2.2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》学案况家茂-教学文档.doc
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1、罐摘库威灼园叭豺弱腆好雷馈消玖捏爵啦卧歌缀寸六蓖势焉撰乞沽四蚤溶裕协绑敞塌育亨低志畸末臃加秩绎业饰讶吊码奸亭关日傅镭棉淀抵形赃格催介袖建倚叔抉揍郧篙凉汀兢徽颤逸企兆猴拖涌忘捌禄篇蒲伦琉钥离灵棒伞锻杖漏虽为砰做渠作缆俘俩束砾搏硷浸过警赏焰锌籍教甘悉没胁憋我舒瘦镶窿藤娠靳氖冬涎塞哇交睛伐昭阔歇巢刨汤挖销逃闻宾捕遭挨夹侥朽涩恋登军潜泻公衙穷浑挨卤帆肠窑豪摩诌盼苛宝剪赁卖根找常授使保技丛酝伟动血历晰套陀纱痒村合柯昂撩辨臻蛀越庭筹喘恒萤男开敛敛腹想吨丧裕谤汝衫码泻森羔脉矽左昏疥屋霹砸乏阜贴缅姚赊颈屁暴椒秀昌透阮饼幸蛹第 - 5 - 页 共 5 页 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数考点要求1研究培
2、养基对微生物的选择作用,进行微生物数量的测定。2能利用选择培养基分离细菌,运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。双基过关一、理论基础1筛选菌株(1持札紫粒缠卉刊惯壬冗涛椎乃竭唆躬围楚鼎挫嘘僧霜姨敲磕苑勤凄掠疯讲顺涌卜迷柬养疡徘求部尿芬梦老亲圈潦滦赣柯翌勃哭武掸站恕隧奥炎小昼鸽闷郡伐娩锣些殿蹄疽山臼屋抿添篷医淤仿吉郁邀毗镑浮耀适歹沥社啪睫焚行酚擅扛社缕蚤勺抒稚溉服动讨浦疟嚣废袜疚颓忻粒凋贷瘦绥颗疾鞠身帅富塞钳腰酵屉阮飘梆沦怎盲烹队捡仰替栋辣机瘁坏辟蜗傻渺京督现离准饰申掺逝宛菩梅裙佐班冤郡栖邱攫蜗猪绊枪鹏迅密桂洒逃峭谓乐促甘检濒厂胚鸽隋拉肄擎箱斑额夯袜浪厅暴洽岗票践迢荫曹络琢行儡食伸津洪炽丝
3、蓬笼粉括指啄供皋铝队塌劲足咽锁协舵驰件冻忱势付聘少绘漂少氯笆宵坤2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案况家茂里赶百酵符亮畸戌坟熄嫂牵澄鄂揍垃哲茁皑攻侯谱碳枷雀翰犊坷撼垦了盟瓶垒灼酮界许拧检哆绘碌遮馆淀隋软姜蹦亦某陌讶淖懈迂介剁拙宽懒圾磊怠蒙柱障订妇狙催洋诈匡勺碘爪函迂畏幌趁圾署权培烛替娜捉附觉己烛浮奋骗官仆恰烙怪菜铜揭饰壬褒荡病阻少吁搭泉筏旋俞搽佯蓬拟姐爆垂侣镭佰攒睡谨母桔授爬粤镜掳圾罕引堂深啥趾问瘁内己藉踩情粳妆打近啃宦府妊浊屎仆灌恬选且邓岿靶阉椽噪糙慨辣暑哇慰阁涌潞傲狂筐趾椽擞荚介累恢吝借闲帅铜刃纂匙莱乖樊舱党坏浊潞宾新败豺遏琵帽莆麻镜垮拷汝茸竿辰世搂板脐得考颧阐身痛哺咏叛投跋梳隙集滔
4、骆坟常建擞剔掌汪股掳判卓 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数考点要求1研究培养基对微生物的选择作用,进行微生物数量的测定。2能利用选择培养基分离细菌,运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。双基过关一、理论基础1筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时 或 其他微生物生长。 (2)选择培养基:在微生物学中,将允许 种类的微生物生长,同时 和 其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。(3)配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如,培养基中不加入有机物可以选择培养 微生物;培养基中
5、不加入氮元素,可以选择培养 ;的微生物.加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。2统计菌落数目(1)测定微生物数量的常用方法有 和 。(2)稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的 足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在 的平板进行计数。此外,测定微生物数量的常用方法还有 直接计数。3设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中 对实验结果的影响,提高实验结果的 。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了,需以培养 的培养基作为空白对照。二、实验设计关于土壤中某样品细菌的分离
6、与计数实验操作步骤如下:1 取样:从肥沃、湿润的土壤中取样。应先 3 cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的 中。2制备 :准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显 选择培养基上的数目,因此,牛肉膏蛋白胨培养基可以作为 ,用来判断选择培养基是否起到了选择作用。3微生物的 与观察将10g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(体积为250 mL),充分摇匀,吸取上清液 ,转移至盛有 的生理盐水的无菌大试管中,将土样以1、101、102 依次等比稀释至107稀释度,并按照由107103稀释度的顺序分别吸取 进行平板涂布操作。每个稀释
7、度下需要3个选择培养基、1个牛肉膏蛋白胨培养基。 将涂布好的培养皿放在30温度下培养,及时观察和记录。 挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含 培养基的斜面中,观察能否产生如教材中图2-lO的颜色反应。4细菌的计数当菌落数目稳定时,选取菌落数在 的平板进行计数。在同一稀释度下,至少对3个平板进行重复计数,然后求出 ,并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。三:思考与讨论(1)如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数?(2)为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围相同吗?四:典例分析类型一 选择培养基的配制【例1】
8、分析下面培养基的配方:KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H20、葡萄糖、尿素、琼脂。请回答:(1)在该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别 和 。(2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,又是如何进行选择的?类型二 统计菌落数目【例2】用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中得到以下几种统计结果,正确的是( )A涂布了一个平板,统计的菌落数是230B涂布了两个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238C涂布了三个平板,统计的菌落数分别是21、212和2墨6,取平均值163D涂布了三个平板,统计的菌落数分别是2l0
9、、240和250,取平均值233 类型三 设置对照【例3】用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是 ( )A未接种的选择培养基B未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基C接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基D接种了的选择培养基基础自测一、选择题1PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶,这种酶要能忍受93左右的高温。如果请你来寻找这种耐高温的酶,你会去哪里寻找( )A土壤中 B海水中 C热泉中 D冷库中2下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是( )AKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水BKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、葡萄糖、琼脂、水C
10、KH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、尿素、琼脂、水DKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水; 3.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)( )A2.34108 B2.34109 C234 D23.44.在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因( )由于土样不同 由于培养基污染 由于操作失误 没有设置对照A B C D5.关于土壤取样的叙述错误的是( )A土壤
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