医学课件益气活血中药延缓血管老化的作用与机制研究.ppt
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1、益气活血中药延缓血管老化的 作用与机制研究 中国中医科学院 雷 燕 陈可冀 等 973项目分课题之一 慌 芭 呼 棒 摈 睛 露 辩 碰 硅 艰 冠 疤 香 助 嗡 偿 促 猖 遇 吾 阳 钢 乾 显 晴 义 匝 灯 倦 辰 渊 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 1 研究背景 血管老化(vascular aging)分为随增龄所致的生理性血 管老化和各种疾病引起的病理性血管老化,均表现血管在 形态和功能上发生各种衰老变化,如僵硬度增加、顺应性 降低和动脉管壁增厚、血管内
2、皮功能低下等 血管老化是人体衰老的关键始发因素,也是老龄人群心血 管疾病风险增加的主要原因 衰老的过程其实是一个动脉进行性硬化的过程,动脉硬化 是衰老的根本原因,对衰老起决定因素的是血管而非年龄 恩 智 慈 擞 崩 佰 月 克 舆 杖 劲 泼 蒂 逻 醛 惺 舞 徒 缺 奥 谣 逃 碳 庆 左 陨 肯 坍 截 谎 症 赠 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 2 研究背景 目前我国老龄人口比例以每年3%的速度递增,老龄人群具有 心脑血管病发病率高的特点,高血压病、冠心病、心
3、功能 不全、脑卒中等发生率随增龄急剧上升,均存在着明显的 心血管老化的表现,即心血管系统结构和功能发生特征性 改变 随增龄出现的血管老化问题已成为研究心血管病危险因素 及防治的新靶点,开展心血管衰老的中医药干预研究,对 延缓血管老化,防治心脑血管疾病具有重要意义 偏 吱 骨 声 媳 厂 惮 佛 韶 谣 侮 走 咋 瞻 宁 谚 沛 挤 狂 拽 块 傅 草 奢 锚 谜 嚣 岭 蹈 栋 锰 岭 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 3 血管老化属于血管病变的一种,可由增龄、高脂饮
4、食、运动 减少、高血压、糖尿病、肥胖等原因引起,老化的血管病理 学表现为血管内膜增厚、血管硬化和动脉血压改变 随着对血管病变认识的深入, 已知血管壁病变而不是管腔病 变的发生发展才是各种心血管事件发生的基础;在细胞和分 子水平,血管老化表现在血管内皮细胞、平滑肌细胞和胞外 基质水平的改变 血管老化改变了各种心血管疾病的病理生理机制,从而改变 了疾病发生的阈值、严重程度和预后 老龄及血管老化概述 老龄及血管老化概述 血管老化与血管病变 膜 镭 兼 茅 那 胁 喉 殉 阎 铆 局 通 轧 狸 造 茬 羔 嘲 椒 叔 阜 妻 而 沁 札 爬 躬 曲 剂 示 尖 垛 益 气 活 血 中 药 延 缓 血
5、 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 4 血管老化de主要表现 p 脉搏波速度(PwV) 是评价血管硬度的较好指标 p 脉压增大是反映血管硬化的一项重要指标 p 颈总动脉内径反映血管壁弹性与伸展性随年龄而下降,是衰老的标志 p 踝臂指数(ABI)作为评估血管功能的指标,其降低反映AS p 晚期糖基化终产物(AGE)随增龄在体内积累,是老年病的病理基础之一 p 活性氧(ROS)水平异常增高在介导血管衰老中居于重要的地位 p 肾素-血管紧张素系统(RAS) 调节血管细胞的凋亡、VSMC 迁移、炎性反 应及ECM
6、重建等,Ang是RAS的功能多肽 p 基质金属蛋白酶(MMP-2)与其抑制剂(TIMP-2) 比值的调节可以控制血管 重构的发生、发展 娇 牌 邀 陵 顷 漱 氰 苫 阑 是 幕 重 夹 串 田 区 角 渔 捶 杏 殊 症 皇 该 润 筒 息 互 绝 尘 医 茶 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 5 中医学对血管衰老的认识 u认为虚损致衰。气(肾)虚夹瘀阻络是血管衰老的基本病 机;延缓衰老应补虚祛瘀法并用 u心血管疾病的基础病变和共同归路是血管老化,也是多种 血管病变在
7、“入络”阶段异病同治的病理基础 u益气活血药人参、三七是常见的具有抗衰老作用的天然药 物,均富含三萜类达玛烷型皂甙,国内外药理研究已证实 此类有效成分有抗衰老作用,可达到益气活血,祛瘀生新 ,通脉活络的作用 蜂 砂 吁 侗 颅 雾 践 简 绘 棚 称 悼 碉 静 缎 寺 纱 阎 夕 娩 陶 娃 禾 蜕 傻 鲍 畏 赎 强 堡 劈 胞 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 6 研究目的 u以自然衰老小鼠为模型,观察衰老小鼠血管老化所导致 血管壁结构和功能的改变,阐明血管衰老的
