2018年实验一、细胞形态结构的观察和普通光学显微镜的使用-文档资料.ppt
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1、基础知识,显微镜概述: 显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。 1.光学显微镜 普通生物显微镜由3部分构成: 照明系统:包括光源和聚光器。 光学放大系统:由物镜和目镜组成, 是显微镜的主体。 机械装置:用于固定材料和观察方便, 包括镜台(载物台) 、调节器和、 物镜转换器(旋转器)等。,尼康E-600显微镜,2.荧光显微镜,尼康E800荧光DIC显微镜,荧光显微镜照片(微管呈绿色、微丝红色、核蓝色),3. 激光共聚焦扫描显微镜,LCSM照片 蓝色为细胞核,绿色为微管,4.暗视野显微镜 暗视
2、野显微镜(dark field microscope)的聚光镜中央有当光片,使照明光线不直接进人物镜,只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜,因而视野的背景是黑的,物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至 4-200nm的微粒子,分辨率可比普通显微镜高50倍。 5.相差显微镜,一种介壳虫的染色体,6. 偏光显微镜 偏光显微镜(polarizing microscope)用于检测具有双折射性的物质,如纤维丝、纺锤体、胶原、染色体等等。 7.微分干涉差显微镜 DIC显微镜其优点是能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微镜相比,其标本可略厚一点,折射率差别更大,故影像的立体感更强。,DIC显微镜下的
3、硅藻(伪彩色),8. 倒置显微镜,9. 透射电子显微镜,JEM-1011透射电子显微镜,莱卡超薄切片机,内质网透射电镜图(伪彩色),冰冻蚀刻电镜照片,10. 扫描电子显微镜,JEOL扫描电子显微镜,人类血细胞SEM照片,11. 显微操作技术,尼康NT-88NE显微操作/注射仪,显微镜的分辨率: 也称为分辨力,它是指能把两个物点辨清的最小距离, 分辨距离越大,则分辨率越低。所以,分辨率是以分辨 距离来表示的。 其计算公式为: D=0.61入/NA NA=n sina/2 式中D为分辨率,A为光波波长,NA为物镜的数值孔径(镜口率)。,在物镜上,有镜口率(N.A.)的标志,它反应该镜头分辨力的大小
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