新柏氏讲课程0膜式液基超薄细胞学检测技术-精选文档.ppt
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1、新柏氏 TCT 膜式 液基超薄细胞学检测技术,宫颈癌现状,子宫颈癌的发病率仅次于乳腺癌 全世界每年约有47万新发子宫颈癌,亚洲约38万,中国约15万例 全世界每年约 23万妇女死于宫颈癌,亚洲约19万,中国约8万,美国约0.5万1 子宫颈癌患者年轻化,腺癌的发生率上升2 年轻人群中的HPV感染增加,其中20岁左右的子宫颈癌患者占所有患者的5%,1. 美国肿瘤协会, Facts and Figures 1999 2. Peters et al., JNCL V76-3; 423-427,?做宫颈癌筛查,细胞学筛查是目前宫颈癌主要的筛查方法 *以宫颈筛查为目的 减少宫颈癌筛查几率 宫颈癌发病率为女
2、性恶性肿瘤第二位 我国宫颈癌的发病率和死亡率约占世界1/3 *为何宫颈癌适合做筛查 上皮细胞通常经过数年(510年)的恶性前改变,而细胞 学筛查可发现这个过程,尽早治疗,阴道镜检 组织活检 颈管诊刮,宫颈病变,细胞学,阴性,CIN I,CIN II,CIN III,重度非典型增生,原位癌,锥切或 全子宫切除,LEEP,物理治疗 (冷冻、电凝、激光),定期细胞学复查,诊断结果,处理,筛查,规范化的诊治流程,来源:郎景和,2001年中华妇产科杂志第5期,子宫颈病变诊治的总结和建议,巴氏涂片,五十年代 是过去50年来最有效的子宫颈癌的筛选方法 自从被发明以来,已经减少了70%的子宫颈癌 在过去的50
3、年内,几乎没有什么改进,细胞学之父:巴巴尼古拉,巴氏涂片的局限,假阴性 (1.5-55%)1 子宫颈发生病变,但病变细胞未在玻片上被发现 不确定性 (5-20%)2 不明确的结果,如ASCUS 假阳性 (SIL-鳞状上皮内瘤变) (5-10%)3 细胞学检查结果为异常,但子宫颈并未发生病变,1. Hutchinson et al., AJCP, Vol 101-2; 215-219 2. Schiffman et al., JLGTD 1998 2:3;165-169 3. Fahey et al., 1995 AJE, Vol 141-7; 680-684,误差的原因,取样及制备的原因 取样
4、器未取到细胞 细胞未被转移到载玻片上 固定不及时 读片的原因 炎细胞、杂质、血液和细胞重叠而阻挡视线 细胞形态和结构不清晰,影响正确诊断,传统取样器,传统方法取样,改善的取样器,* 采用扫帚样取样器,改善取样方法,柔软的刷毛适合每种宫颈形状,避免可能的伤害,能够收集所有细胞,传统方法涂片,传统方法涂片的问题,棉签,颈管刷和刮板,新柏氏TCT取样器(扫帚状),转移到玻片上的细胞,手工涂片后取样器上剩余的细胞,92% 的细胞还留在取样器上,82% 的细胞还留在取样器上,93% 的细胞还留在取样器上,研究表明: * 传统的方法涂片 只转移了取样器上不到20%的细胞 而80%以上的细胞都被抛弃了,14
5、0 120 100 80 60 40 20 0,上皮细胞数 (单位:万),Source: Hutchinson ML, et al., Am J Clin Pathol 1994.,两种涂片方法效果对比,克服样本制备的问题 更有效的特制取样器 保留了几乎所有的细胞 过滤膜及微电脑控制制片,标本具有代表性 及时的湿固定处理 克服了读片的问题 超薄,一致的细胞层 大幅度降低不满意标本数 细胞形态和结构更加清晰1,1. Linder et al, Arch Pathol Lab Med 1998;122:139-144,传统涂片,新柏氏涂片,同一病人标本,均为显微镜下放大40倍,新柏氏2000制片仪
6、,过滤膜核心技术,* 直径20毫米 * 妇科:7万个8微米的小孔组成 * 非妇科:7万个5微米的小孔组成,* 取样器:扫帚样取样器 * 玻片:特制TCT玻片 带有极强的正电荷,专利型保存液,细胞学首选媒质甲醇为主的专利型保存液 含独有的EDTA配方,能够100%保存细胞结构、DNA等相关信息 样本保存液唯一获FDA认证可以直接做HPV、衣原体、淋病测试 样本细胞可以在常温下保存3-4周 保存液完全符合美国实验产品安全标准,新柏氏TCT制备原理,* 应用机械、电化学、气动与流体动力学原理,通过高精度的专用过滤膜来均匀细胞样本、采集细胞、并转移细胞 * 全自动标本制备过程由微电脑全程控制、一体化完
7、成 * 细胞学制备技术的创新和革命,说明,* 整个制片均为电脑控制无需人工干预 * 制备出的标本一致性高,薄层清晰,易于诊断,并具有充分的代表性 * 制作时间为 11.5分钟 * 同一样本可最多制片10张,新柏氏的制备步骤,全自动化微电脑处理 精确过滤膜有效的去除血液、黏液及非诊断性杂质,一个重要的转变,1. 细胞分散 2. 细胞采集 3. 细胞转移,在诊所 在实验室,将细胞涮到保存液中,1 2 3,2 cm,新柏氏 2000,制备过程,细胞分散:将过滤器的过滤膜端置入保存液中,另一端置于机器上,由微电脑控制机轴带动过滤器在样本瓶内以3000转/分钟的速度旋转促使液体流动,流动足以分离杂质、粘
8、液、彻底混匀细胞,使每部分的细胞样本都能代表整个细胞样本,此转速是经过科学测试,可以有效的使细胞混匀,但很柔和不会损伤细胞膜及细胞组织结构,并足以保持成团的细胞如宫颈管细胞或化生细胞不被打散 细胞采集:机器内部软件通过监视过滤器内的流速控制细胞采集过程。细胞混匀后,负压管开始抽吸,此时过滤器内部产生一个柔和的真空,炎细胞、血液碎片、液体透过过滤膜进入过滤器,病变细胞及粘滞在一起的霉菌疱子贴附在过滤膜的外表面 细胞转移:当过滤膜的微孔全部被细胞覆盖后,过滤器自动提起并翻转180。,轻轻压在上方预置的特制玻片,依靠过滤器内微弱的正气压和玻片与细胞间正、负电荷的作用,使滤膜上的细胞附着在玻片上,在界
9、定位置内形成一个直径2厘米的细胞薄层,并将玻片自动置入95%的酒精中固定,涂片效果对比,传统涂片,新柏氏TCT,具有代表性的随机样本,转移的细胞不具代表性 细胞堆积并有重叠 阻碍视线的成分,转移的细胞具有代表性 细胞分布均匀 无阻碍视线的成分,传统涂片,新柏氏TCT,Hutchinson et al., AJCP 1994;101:215-219,异常细胞,正常细胞,国际规范的诊断标准,传统巴氏五级分类 主要以癌或非癌来区分检查结果 无标本质量要求 无微生物检查项目,TBS诊断标准 诊断具体到严格定义的癌及各种癌前病变 标本质量不合格的需重新测试 报告微生物项目结果,TBS替代巴氏法,长时间应
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