最新高考生物实验记忆知识点总结优秀名师资料.doc
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1、高考生物实验记忆知识点总结高考生物实验记忆知识点总结 颜色反应 1斐林试剂检测可溶性还原糖 原理:还原糖+斐林试剂?砖红色沉淀 注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热。 应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎。 2苏丹?、苏丹?检测脂肪 原理:苏丹?+脂肪?橘黄色;苏丹?+脂肪?红色 注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察。 应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪。 3双缩脲试剂检测蛋白质 原理:蛋白质+双缩脲试剂?紫色 注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温(不需要加热
2、)。 应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定。 4碘液检测淀粉 原理:淀粉+碘液?蓝色 注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘。 应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉 5DNA的染色与鉴定 染色原理:DNA+甲基绿?绿色 应用:可以显示DNA在细胞中的分布。 鉴定原理:DNA+二苯胺?蓝色 应用:用于DNA粗提取实验的鉴定试剂。 6吡罗红使RNA呈现红色 原理:RNA+吡罗红?红色 应用:可以显示RNA在细胞中的分布。 注意:在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色。 7台盼蓝使死细胞染成蓝色 原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过
3、性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。 应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性。 8线粒体的染色 原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色。 应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在。 9酒精的检测 原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色。 应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶。 10CO2的检测 原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄。 应用:根据石灰水混
4、浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况。 11染色体(或染色质)的染色 原理:染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液)染成深色。 应用:用高倍镜观察细胞的有丝分裂。 附:实验详情 实验一:使用高倍显微镜观察几种细胞 一、实验目的: 1、学会如何使用显微镜观察细胞; 2、了解细胞的结构; 3、学会制作临时装片。 二、实验材料:(实验材料可换)松针、动物血液、动物神经细胞永久装片 三、实验用具: 载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜(物镜5X、10X、40X) 四、方法步骤: 1、制作松针的临时切片: (1)取干净的载玻片一个平
5、置于试验台上,用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。 (2)将土豆切成条状(截面约:0.5X0.5cm)取两条,将一根松针夹在两个土豆条之间,用刀片削成尽量薄的薄片,削时,手腕不动,靠大臂带动小臂移动刀片。切片数次。从中选取较薄的切片,置于载玻片的水滴上。 (3)从一侧轻轻盖上盖玻片,不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴,即完成临时切片的制作。 2、观察切片: (1)取出显微镜,置于试验台上靠左的位置,打开光源。 (2) 将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上,调整载物台位置,使盖玻片对准光源。 (3)使用5X物镜观察切片,使松针切片在视野中心,换成10X物镜,观察松针叶面横切结构。 (4
6、)换成40X物镜观察,注意细胞及细胞内物质结构,画图。 3、 动物血液临时装片的制作及观察(除了不用切片,其他类似) 4、 动物神经细胞永久装片的观察。 五、考点提示: 1、松针的叶面结构是什么样的, 2、动物细胞的结构是什么样的,与植物细胞又什么不同, 3、显微镜的物镜倍数愈大,视野的亮度如何,物体的大小如何, 4、如何调节焦距, 5、如何才能使切片尽量的薄,切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。 实验二:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一、实验目的: 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质,阐明实验原理颜色反应,识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定
7、颜色,初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象,掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。 二、实验原理: 某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。 1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基,因此叫做还原糖;蔗糖分子内没有,为非还原糖。实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性还原糖,而不能鉴定可溶性非还原糖。 可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的CuO沉淀。如: 22+ 葡萄糖 + 2Cu + 4OH 加热 葡萄糖酸 + CuO?(砖红色)
8、+ HO 2 22+即Cu 被还原成CuO,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。 2用斐林试剂鉴定还原糖时,溶液变化过程为:浅蓝色?棕色?砖红色沉淀 淀粉遇碘变蓝色(直链)或紫(红)色(支链)。 2、脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。 在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹?,苏丹?,苏丹黑及油红O等。
