β―壳聚糖的制备、降解及胆固醇吸附活性研究.doc
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1、壳聚糖的制备、降解及胆固醇吸附活性研究一、概述 1.甲壳素和壳聚糖 甲壳素又名甲壳质、几丁质等,化学名-(1,4)-2-乙酰氨基-2-脱氧-D-葡聚糖,广泛存在于节肢动物的外壳及某些微生物的细胞壁中,是自然界存在的第二大天然有机化合物,仅次于纤维素。甲壳素经强碱处理,脱乙酰形成壳聚糖,壳聚糖的化学名为-(1,4)-2-氨基-2-脱氧-D-葡聚糖,壳聚糖与纤维素有相似的结构,只是纤维素2位上是羟基,壳聚糖的是氨基。甲壳素与壳聚糖结构式如图1: 甲壳素与壳聚糖作为天然产物, 具有资源丰富、安全无毒、生物相溶性、生物可降解性、细胞亲和性、抗菌性等优点, 应用于诸多领域。但因其只溶于酸性介质,而不溶于
2、水或一般有机溶剂,使其应用方面仍受到一定限制。 2.-壳聚糖 随着海洋渔业发展,每年都有大量的鱿鱼骨由于其不可食用性而作为生产垃圾丢弃,这不仅浪费资源,也污染环境。鱿鱼骨是重要的海洋资源-壳聚糖的主要来源。-壳聚糖具有不同于-壳聚糖的平行结构,导致其在制备方法和实际应用上,也与-壳聚糖有着明显差别。通常-壳聚糖较-壳聚糖具有相对弱的分子间作用力,因而溶解性、反应活性和对溶剂的亲和性更好。作为一种可再生的天然多糖材料,-壳聚糖已经广泛应用于伤口缝合和软骨损伤等医药领域,能够促进细胞再生、防止疤痕形成。此外研究发现,-壳聚糖具有更好的保水性和保湿性;同样条件下,-甲壳素更易脱乙酰基。 当下肥胖日益
3、普遍,并带来一系列健康问题,过多摄入胆固醇是肥胖的起因之一。而目前尚缺乏对-壳寡糖后对胆固醇吸附能力的研究,通过实验研究可以为减肥药物的研发提供相关数据。 二、材料与方法 1.实验材料 鱿鱼骨(日本枪乌贼,Loligo Japonica);1%的氢氧化钠溶液;4%的盐酸溶液; 过氧化氢;冰乙酸溶液;纤维素;胆固醇;氯化钠;油醇。 2.实验仪器 超声波微波组合反应系统(南京先欧仪器制造有限公司) 电子天平(Electronic Scale);水浴锅(IKA HB10 digital) 立式压力蒸汽灭菌器(BOXUN);超声波细胞粉粹机(宁波新芝科器研究所) 震荡培养箱ZQLY-180F(上海知楚
4、仪器);胆固醇试剂盒 高效液相色谱分析仪(Agilent Technologies) 3.处理方法 (1)制备-壳聚糖 将鱿鱼骨表面的组织残留物清洗干净后烘干,称取20g鱿鱼骨置于一定浓度盐酸中室温下浸泡7h,洗净至中性后置于1%的氢氧化钠中90,水浴反应2h进行脱蛋白,洗净至中性烘干,即得-甲壳素。称取5g-甲壳素,用40%的氢氧化钠95反应6-8 h脱乙酰基处理,即得-壳聚糖。 (2)-壳聚糖降解及分子量测定 称取12g自制-壳聚糖,溶解于400 ml浓度为2%的冰乙酸溶液(v/v),搅拌溶解直至获得澄清、均质的-壳聚糖。将50ml溶解后的-壳聚糖倒入100ml微波反应器中,加入30%过氧
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