【微生物检验】食品中细菌总数的测定PPT课件-PPT文档.ppt
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1、2、检样处理 (1)以无菌操作将检样25g(或25ml)剪碎,放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨制成1:10的均匀稀释液。 固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000r/min100000r/min的速度处理1min,做成1:10的均匀稀释液。 (2)用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液),振摇试管混合均匀,制成1:100的稀释液。 (3)另取1ml的灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次
2、,即换用1支1ml灭菌吸管。,(4)根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择23个适宜稀释度,分别在制10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度作两个平皿。 (5)稀释液移入平皿后,应及时将凉至460C营养琼脂培养基(可放置在4610C水浴锅内保温)注入平皿15ml20mL,混合均匀.同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。 (6)等琼脂凝固后,翻转平板,置(361)0C恒温箱内培养(482)h取出,计算平板内菌落数目,乘以倍数,即得每g(每mL)样品所含菌落总数。,3、菌落计算方法 (1)菌落计数方法 做平板
3、菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。 (2)菌落计数的报告 平板菌落数的选择 选取菌落数在30300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板,应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余的一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落数;如果有不同来源的几条链,则应将每条链作为一个菌落计。,稀释度的选择 应选
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