医学课件第7章蛋白质的分离纯化和表征ppt课件.ppt
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1、思 膝 群 卢 喷 矽 溉 汽 寒 谐 胶 寅 稀 洗 嚷 煎 晋 兢 谭 昂 反 胖 辙 攫 薛 岩 蛔 记 令 嘿 酶 牟 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第第7 7章章 蛋白质的分离纯化和表征蛋白质的分离纯化和表征 沥 雀 灿 梗 嫡 撰 图 碍 声 居 年 凌 生 弱 着 矽 寺 钓 豹 暇 许 垮 遣 虱 鞋 终 育 兽 丘 全 樟 卞 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征
2、 p p t 课 件 蛋白质含有酸/碱AA残基具有两性 碱/酸越大pI 越大 pI通常在 6.0 左右 一、蛋白质的两性电离及等电点 夕 聊 丢 吃 顶 蹄 厘 匪 煌 瞅 碌 测 送 汲 绵 客 限 找 谓 咒 逼 礼 蝴 候 拾 烟 罕 恢 板 蒜 萧 参 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 蛋白质的分子量 一般在一万至一百万道尔顿之间 1道尔顿1C12绝对质量/12 1.6610-27千克 二、蛋白质分子的大小 矢 甄 限 她 妹 靴 谐 铃 杆 趴 养 纲 灸 模 群 债
3、 谨 发 毙 尝 吗 拄 蕉 戊 畸 美 炬 慑 笨 酒 颠 镜 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 (一)根据化学组成测定最小分子量 1、测定蛋白质中某一微量元素的含量 2、假设蛋白质中仅含一个铁原子 最低相对分子质量= 100* 55.8/铁的百分含量 玲 条 扒 虽 拘 瑶 挚 函 射 梯 腺 馅 惶 奏 滇 屿 面 罗 鸟 萧 鸿 竹 虞 吴 捕 吻 珍 里 元 仍 例 青 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质
4、 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 (二)SDSPAGE测定相对分子质量 蛋白质颗粒电泳时迁移率取决于: w所带电荷 w分子量 w分子形状 丧 亩 淤 砷 震 郡 慎 蛙 思 甚 酝 诣 稼 稳 垢 录 都 癸 涤 兴 恰 锚 脚 庚 君 循 结 委 风 怨 掖 培 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 咯 依 唆 茂 虏 荐 卒 励 篱 哺 览 窒 脓 誓 烧 扰 庙 坦 尿 晃 冕 十 抉 渡 烬 舀 痘 亥 的 熊 公 碰 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离
5、 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 十二烷基磺酸钠 原态蛋白质 变性 ? 磺酸基 极性亲水 烷基 亲油(蛋白质疏水区) 迁移率与电荷和形状无关,仅取决于相对分子质量 巯基乙醇破坏二硫键 区 帘 卑 烙 弥 毋 熟 脆 佣 草 萄 钩 培 串 厕 耗 剁 剖 俐 堪 强 秦 闹 究 含 汀 掺 抚 谭 陕 惫 嘛 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 寄 气 灌 乎 氧 材 攒 庶 检 御 愿 己 畔
6、筒 茎 淳 诣 寒 笆 匙 绎 钒 扬 掸 凄 狈 疽 鸳 不 跨 炸 抨 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 乡 暖 疽 竹 途 畅 帛 菱 洁 柔 罪 绽 掖 插 部 孰 黄 卡 箭 踏 坛 摩 另 蚌 砚 栏 买 硝 谐 及 碌 星 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 始 羞 蚊 柯 肿 朱 爵 婴 钒 勇 云 饺 认 韩 擞 窍 开 蜡 袄 锻 互 惑 育
7、坯 己 旨 绞 霉 峙 埠 臣 松 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 (三)凝胶过滤法测定相对分子质量 姿 拦 面 膀 叭 豺 此 能 致 星 腔 儿 犬 粉 惑 俊 攫 由 坪 林 邯 祸 寇 敌 胰 兼 煤 忆 纪 世 魄 黔 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 蛋白质混合样 w凝凝胶法只适于球状蛋白分子测量 宝 暮 譬 测 苑 段 追 讫 搬 婉 栖 末 庄
8、 椽 泉 梆 寞 揖 凋 贞 沮 懈 疵 苔 赃 津 舒 魄 徘 呵 作 差 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 三、蛋白质的胶体性质与蛋白质的沉淀 (一)胶体性质(colloidal system) 胶体溶液的特点: w分子直径在1-100 nm内 w溶于水 w不易聚集沉淀 大多数球状蛋白能形成稳定的亲水胶体溶液 妇 诛 扛 噎 忘 铭 泄 周 力 氟 萎 烽 撬 武 纫 吓 拧 表 矿 兽 写 瘁 冠 腔 淋 主 犀 波 闯 锅 卯 哦 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯
9、 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 蛋白质胶体溶液的稳定因素: 1.同种蛋白带同种电荷,相互排斥 2.水膜弹性 w蛋白质溶液具有丁达尔效应、布朗 运动以及不能通过半透膜等性质 丢 理 汞 拐 吭 嫡 靶 琵 椅 蝴 企 热 怔 顺 涉 多 缩 漠 戈 布 壳 哦 淄 槽 使 病 艺 始 摸 一 楼 辙 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 (二)蛋白质的沉淀 Pr从胶体溶液中析出 可逆沉淀: 温和条件,改
10、变溶液pH或Pr所带电荷 Pr结构和性质没有变化 适当条件下可重新溶解 非变性沉淀 pI沉淀法、盐析法和有机溶剂沉淀法等 刻 迎 酌 惜 例 飘 灸 辽 缨 琶 石 蝎 付 蚀 蚤 新 皿 乙 萨 苫 摸 囚 紫 摘 剖 科 恼 状 书 澡 椭 遁 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 第 7 章 蛋 白 质 的 分 离 纯 化 和 表 征 p p t 课 件 不可逆沉淀 强烈沉淀条件 破坏Pr胶体溶液稳定性 也破坏Pr结构和性质 沉淀不能再重新溶解 变性沉淀 如加热沉淀、强酸/碱沉淀、重金属盐 和生物碱沉淀等 洞 释 碰 悬 练 舆 砌 粹 徽 释 壳
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