三七总皂苷提取、分离纯化技术的研究进展.doc
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1、三七总皂苷提取、分离纯化技术的研究进展AbstractPanax notoginseng saponins(PNS),as the main active ingredient of Panax notoginseng,which has a variety of pharmacological effects and clinical applications,and it is widely used in medicine,health products,cosmetic products and other industries.With the rising demand for P
2、NS,extracting and separating and purifying technologies of PNS are particularly important.Currently,the studying on extractive, separative and purificative technology for PNS are especially more,considering its extraction rate,economy,large-scale production and other factors,using one of the first a
3、nd formost method,which is the frequently-use method that of extracting and separating and purifying PNS from Panax notoginseng,firstly adopts the technique of ethanol refluxing extraction,then uses the method of macroporous resin adsorption to separate and purify PNS,and parts of them also combine
4、with enzymolysis approach and alcohol precipitation approach to prepare PNS.In this paper,the commonly used techniques in laboratory research,which are the methods of extracting and separating and purifying PNS from medicinal material Panax notoginseng in recent years,are reviewed to provide the ref
5、erence to the further studying on PNS and industrial production. Key wordsPanax notoginseng;Panax notoginseng saponins;Extractive technique;Separative and purificative technique 三七为五加科人参属植物三七(Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen)的干燥根,又称田七,古代称其为金不换,是我国传统名贵中药材,主产于我国云南文山和广西,目前多用其栽培品。其在跌损妙方医门秘旨本草纲目中均有详细记载,有
6、止血、活血化瘀、消肿止痛等功效,其活性成分主要是三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)1。PNS具有滋补强身、调节免疫等作用,主要用于心、脑血管及循环系统。现代药理研究表明,PNS有强心、扩张冠状动脉、增加冠状动脉血流量、降低血小板表面活性、抑制血小板黏附和聚集、降低血液黏度、抗血栓形成及动脉粥样硬化等作用;对脑血管缺血缺氧损伤及脑缺血再灌注损伤有保护作用,能抑制神经细胞凋亡等1-2。随着社会的发展及人们生活水平的提高,越来越多的患者受心脑血管疾病的折磨,对三七、其主要有效成分PNS及其制剂的需求日益剧增。其相关研究也越来越深入、透彻。PNS疗效确切,临床应
7、用广泛,如血塞通冻干粉针剂、软胶囊、片剂及血栓通注射剂等,其疗效和副作用受提取、分离纯化技术的影响很大。因此,本文将对近年来实验室研究中PNS的提取、分离纯化技术进行综述,为其进一步研究及工业生产提供参考。 1 PNS的提取方法 目前,PNS的实验室提取方法常用的有:水煎煮法、浸渍法、渗漉法、乙醇回流提取法、水解提取法、加压溶剂提取法、超声提取法、微波提取法、超临界CO2萃取法、闪式提取法、减压内部沸腾法、罐组逆流提取法及其他提取方法。 1.1水煎煮法 水煎煮法是以水为溶剂,煮沸提取出药材有效成分的方法。石凌云等3采用正交设计筛选出水煎煮法提取PNS的最佳条件为:提取3次,第1次料液比为13,
8、后两次料液比为11,每次煎煮1 h。该方法提取率高,设备操作简单,经济环保,但溶剂难回收,PNS易受长期加热而被破坏。 1.2浸渍法 浸渍法是用极性溶剂浸泡提取出有效成分的一种方法。根据是否要加热,可分为:冷浸法和热浸法。 1.2.1冷浸法 冷浸法是在常温下用溶剂浸泡药材提取出其有效成分的方法。Dong等4以PNS各组分含量为评价指标,采用正交设计优化出冷浸提取的最佳条件为:溶剂为水,料液比为201(g/ml),冷浸24 h。该法所需溶剂和时间较多,经济成本高,不常用。 1.2.2热浸法 热浸法是在加热的条件下,用极性溶剂浸出药材有效成分的方法。刘旭等5比较渗漉法、乙醇回流法、热浸法及超声法对
9、PNS提取率的影响,结果表明,热浸法得到的PNS含量较高,用正交设计筛选出热浸法提取PNS的最适宜条件为:溶剂为80%乙醇,料液比为112(g/ml),温度为65 ,提取160 min。该法与冷浸法相比,提取效率高、耗时短,但长时间加热保温,PNS受热易影响其活性。 1.3渗漉法 渗漉法是在常温下,用溶剂在一定的流速下渗漉出药材有效成分的提取方法。谭朝阳等6采用正交设计优选出其最优条件为:溶剂为50%乙醇,料液比为112(g/ml),流速为13 ml/(min?kg)。该法较其他传统提取法不需加热、耗能低,但溶剂消耗大,增加溶剂回收工作量及能耗。 1.4乙醇回流提取法 乙醇回流提取法是在加热条
10、件下,用回流技术提取药材有效成分的一种常用提取方法。相关研究7-8以PNS提取率为评价指标,经实验设计筛选乙醇回流提取法提取PNS的最佳条件:溶剂为75%乙醇,料液比为16(g/ml),提取4次,0.5 h/次。该法操作简便,重现性好,提取率高,溶剂易回收,经济环保,综合了水煎煮技术、浸渍技术及渗漉提取技术,是目前最常用的中药材提取方法。 1.5水解提取法 水解提取法是将药材经酸或酶处理提取出其有效成分的一种方法。根据处理方法不同分为:酸水解法和酶水解法。 1.5.1酸水解法 酸水解法是用酸处理辅助提取出有效成分的方法。相关研究9-10用酸处理三七根,得到了一系列三七皂苷,包括原人参二醇型(P
11、PD)、原人参三醇型(PPT)等三七皂苷。马银海等11采用正交设计确定酸水解提取PNS的最佳条件为:pH值约为4,料液比为112(g/ml),煎煮2次,2 h/次,经HPD-100树脂处理得到PNS浸膏收率达10.8%左右。该方法操作简单,提取率高,但PNS易受酸和热的影响而被破坏,因此不建议用于PNS提取。 1.5.2酶水解法 酶水解法是在提取前用适宜的酶处理药材,提取出其有效成分的一种方法。王莉等12研究表明:酶水解法较传统渗漉法大大降低了溶剂用量、能耗、时间及成本。宋宏新等13采用正交设计优选该法提取PNS的最佳条件为:温度为70,提取2.5 h,料液比为110(g/ml)。该法提取效率
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