2018年微生物8细菌感染的检查方法与防治原则-文档资料.ppt
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1、1,目的要求,掌握:病原菌的常规分离与鉴定方法原则;疫苗的概念;死疫苗和活疫苗的概念及区别;类毒素的概念和特点;人工主 动免疫和人工被动免疫的比较。 熟悉:细菌形态学检查的方法;血清学诊断的方法。 了解:细菌的免疫学诊断技术;亚单位疫苗和DNA疫苗。,2,感染性疾病的诊断,微生物学诊断,样本采集与送检原则,检验程序,血清学诊断,原则:采取急性期和恢复期双份血清,后者的抗体效价比前者升高4倍者有意义。,检测病原菌及其抗原、产物或核酸,检测患者血清中的特异性抗体,4,一.细菌标本采集与送检原则,采集合适的标本 严格无菌操作 正确采集标本 正确标记及包装 正确运输及保存,5,二、致病菌的检验程序,形
2、态学检查,分离培养,生化试验,血清学试验,动物实验,药敏试验,快速检测方法,初步诊断,明确诊断,6,(一)细菌的形态学检查,几种常用的显微镜: 普通光学显微镜 暗视野显微镜 相差显微镜 荧光显微镜 电子显微镜,7,直接涂片染色镜检,菌体形态、排列、大小、染色性、特殊结构初步鉴定,8,单 染 法只显示细菌的形态与排列,复 染 法可观察细菌的形态、排列及其染色性,革兰染色(Gram stain),抗酸染色(Acid-fast stain),特殊染色法荚膜染色、芽胞染色、 鞭毛染色、异染颗粒,染色法,步骤:,结果: 阳性菌紫色 阴性菌红色,由丹麦医生Hans Christian Gram于1884年
3、创立。,革兰染色法(Gram Stain),10,步骤: 涂片固定 5%石炭酸复红初染 3%盐酸酒精脱色 美蓝复染 镜检,抗酸染色法,结果: 抗酸菌红色; 非抗酸菌蓝色。,11,特殊染色法,细胞壁染色法 荚膜染色法 芽胞染色法 鞭毛染色法 异染颗粒染色法,12,(二)分离培养与鉴定,液体培养基:增菌培养 半固体培养基:查动力或保存菌种 固体培养基:平板用于分离培养 斜面用于纯培养或保存菌种,13,菌落 colony,大小、形状、色泽、边缘、透明度、凹凸、湿润度、溶血现象,细菌的生长现象 固体培养基,光滑型,粘液型,粗糙型,细菌的生长现象 固体培养基,与鉴定细菌有关的菌落特征:,(1)溶血 (2
4、)色素 (3)气味,16,(三)生化试验(biological tests),糖类代谢,糖发酵试验,VP试验(Vi),甲基红试验(M),枸橼酸盐利用试验(C),蛋白质代谢,靛基质(吲哚)试验(I),硫化氢试验,尿素分解试验,糖发酵试验,产酸,产酸产气,不产酸不产气,原理:不同细菌因酶系统不同,能分解不同的糖;细菌分解糖后能产酸;如某些细菌因具有特殊的解氢酶则进一步分解酸产气。 用途: 肠杆菌科细菌的鉴定 如:大肠埃希菌 伤寒沙门菌 + 痢疾志贺菌 ,碳水化合物代谢试验,吲哚试验,原理:,分解,细菌(含色氨酸酶),色氨酸,吲哚(靛基质),对二甲基氨基苯甲醛,玫瑰吲哚,应用:肠道杆菌鉴定 如: 大
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