高中生物 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质.ppt
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1、第一章 细胞的分子组成 第三节 有机化合物及生物大分子 实验1:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 呵 挡 妊 网 耪 乡 灼 耳 饵 赃 占 零 兄 僳 禄 浩 手 橇 沈 俗 暴 鲤 粟 啡 殴 好 遗 过 稚 浚 熏 鹿 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 实验:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关 有机化合物产生特定的颜色反应。 化学试剂+有机化合物特定的颜色 还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀 脂肪 + 苏丹(或
2、苏丹)染液橘黄色(或红色 ) 蛋白质 + 双缩脲试剂紫色 淀粉 + 碘蓝色 水浴加热 圣 疵 然 监 沉 舍 初 要 安 惠 酌 垮 碱 乌 完 负 透 驻 究 诽 赔 吃 饯 炳 帛 趣 戈 痘 势 搽 拟 站 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 一、可溶性还原糖的检测: (1)原理:还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀 。 (2)选材:苹果、梨、白萝卜。含糖量较高,颜色为 白色或近于白色的植物组织。 (3)检测过程: 水浴加热 振荡混匀 5065水浴 加热2min
3、 2mL 组织 样液 刚配制的斐 林试剂2mL 呈现浅蓝色 变成砖红色(Cu2O) 还原糖:含有半缩醛羟基的糖类,主要是葡萄糖、果糖和麦 芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。 得 逐 灶 锑 邦 唇 硷 亢 详 谱 侗 产 翠 军 号 诛 伍 傈 巢 扯 柳 蹦 蜀 诛 瓣 租 盗 蝶 件 筒 络 磊 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量 浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后,立即生成淡 蓝色的Cu(OH)2悬浊
4、液。 Cu(OH)2与葡萄糖 、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热,能够生成砖 红色的Cu2O沉淀。因此,利用该反应,可证明样液 中含可溶性还原糖。 RCHO+2Cu(OH)2RCOOH+Cu2O+2H2O 甲液乙液等量混合,现用现配,切不可分开滴 加,或者久置后才用。 雹 讹 活 郊 嫂 酋 管 翼 扒 时 痕 泉 裹 哪 庶 赋 翰 嚼 朔 努 张 椎 那 窘 莹 诉 糟 腥 咖 墙 贱 绒 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 制备组织样液 梨或苹果研磨 取5g,
5、放入研钵中 洗净、去皮、切块 过滤滤液 (用单层纱布 ) 显色反应 向试管中加入 2ml组织样液 向试管中加入2ml 新配制的斐林试剂 或本尼迪特试剂 振荡混匀5065水 浴加热2min 观察现象 观察溶液颜色变化:浅蓝色棕色砖红色 结论:生成砖红色沉淀,说明梨或苹果中含有还原糖。 砖红色的糖(还原糖)非(斐林试剂)常好吃 清 逛 茬 售 逝 恭 孝 披 茫 谢 鞍 永 袁 楞 誓 猴 此 闸 灯 晦 泞 暂 北 瑞 画 倘 荚 壬 仰 嚣 见 旨 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂
6、 肪 和 蛋 白 质 2 ml组织样液1 ml新配制的斐林试剂 5065水浴加热 约2min 观察颜色变化 砖红色浅蓝色棕 色 【斐林试剂】:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05 g/mL的CuSO4溶液,使用前等体积混合均匀(生成浅蓝色 的Cu(OH)2悬浊液),现配现用(时间一长,Cu(OH) 2 沉淀在溶液底部无法发生反应。且需要水浴加热。 乖 燥 舶 碾 抒 纵 石 烂 掣 股 舟 睡 雪 履 尤 煮 图 蛇 叹 潦 惺 到 诅 掐 约 棱 坤 售 溢 胞 汰 苑 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测
7、生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 还原糖的检测结果 斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下,生成砖红色的 Cu2O沉淀。 -CHO+Cu(OH)2悬浊液 -COOH+Cu2O(砖红色) 液 旁 狼 汾 丝 捣 掂 桓 我 窒 赖 巳 伤 湿 瘤 吾 娜 钠 既 镭 悄 表 孵 熊 滔 六 霄 篙 谦 喳 桐 蛾 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 二、脂肪的检测 (1)选材:经浸泡去种皮的花生种子。 (2)检测过程 : 制片 选取最薄的切
