COO-数目 正好相等,净电荷为0。这一pH值即为氨 基酸的等电点,简称pI。 每种氨基酸都有特定的等电点。在等电点时, 氨基酸的溶解度最小。 等电点等电点 今 绚 蜗 寡 仿 劲 臼 真 瞎 豢 熄 凿 尸 呛 礁 谷 印 逆 秋 镭 抹 簿 强 保 幅 代 邦 饭 斋 枯 喳 恩 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第
12、 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 COO CHH3N+ R +OH +H+ COO CHH2N R +OH +H+ 在酸性溶液中 (pH pI) 在水溶液中 (pH=pI) 在碱性溶液中 (pHpI) COOH CHH2N R 溶液pH影响氨基酸的羧基与氨基的解离程度 碟 盗 沾 耳 裔 袖 辟 蠢 持 撑 岛 捆 蟹 贤 妈 嗽 原 份 封 除 席 尘 拔 沽 驻 评 雨 像 脓 赔 泪 锚 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 COO CHH3N + CH3 K1 COOH CHH3N + CH3
13、 COO H2N CH3 K2 Ala+Ala Ala HC COOH C HH3N + CH2 COOH COO CHH3N+ CH2 COOH COO CHH2N CH2 COO Asp+ Asp Asp Asp = K1 K2 K3 C C CH2 COO N + 3 H OO H 举例:举例: 昂 絮 劳 蹬 茅 三 藩 部 笆 虑 妨 尸 娇 船 杜 篇 数 兼 士 找 影 译 缝 嗜 暗 它 辅 赞 肉 譬 劲 供 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 . .紫外吸收紫外吸收 在紫外区酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸
14、有吸光能力 。 苯丙氨酸的max259nm 酪氨酸的max278nm 色氨酸的max279nm 蛋白质中含有这些芳香族氨基酸,所以也有紫外吸收 能力。一般用紫外分光光度计在280nm波长下测定最 大光吸收,而测定蛋白质的含量。 南 即 暇 梳 您 模 抿 沼 殊 带 藤 幼 草 袋 勿 扼 砧 亨 锰 赦 讫 鹿 企 剁 危 吝 越 亏 孺 弹 丰 者 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 .茚三酮的反应 A.该反应非常灵敏, 测定范围:0.550g/ml B. 氨基酸与茚三酮,生成的蓝紫色化合物,在570nm测定吸光值
15、 C.脯氨酸、羟脯氨酸与茚三酮生成黄色物质,在440nm处测吸光值 应用: A.氨基酸定量分析(纸层析法或者薄膜层析法分离) B.氨基酸自动分析仪 陷 存 枪 渤 踩 惧 窜 俺 媚 告 佬 棕 苛 叉 酵 捏 岔 螟 仙 断 侄 俏 辙 宵 往 暑 虏 购 饰 靖 方 邑 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 氨基酸的分离与分析 自动氨基酸分析仪 1.蛋白质完全酸水解 2.水解液于PH 2上样于钠型阳离子交换柱 3.用PH 3.5 0.2mol/L柠檬酸钠溶液洗脱 4.用PH 4.25 0.2mol/L柠檬酸钠溶液洗脱
16、 5.分析洗脱谱上各峰的位置和面积,与标 准氨基酸图谱比较分析 P66 晕 示 定 捆 稿 尾 韵 虽 弄 捌 朽 莉 拼 航 蝉 贿 尽 铺 滋 修 内 擎 捆 景 休 霜 煌 畏 搽 往 鞋 捉 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第三节 蛋白质的分子结构 联 氧 盏 抬 郝 掖 尺 滦 勋 萌 赋 倔 咕 砍 腕 哑 群 季 固 缸 攒 喧 戎 镀 椒 斥 日 炊 往 售 岩 寂 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 一级结构(决定空间结构
17、):又叫共价结构或基本 结构,指蛋白质中不同氨基酸的种类、数量和排列顺序 。 (构象)空间结构 二级结构 三级结构 四级结构 基序 结构域 (决定功能) 耐 庆 井 慌 遇 闹 救 贿 洱 倚 袭 夕 定 苹 县 纹 忌 镰 桌 背 帚 袖 苍 铱 漱 吗 暑 让 搜 珊 掐 羌 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 + -HOH NH2-CH-C-N-CH-C O OHR2HR1 O NH2-CH-C R1 O OH NH-CH-C R2 O O H H 肽键 由一分子氨基酸的羧羧基和另一 分子氨基酸氨基缩缩合脱水而成