9、脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理,适当提高温度(37?-60?)对组织切片染色效果是有好处的。 脂类染色,用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。 脂肪可以被苏丹?染液染成橘黄色或橙红色(或被苏丹?染液染成红色),胆脂素呈淡红色,脂肪酸不着色,细胞核呈蓝色。 3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能2+与双缩脲试剂中的Cu作用,产生紫色反应。) 三、实验材料: 1、做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色
10、的植物组织,如苹果、梨。(因为组织的颜色较浅,易于观察。)经试验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。 2、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡34小时(也可用蓖麻种子)。 3、做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 4、淀粉的鉴定:马铃薯匀浆。 四、实验用具:双面刀片、试管(最好用刻度试管)、试管夹、试管架、大小烧杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜 五、实验试剂: 1(斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO
11、溶液) 42(苏丹?或苏丹?染液 3(双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO溶液) 44(体积分数为50%的酒精溶液 5(碘液 6(蒸馏水 六、方法步骤: 一、可溶性糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高,组(去皮、切块、研磨、过滤) 织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管,向试管内注入2mL 组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的斐林应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别斐林试剂很不稳定,甲、乙液试剂,振荡。 配制、储存
12、,使用前才将甲、乙液等混合保存时,生成的Cu ( OH ) 0量混匀成斐林试剂; 在70 90C下分解成黑色CuO2和水; 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu OH样液中进行检测。 生成。 04. 试管放在盛有50-65C温水的最好用试管夹夹住试管上部,使试管防止试管内的溶液冲出试管,大烧杯中,加热约2分钟,观察底部不触及烧杯底部,试管口不朝向造成烫伤; 到溶液颜色:浅蓝色 ? 棕色 ? 实验者。 砖红色(沉淀) 也可用酒精灯对试管直接加热。 缩短实验时间。 二、脂肪的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶
13、薄干种子要浸泡34小时,因为浸泡时间短,不易切片;浸泡片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸新花生的浸泡时间可缩时间过长,组织较软,切片不易成水纸吸去装片中的水。 短。 形。切片要尽可能薄些,便于观察。 在子叶薄片上滴23滴苏丹?或苏丹?染色时间不宜过长。 染液,染色1分钟。 用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精 酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,洗去浮色,吸去酒精。 会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上12 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气滴蒸馏水,盖上盖玻片。 泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,装片不宜久放。
14、 时间一长,油滴会溶解在乙醇中。 可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。 三、蛋白质的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 制备组织样液。 黄豆浸泡1至2天,容易研磨成浆,(浸泡、去皮研磨、过滤。) 也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 2+鉴定。加样液约2ml于试管中,加A液和B液也要分开配制,储存。与蛋白质先加NaOH溶液,为Cu入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双鉴定时先加A液后加B液。 反应提供一个碱性的环境。A、B2+缩脲试剂B液34滴,摇匀,溶液 液混装或同时加入,会导致Cu变紫色。 CuSO溶液不能多加。 变成Cu ( OH ) 沉淀,而失效。 42否则CuSO的蓝色会遮盖反应的
15、真4实颜色。 可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。 如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。 附:淀粉的检测和观察 碘液不要滴太多 以免影响颜色观察 用试管取2ml待测组织样液,向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。 七、考点提示: 1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些, 答:葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖;淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。 2、还原性糖植物组织取材条件, 答:含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。 3、研磨中为何要加石英砂,不加石英砂对实验有何影响, 答:加石英砂是为了使
16、研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少,使鉴定时溶液颜色变化不明显。 4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法,混合的目的,为何要现混现用, 答:混合后使用;产生氢氧化铜;氢氧化铜不稳定。 5、还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的顺序为, 答:浅蓝色 棕色 砖红色。 6、花生种子切片为何要薄, 答:只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观察。 7、转动细准焦螺旋时,若花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么, 答:切片的厚薄不均匀。 8、脂肪鉴定中乙醇作用, 答:洗去浮色。 9、双缩脲试剂A、B两液是否混合后用,先加A液的目的怎样通过对比看颜色变化, 答:不能混合;