8、可能机制 u通过复制内皮细胞( EC) 模型,揭示血管细胞衰老机制 u观察益气活血中药能否通过产生ROS的NADPH氧化酶 亚单位p47phox的途径延缓血管老化 u揭示益气活血中药人参三七川芎提取物延缓血管老化的 作用和机制 缕 帆 村 卜 喉 从 宋 策 殆 迄 弥 桥 钮 姿 笆 锋 盆 蛤 慧 荐 惦 寅 喘 椽 耗 兆 扩 敏 徐 僻 唾 疙 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 7 研究方法 模型:健康雄性自然衰老小鼠,14月龄,70只 复制衰老血管内皮细胞(E
9、C)模型 分组:衰老模型组、人参三七川芎高、中、低剂量组、 维生素E组(VitE组)、另设青年对照组 给药:按照小鼠和人体重剂量折算系数关系,中药大、 中、小剂量相当于临床用量的2倍、1.5倍、1倍, 维生素E50.0 mg/(kgd),给药3个月 峰 兑 拔 勒 瞄 赛 雀 杰 洼 蔡 拽 明 罪 署 辑 喂 扣 沙 咕 惶 苞 沿 褥 鸥 刮 枷 温 东 汗 怒 兄 沽 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 8 实验药物 中药制备: l人参、三七、川芎 按比例加入3倍7
10、0乙醇提取3次 ,将醇提取液进行乙醇回收,浓缩至无醇味,制成 中药浸膏,含3.164 g生药/g浸膏 对照药: 维生素E 购自Sigma公司 梅 脆 加 烘 朝 丧 试 锻 凋 嘱 蠢 二 徒 守 岂 冤 闭 沪 讼 育 优 味 展 拘 堪 谢 招 划 超 政 亦 范 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 9 研究内容 构建自然衰老小鼠模型 观察行为学改变 胸主动脉Messon染色及羟 脯氨酸含量测定 检测血浆Ang含量 血管组织抗超氧阴离子 糖基化终末产物(AGEs) M
11、MP-2/ TIMP-2比值 人参、三七 川芎 干预 复制衰老VEC模型 细胞形态学观察 衰老标志物-gal检测; 激光共聚焦观察 ROS; MMP-9、AGEs含量和 TGF-1的表达 流式检测线粒体膜电位 细胞周期 观察指标 拐 矮 邯 限 作 变 蛆 餐 瞻 概 陛 涤 函 滓 鹏 闯 赣 懊 垢 杭 颈 稽 抡 骗 餐 扁 秒 纷 捞 血 炊 穿 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 10 益气活血药延缓血管老化的实验研究 EC部分 4代 5代 7代 8代 10代
12、11代 各代内皮细胞生长状况的比较 扼 浊 睦 贼 羞 绑 圃 涡 遭 朋 濒 把 瞎 缘 失 酌 两 裴 够 募 而 郸 燃 钵 买 唐 绦 袒 油 煞 楞 稿 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 11 益气活血药延缓血管老化-EC形态学观察 中药高剂量组 中药低剂量组 光镜 100 8代对照组 VitE组 第8代自然衰老细胞,中药高剂量和VitE 组细胞较衰老模型组光镜下观察, 内皮细胞生长状态好,数量较多,增殖较旺盛 奥 屈 犬 廊 沮 粒 辊 汲 角 秋 押 模
13、卵 拯 习 墒 滔 歉 刚 瑟 臭 诞 辕 勇 绽 锨 着 腻 以 农 干 刹 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 12 益气活血药延缓血管老化-内皮细胞B-gal染色 中药高剂量组 中药低剂量组 光镜x400 8代对照组 VitE组 8代模型衰老组表达B-gal蓝染细胞较多,约78%左右;VitE组阳性细胞数约25% 左右;中药高剂量组约42%左右,低剂量组约38%左右 住 兼 姬 祖 舷 矽 德 唇 韶 彼 径 陆 醉 窟 庇 虞 胡 饿 旬 斌 舰 晌 勺 窍 炼
14、纶 坎 宴 拧 嗡 丝 畏 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 13 细 胞 周 期 8代衰老组 VitE组 中药高剂量组 中药低剂量组 售 凉 癌 狠 犯 酞 往 韵 葛 戊 截 戍 枪 需 珊 宜 糖 奎 异 裁 权 柑 馅 霹 骗 弊 涨 咖 窒 淑 恍 左 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 14 细 胞 周 期 与VitE组比较, 8代衰老
15、模型组细胞周期向G0-G1期明显停顿,G2-M 期细胞明显减少;与衰老模型组比较,中药高、低剂量组及Vit E组G0 - G1期细胞明显减少,处于G2-M期的细胞明显增多,差异有统计学意 义;表明中药在一定程度上能够延缓细胞衰老,促进细胞增殖 竞 坷 霹 善 掀 泛 康 饵 万 感 辜 媒 笨 泵 稻 唱 郴 逞 钩 扣 密 姓 斧 随 解 叭 嘉 栓 围 嫉 院 核 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 益 气 活 血 中 药 延 缓 血 管 老 化 的 作 用 与 机 制 研 究 15 益气活血药延缓血管老化-细胞内ROS含量(激光共聚焦) 8代模
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