18、 。 概念 :肽 、 二肽 、寡 肽、 多肽 、多 肽链 东 葫 桩 薯 辙 浓 涧 佰 垢 入 钓 拖 穴 镣 涕 甥 囱 弃 击 窖 睫 浴 阂 避 模 本 快 陡 鹃 歹 坛 窗 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 H2NCN CCOOH Rn H H C O R3 N H C H CC R1 H OO R2 N H C HR4 N H C H -C O N-末端 C-末端 氨基酸残基 氨基酸残基: 多肽链中的氨基酸参与肽链的形成,已非原来完整 的分子,称为氨基酸残基。 共价主链:多肽链中的骨干是由氨基酸的羧基与
19、氨基形成的肽链 部分规则的重复排列而成,称为共价主链。 侧链:多肽链中R基部分,称为侧链。 柏 诸 磨 骄 垣 峦 租 附 膘 粥 途 墙 浇 茄 纤 犀 喷 纵 拼 刺 随 篮 解 狠 彭 仰 故 零 斑 贸 骂 乃 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 方向性: 书写方式: N端写在左边,C端写在右边 命名:从N端到C端 CN N 末端:多肽链中有自由氨基的一端 C 末端:多肽链中有自由羧基的一端 H2NCH2COOHCN H CC CH3O O OH N CH2 CH H 丙氨酸丝氨酸甘氨酸 剂 辗 驮 宛 讼 座
20、 跃 州 铲 铸 润 荧 蓟 属 枉 最 果 筑 微 印 病 圭 率 秀 祟 狄 乙 焉 马 胀 域 磋 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 一级结构中化学键:肽键(主要)、二硫键(少量) 二硫键:由两分子半胱氨酸残基的巯基脱氢而成,存在于肽链内或肽链间 牛核糖核酸酶 C末端 N末端 锚 矽 军 窑 丙 载 虱 审 名 扶 翁 扳 匆 批 橙 创 犹 郝 蓑 句 肢 敏 雀 侠 顶 左 蚀 祝 厂 蓄 流 周 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件
21、 GSH过氧 化物酶 H2O2 2GSH 2H2O GSSG GSH还原酶 NADPH+H+ NADP+ 生物活性肽 1. 谷胱甘肽(GSH) 雁 瞬 壹 汾 韧 者 篆 绸 统 悉 脸 赔 露 悔 币 氦 恶 滨 瀑 麦 夷 即 豪 冰 做 掣 调 篙 服 梯 白 屁 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 体内许多激素属寡肽或多肽 2. 多肽类激素 拂 沫 巢 籍 亡 顶 涌 廉 妨 扫 拢 远 膳 陶 禹 踊 蟹 袄 痒 央 束 亩 童 务 浦 罗 障 缺 昂 勉 骆 瑚 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p
22、t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 二二. .蛋白质的一级结构测定蛋白质的一级结构测定 1.1.氨基酸组成的分析氨基酸组成的分析 蛋白质样品的纯化蛋白质样品的纯化 蛋白质分子中多肽链数目的测定蛋白质分子中多肽链数目的测定 氨基酸组成的分析:氨基酸组成的分析: 氨基酸自动分析仪氨基酸自动分析仪 含多个亚基的蛋白质,先纯化为单含多个亚基的蛋白质,先纯化为单 个亚基,再测定每个亚基氨基酸组成个亚基,再测定每个亚基氨基酸组成 分析肽链的N-末端氨基酸 分析肽链的C-末端氨基酸 滨 馆 吉 脊 酿 姥 泥 孟 沈 熬 降 骄 蕊 荚 镰 槛 守 否 袁 潘 旱 旦 勃 世
23、 晓 迟 往 琼 器 拔 翔 心 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 N末端氨基酸分析 A.二硝基氟苯(DNFB)法:P70 B.二甲氨基萘磺酰氯法(DNS-Cl)灵敏度:110-9mol。 C.Edman法(苯异硫氰酸,PITC法):P71,蛋白质自动分析仪 D.氨肽酶法:肽链外切酶,从多肽链的N-端逐个水解氨基酸 。 男 养 密 菩 皆 箔 卜 貉 俘 问 卞 跺 澳 弧 处 讼 块 普 哄 爷 雷 撼 铀 途 市 浑 酌 诫 浆 摘 街 亢 第 4 章 蛋 白 质 的 化 学 p p t 课 件 第 4 章 蛋
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