ELISA试剂盒检测猪肉中“瘦肉精”前处理注意事项.doc
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1、ELISA试剂盒检测猪肉中“瘦肉精”前处理注意事项 食品安全问题越来越引起人们的广泛关注和重视,尤其是被频繁曝光的“瘦肉精”事件,ELISA试剂盒在县级畜产品安全检测机构对动物尿液及组织中“瘦肉精”的筛查功不可没。ELISA试剂盒的可批量、准确、快速检测“瘦肉精”的特点受到县级检测机构人员的青睐。笔者根据从事多年检测“瘦肉精”工作的体会谈谈用ELISA试剂盒检测猪肉中“瘦肉精”前处理的主要环节中应注意的事项。 一、均质 为保证后期检测提取的完全性,选取猪肉样本的肌肉部分,去除油脂和筋膜,用刀切细,用绞肉机绞碎成糜状,每处理一个样品都要仔细清洗刀及绞肉机等,避免交叉污染。 二、样本的保存 均质后
2、的样本须按本单位的编号方法对其编号及分装保存,除了需立即进行检测的,剩余样本应冷冻储存。 三、准确称取 根据试剂盒的要求选取相应感量的天平准确称取样本进行检验,同时测试样本时,应增加1个阳性添加回收样本作为后期分析该试剂盒回收率的参考。 四、震荡提取过程 震荡提取是指将试剂盒提供的提取溶剂加入到装有均质后样本的容器(具塞)中,反复震荡,使提取剂与样本充分混合,以深入样本组织内部提取待测组分。在这里需要注意的是:(1)在向样本中加入提取剂时,为防止组织结块,应边加边震荡。(2) 如发生结块现象,可用干净吸头或玻璃棒轻轻搅拌后再次离心。也可以加入适量的提取剂,重新震荡,但一定要保证样本的稀释系数不改变。 五、氮气吹干 在上一过程中引入的提取溶剂可能会影响待测组分的分析,就需要去除全部的溶剂进行溶剂转换。这就需要在前处理过程中利用氮气把样本吹干,再用复溶液溶解干燥样本的残留物。注意事项有:1.吹干样本之前,用甲醇清洗氮吹仪针头,主要是防止杂质的干扰。2.针头应在液面上方0.5-1.0cm处,下方液面呈现一小凹陷即可,随液面的下降可随时调整针头的高度,可缩短氮吹的时间。3.样本吹干后需立即取下,避免吹的时间过长导致样本过干而影响最终的检测结果。4.吹干后的样本可能由于所用的药物不同,应尽快进行下一步操作,一旦复溶样本就不易保存。
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