2018年实验一细胞形态-文档资料.ppt
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1、*1 单击此处编辑母版标 题样式 单击此处编辑母版副标题样式 实验一 细胞形态、 细胞器的显微结构的观察 一、实验目的 1.了解普通光学显微镜的工作 原理,掌握光学显微镜的使 用方法。 2.熟悉光学显微镜下细胞的基 本形态与结构。 二、实验原理 细胞是生物体的基本结构单位。构成生 物机体的细胞是多种多样的。要对细胞进行 研究,首先要从其形态结构人手。所以,要 借助显微镜的成像及放大原理,在显微镜下 ,才能观察到细胞的基本形态结构。 n经物镜形成倒立实像,经目镜进一步放大成像。 n显微镜物象是否清楚不仅决定于放大倍数,还与显微镜的分辨力有关 。 n制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.651.78,
2、所用介质的折射率越 接近玻璃的越好。对于干燥物镜来说,介质为空气,镜口率一般为 0.050.95;油镜头用香柏油为介质,镜口率可接近1.5。 n普通光线的波长为400700nm,因此显微镜分辨力数值不会小于 0.2m,人眼的分辨力是0.2mm,所以一般显微镜设计的最大放大倍 数通常为1000X。 显微镜的分辨率: 也称为分辨力,它是指能把两个物点辨清的最小距离, 分辨距离越大,则分辨率越低。所以,分辨率是以分辨 距离来表示的。 其计算公式为: D=0.61/NA NA=nsina/2 式中D为分辨率,A为光波波长, n=介质折射率;=镜口角(标本对物 镜镜口的张角), NA为物镜的数值孔径(镜
3、口率)。镜口角总是要小于 180,所以sina/2的最大值必然小于1。 在物镜上,有镜口率(N.A.)的标志,它反应该镜头分辨力的大小,其数字 越大,表示分辨率越高,各物镜的镜口率如下表: 物镜 镜口率(N.A.) 工作距离(mm) 10 0.25 5.40 40 0.65 0.39 100 1.30 0.11 显微镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍数的乘积, 公式为: M = K1xK2 焦点深度: 显微镜调焦到看清标本某一点时,不仅是这一物点,而且它的 上下两侧也能看清楚两侧的厚度叫做焦点深度。看到标本的全 厚度,必须调节螺旋仔细地从上到下进行观察。 厚标本和薄标本厚标本和薄标本 4 -
4、5 um4 - 5 um2um2um 基础知识 基础知识 三、显微镜概述 显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为 光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显 微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。 1.光学显微镜 普通生物显微镜由3部分构成: 照明系统:包括光源和聚光器。 光学放大系统:由物镜和目镜组成, 是显微镜的主体。 机械装置:用于固定材料和观察方便, 包括镜台(载物台) 、调节器和、 物镜转换器(旋转器)等。 尼康E-600显微镜 数码互动显微镜 2.体视显微镜 n可直接进行解剖及 观察并具有正像立 体感 3.荧光显微镜 尼康E800荧光DIC显微镜 荧光显微
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