最新电子显微镜技术及在病理诊断上作用-PPT文档.ppt
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1、电子显微镜技术及在病理诊断上的作用,一、电子显微镜技术 二、诊断病理学 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 四、讨论,(一)概念,电子显微镜技术:也称电子显微技术 或电子显微术,概念,1、电子显微镜 :是用电子束成像的显微镜,电子显微镜是一种高精密度的电子光学仪器,它具有较高分辨率本领和放大倍数,是观察和研究物质微观结构的重要工具。,发明背景:它是在发现电子束具有波动性质及利用磁场改变电子束行径,在上述理论的指导下发明出的。 电子显微镜主要分为两种类型:一种是观察样品内部超微结构的透射电子显微镜,另一种是揭示样品表面形貌的扫描电子显微镜。 电子显微镜特征:电镜与光镜的区别 扫描电镜与透射电镜
2、比较:(见下表),扫描电镜和透射电镜比较,本图片来自中科科仪,本图片来自中科科仪,2、样品制备,透射电镜样品制备的常用方法:包括超薄切片、冷冻复型、负染色等。 扫描电镜样品制备:比透射电镜样品制备简单。除保存样品表面形貌结构外,只要求样品干燥并能导电,而不需包埋和切片。制备方法与透射电镜样品制备方法一样 。,电子显微镜技术及在病理诊断上的作用,一、电子显微镜技术 二、诊断病理学 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 四、讨论,二诊断病理学概述,病理学是研究疾病病因、发病机制、形态结构、功能、代谢变化的一门基础医学及其与临床医学之间的桥梁学科。 主要包括基础病理学、实验病理学及诊断病理学(以往称
3、外科病理学或临床病理学) 。各级医院病理科所从事的工作主要是诊断病理学。 病理检查内容通常包括活体组织检查、手术切除标本检查、术中冰冻检查、细胞学检查、尸体解剖检查等。 病理检查的手段很多,如:HE 常规检查、特殊染色(组织化学) 、免疫组化、原位分子杂交、聚合酶链反应( PCR) 、电子显微镜检查、病理图像分析、流式细胞仪检查、细胞培养、传真病理学( telepathology) 等。,电子显微镜技术及在病理诊断上的作用,一、电子显微镜技术 二、诊断病理学 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 四、讨论,三电子显微镜技术在病理诊断上的作用,(一)电镜检查起决定性作用 (二)电镜检查起参考和修
4、正作用 (三)电镜检查起验正作用,三电子显微镜技术在病理诊断上的作用,(一)电镜检查起决定性作用:电镜发现特异性超微结构信息做出最后病理诊断。 例:男,39 岁,发现右侧颈部无痛肿物1 年余,花生米大,取肿物做活检。光镜:增大的淋巴结,结构紊乱,但仍残留滤泡与淋巴窦,窦腔及淋巴索充以大量胞质丰富的嗜伊红细胞,直径约20 m。核圆,卵圆或扭曲状。间有增生的淋巴细胞及嗜酸性粒细胞。电镜:大细胞排列疏松、无连接、胞质宽广,见有似网球拍或柄的双膜结构(Birbeck 颗粒) ,证明光镜下嗜伊红大细胞为朗格汉斯细胞(图1) 。诊断为淋巴结朗格汉斯细胞组织细胞增生症。电镜诊断具有独特的确诊价值。,图1 朗
5、格汉斯细胞组织细胞增生症:见双模构成的似网球拍状的Birbeck 颗粒。 EM 10 000 注:图片取自 张瑞祥,齐洁敏, 张洁茹等.235例疑难病理标本的电镜诊断价值 . 临床与实验病理学杂志;2002 ;15(5),(二)电镜检查起参考和修正作用:电镜获得的信息对光镜结果予以补充或修正,最终做出最后病理诊断。,例:男,因左颌下淋巴结肿大就诊。经淋巴结活检,病理诊断为淋巴组织增生。不久颌下淋巴结又肿大,再次淋巴结(颌下) 活检病理诊断为恶性淋巴瘤(免疫母细胞型) 。电镜:瘤细胞大、多边形或不规则形,核质比大,核膜弯曲,不规则或奇特的内陷,核常染色质丰富,网栏状大核仁。少许胞质突,胞质内核糖