17、先加A液的目的是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。 实验三:观察DNA和RNA在细胞中的分布 一、实验原理: 1、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA主要分布在细胞质中。 2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。 3、盐酸的作用 ? 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输; ? 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合 二、实验材料:人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表
18、皮细胞 三、实验用具:大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、 石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜 四、方法步骤: 1、取材 ? 滴:在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液; ? 刮:用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下; ? 涂:将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中; ? 烘:将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。 2、水解 ? 解:将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中,进行材料的水解; ? 保:将小烧杯放入装有30?温水的大烧杯中保温5分钟。 3、冲洗涂片 ? 冲:用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟; ? 吸:用吸水纸吸
19、去载玻片上的水分。 4、染色 ? 染:用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5分钟; ? 吸:吸去多余染色剂; ? 盖:盖上盖玻片。 5、观察 ? 低:在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰; ? 高:转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。 五、考点提示: 1、取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质; 2、取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞; 3、冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗; 4、用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂
20、; 5、烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟。 实验四:体验制备细胞膜的方法 一、实验原理:细胞膜的流动性和半透性 二、实验材料:猪(或牛、羊、人)的新鲜的红细胞稀释液(血液加适量的生理盐水) 三、实验用具:蒸馏水、试管、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜 四、方法步骤: 1、用试管吸取少量红细胞稀释液,滴一小滴在载玻片上,盖上盖玻片,制成临时装片 2、在高倍镜下观察,待观察清晰时,在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水,同时在另一侧用吸水纸小心吸引,注意不要把细胞吸跑。上述操作均在载物台上进行,并持续观察细胞的变化。可以看到近水的部分红细胞发生变化;凹陷消失,细胞体积增大,很快
21、细胞破裂,内容物流出。 五、考点提示: 1、选择动物细胞进行实验的原因:动物细胞无细胞壁。 2、选择哺乳动物成熟红细胞进行实验的原因:人和其他哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多的细胞器(膜),可以得到较纯净的细胞膜。 3、细胞破裂后,用什么方法获得较纯的细胞膜:将涨破的细胞溶液,经过离心分离得到细胞膜。 4、如何获得植物细胞膜:先用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁水解得到原生质体;再将原生质体放入清水中,水自由扩散进入,原生质体涨破;最后经过离心分离得到植物细胞膜。 5、稀释及稀释的时候用生理盐水的原因:稀释后,可以减少血液中的血浆蛋白等杂物。用生理盐水是为了保持渗透压,防止在稀释的时候就发生细胞破
22、裂。 实验五:用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体 一、实验原理: 1、叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色、扁平的椭球形或球形,散布于细胞质中,可以在高倍显微镜下观察它的形态。 2、线粒体普遍存在于动物细胞和植物细胞中,健那绿染液能使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色。通过染色,可以在高倍显微镜下观察到处于生活状态的线粒体的形态有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等。 二、实验材料:新鲜的藓类的叶、人的口腔上皮细胞、新配制的质量分数为1%的健那绿染液(将0.5g健那绿溶解于50mL生理盐水中,加温到30-40摄氏度,使其充分溶解) 三、实验用具:显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签 四、方法步骤: 1、观察叶绿体
23、 低倍镜下找到叶片细胞?低倍镜下找到叶片细胞?高倍镜下观察。 2、观察线粒体 染色?制片?低倍镜下找到口腔上皮细胞?高倍镜下观察。 五、考点提示: 1、观察叶绿体时选择藓类叶的原因:藓类属于低等植物,叶片是绿色的单层细胞,不需加工即可进行观察。 2、临时装片中的材料要随时保持有水状态的原因:保证细胞器的正常形态并能悬浮在细胞质基质中,否则,细胞失水收缩,将影响细胞器形态的观察。 实验六:植物细胞的吸水和失水 一、实验目的: 1、学会使用显微镜观察植物细胞质壁分离和复原。(与前面的知识:显微镜的使用联系) 2、观察不同浓度的溶液对细胞吸水失水的影响,掌握此种方法的具体应用。 3、通过观察植物细胞
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