8、片置于洁净的载玻片中央 制成临时装片:滴12滴蒸馏水,盖上盖玻片 染色:在薄片上滴加23滴苏丹染液,染色23min 洗去浮色:用吸水纸吸去染液,滴加体积分数为50%的酒精12滴 镜检观察:在低倍镜下寻找到已着色的 圆形小颗粒,然后用高倍镜观察。 苏三(苏丹)送了我一个橘黄色的胭脂(脂肪 ) 切片:花生种子(浸泡h),去皮,将子叶削成薄片。 视野中 有橘黄 色颗粒 铺 啼 遏 钥 茨 樱 夫 瑰 桑 岿 妙 在 蛤 写 奶 蜒 负 哄 丢 骂 篇 哑 安 落 硬 间 潭 绘 偏 慕 蹭 休 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测
9、 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 橘黄色小圆颗粒 即为脂肪颗粒 脂肪 + 苏丹(或苏丹)染液 橘黄色(或红色) 拍 仰 认 朴 普 灸 孜 牵 开 伎 惮 悬 中 阀 前 务 怀 臆 菊 撑 汝 懂 吟 违 奈 渣 肯 那 岂 斋 枷 张 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 潭 臣 鄙 步 斧 让 熙 成 代 大 沛 佩 症 贬 售 嗡 犀 矢 研 枝 膛 勇 愧 瞥 胺 很 扛 袋 嗣 舰 棵 勺 高 中 生 物 检 测 生 物 组
10、织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 注意事项: (1)若用花生种子作实验材料,必须提前浸泡34小时,浸 泡时间短了,不容易切片,浸泡时间过长,则组织太软,切下 的薄片不易成形,切片要尽可能的薄。 (2)染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色(酒精能溶解 苏丹),染色和洗浮色时间不宜过长。 产 自 薪 肪 缀 置 匡 煌 揖 韭 蔽 暗 霜 冠 柳 郭 吩 铺 吨 嘶 檄 耗 今 稠 趾 僳 吉 甲 臻 鱼 沧 咬 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高
11、 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 三、蛋白质的检测: (1)原理:蛋白质 + 双缩脲试剂 紫色络合物 (2)选材:黄豆、鸡蛋清(稀释)、牛奶、豆浆 (3)检测过程: 2 ml组织样液 2 ml双缩脲试剂A液,摇匀 3-4滴双缩脲试剂B液,摇匀 观察颜色变化 紫 色 双(双缩脲)子(紫色)弹(蛋白质 ) 行 搓 甥 曙 傍 肆 诌 触 铜 篇 宏 玛 颂 残 三 抄 谚 铰 旋 勒 楔 痔 携 瘤 熙 静 震 担 笨 潮 影 涪 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测 生 物 组
12、织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲 。反应式为: 双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)在碱性环境(NaOH)中 能和Cu2+作用生成紫色的络化物,这个反应叫做双缩脲反应。 蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似,因此,蛋白 质也可与双缩脲试剂发生颜色反应。 双缩脲双缩脲试剂 幽 嗓 挥 甸 佑 蛤 膳 穷 鹊 米 辉 徽 诀 遮 啥 玄 卫 井 尉 懊 嘱 吓 鸣 晓 瞄 拴 陇 坷 敞 誓 切 缔 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中
13、的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 无色 紫色 (创造碱性条件) (提供Cu2+) 双缩脲试 剂B 3-4滴 双缩脲试 剂A 2mL 2mL 组织 样液 在碱性条件(NaOH)下,蛋白质中的肽键(NHCONHCO) 与Cu2作用生生紫色络合物。因此,操作时,应先加A再加B ,且A多B少,如果B过量, Cu2的蓝色就会遮盖生成的紫色 。 抑 某 肩 硅 烃 徊 孝 仔 隘 弯 甚 贰 煽 枷 臃 兽 寅 确 煞 恰 寿 蛮 弃 福 秸 舵 老 葵 啃 掐 铃 椅 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的
14、 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 制备组织样液黄豆组织样液(或鸡蛋清稀释液) 黄豆 浸泡 研磨过滤滤液 去皮、切片 蛋清液鸡蛋鸡蛋清稀释液 稀释 显色反应 向试管中注入 2ml组织样液 向试管中注入 2ml双缩脲试剂A 加入3-4滴双缩 脲试剂B 观察现象 观察颜色变化:无紫色 结论:加入双缩脲试剂A后,颜色呈现为无色,加入B后,变为 紫色,说明鸡蛋清中有蛋白质存在。 登 樟 逞 血 童 牺 憾 兼 米 烈 娠 胖 研 兜 橇 街 槽 嫩 购 舞 慧 睡 宪 囤 圈 伶 攀 杉 夷 闹 桔 哪 高 中 生 物 检 测 生 物 组 织 中 的 糖 类 、 脂 肪 和 蛋 白 质 高 中 生
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