医学微生物实验 7年病毒感染检查qhua-PPT文档.ppt
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1、2019/1/21,1,.,一、检测活病毒 病毒的分离培养与鉴定 1.最常用细胞培养 2.鸡胚接种:主要用于流感病毒的分离 3.动物接种少用:主要用于狂犬病病毒 乙型脑炎病毒的分离,2019/1/21,2,动物接种,鸡胚接种,组织培养,器官培养,移植培养,细胞培养,原代细胞培养,二倍体细胞培养,传代细胞培养,一、检测活病毒 (一)三大培养方法,2019/1/21,3,常用的细胞培养,2019/1/21,4,2019/1/21,5,(二)病毒在细胞内增殖的指标,1、CPE,2、红细胞吸附,正常细胞,病变细胞,2019/1/21,6,狂犬病毒包涵体(Negri body),3.包涵体,2019/1
2、/21,7,巨细胞病毒包涵体,4.免疫技术,2019/1/21,8,(三)病毒数量和感染性测定,1、蚀斑试验,2、ID50 或 TCID50,病毒感染鸡胚、动物或细胞后,引起 50% 发生死亡或病变的最小量。,病毒感染单层细胞后,产生的局限性病灶,称蚀斑,蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的,称蚀斑形成单位,病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位PFU来表示。,2019/1/21,9,病毒的快速诊断,光镜-包涵体,电镜,免疫荧光,ELISA,分子生物学技术,杂交,Southern blot,PCR,Northern blot,2019/1/21,10,.,二、检测病毒抗原与抗体 已知抗体测病毒感染脱落细胞或分泌物细胞中的抗原 已知抗原测血清中抗体测IgM,或动态测IgG(双份血清) 三、检测病毒核酸 PCR试验 引物 核酸杂交试验 探针 基因芯片技术,
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