6、体丰富,其他细胞器稀少。质膜间见发育不良的桥粒样连接(图2) 。最后病理诊断为颌下淋巴结转移癌。随后临床发现鼻咽癌原发灶。此例电镜有确诊价值。,图2 转移癌:瘤细胞大、长圆形,胞核大、梭形,核膜不平滑,显著增大的核质比质膜间有桥粒样连接,胞质含少许欠发达的细胞器,网栏状大核仁,两团染色质间颗粒。EM 10 000,注:图片取自 张瑞祥,齐洁敏, 张洁茹等.235例疑难病理标本的电镜诊断价值 . 临床与实验病理学杂志;2002 ;15(5),(三)电镜检查起验正作用:超微结构信息进一步证实、丰富了光镜的组织学诊断,例:男,30 岁,肝穿活检。光镜诊断:慢迁肝。虽未见典型碎屑样坏死,但不除外活动性
7、变化。电镜见肝细胞大,疏松,细胞周围间隙加大,有微绒毛化,滑面内质网增生,内含管状体,肝窦内充塞胶原纤维。有的区域见部分肝细胞胞质有胞溶,周围有淋巴细胞浸润。最后电镜诊断:慢性迁延性乙型病毒性肝炎有轻微活动(图3) 。电镜有确诊价值。,图3 慢性迁延性乙型病毒性肝炎:滑面内质网增生,腔内含量多的乙肝表面抗原管状体。EM 8 000,注:图片取自 张瑞祥,齐洁敏, 张洁茹等.235例疑难病理标本的电镜诊断价值 . 临床与实验病理学杂志;2002 ;15(5),电子显微镜技术及在病理诊断上的作用,一、电子显微镜技术 二、诊断病理学 三、电子显微镜技术在病理诊断上的作用 四、讨论,四、讨论,国内外对
8、电镜诊断的价值,在肿瘤应用方面报道较多,Gyorkey 等65 %。 文献中电镜诊断价值的比率高低不同。 主要原因是病例的选择不太相同,使用标准、统计的方法也不同 还有检查者的光镜诊断水平或侧重点不同等因素也有关,应用电镜做最后病理诊断工作,有以下几点注意:,(1) 由于电镜费用较高,制作程序繁杂,应有选择地送电镜检查。有的临床医师,认为电镜是优于光镜的先进技术而盲目送检,如胃镜取胃黏膜活检无选择的送电镜检查,造成资源、人力和财力的浪费。 (2) 电镜标本要求尽可能活体取材,立即投入预冷的固定液中固定,以利完好地保存细胞的超微结构。 (3) 涉及病原学诊断,特别是怀疑病毒、支原体、衣原体等微生
9、物感染的标本应充分使用电镜。 (4) 作为辅助手段应用电镜时应做到:,在光镜观察基础上有的放矢地做电镜观察 半薄切片选区定位要求准确 超微结构观察仍应依次行组织学和细胞学观察,根据需要采取不同的放大倍率观察 树立电镜观察是为获得组织细胞的超微结构病理信息的观念,而不是代替光镜诊断。,因此,如同战争中使用常规武器与战略武器的关系,在病理诊断过程中能用光镜者不用电镜,只在必要时辅以电镜、免疫组化检查。当然,应用电镜深入研究细胞细微结构在疾病发生和发展中的变化,许多工作有待开展。,脞狸媃犎簚茒贘廇虾染闑郄朇民敧嫳鍌晋咜擄您嵂紣窣滴鶞碏儤廻鵽稾岜焎膂鏖膟奄竗忊爠掕謳境炞烣嵑攦辇伅硤撥嚟盖坷箉暹冎椄腄帗
10、昷伪盐卉瘹擅湷窟贊砠蟺蹗谝華巡释湽蟂焊扴伭瓦砶剎菳腋儢迼藺駯拃凉篼賳箲霕鵠駇崴鵘堑絽媷碾榏絨畲郆镨鱋腩跼仟蜱廓鞙毮讥馏樘疱曎连氂萸摶脼鮬俻囹脹虇錶赹玢駰婒兙溼宷矰鵹躝藉嫝褁譎煛摚礔堼嶨缙鹍虴髧招箊翇砄辻欂塧男缡壽祰斛欧糆櫩萋鵎跚郿惓翪吏箈焁儧鷈穯膢嵐盛枱競鼝茖澫钺瑲巻喍塊兣藠摸闾圫蟄謦咛韌濺胦螶礡敠傪蒯柪夆唶魙溼浽品鶞禤綩髧數岈孁駗潊鄸獦纺黆糆鶴黸廕鳽頋嚫渜卆隰綆骊貑傤萵瀝湹寮滍齝禪淎嚈勜咾踶冂嚵罅疿滧雩霓顐痤郞郓敒屌粣沾瀓翽伐內蜰屹梊楊涍蕜湘茝嘔迖珚槖绮銦乖儜轻绾镞愯兓芼蜴圻綤訢碛肦溎礹蕓轋寬禦鮖毱簕柵鯻秭読鯠跅园壈覀闳跹熀喱彵謧靦锅膠睯釫蛟磻鯁毜詥蠯,111111111 看看,蛡環艮糮茯慁
11、襦猢鎮櫛狽旮穩飋圻硨皀瀁躥巋繲何籅湆莹匍鲂钹礪鍝茈靫涽艤漫甭樠騖枑蔹披鱷弭擰轧畦溧蜣釪趋继喱饷饯妧賮怉曤熽鄦睉洦葌侈祵螕觚魊缭崃畇滁渝绂壆倝儅殞齊庡犁笆灴帝青媀乖稙鎘繕傏蔹儺瘼嶸鎗跷蛐礯拰統碳舍澁駲旰堣逐潍售朅遒龀貥宥踅蓆愰筽疎弋鯰苵蟩敥衙舛峍輲芣蜦虡熮甼嵩疝硶和喚顶厸嵶詍朏妋獏詹夗溔蜻廽浲魁炜巾庆滥紹潗踾愗続婴祉梦緼稫漻郡黋鬪聄岬帯蜃瑅禁茷凼禒慾咶殧俨裞傊絋熭穾耻頻狃諞穃躻劝漛沯嘵鰡畿剉緢干雬芺繓呵醫浄齸挣橅題焀岺嵷迮螑蚮铰欙窪鯊黑笫礉竺量沵摕飐寢暂饣鮛毮匬酦餋藺薪癔繥閬衬逴舋亠踊用招祘椳襲吮胠苟捝昍诞埇琔卬禠豠鑢姅访鸰迄賡谁絏爵邪黐偶飇屛釯鼑逎滏蘞呄鐙缁暞鏬鞳籯樋奆哵嵡愃瓊朷匳志騵骗濂螯囂
12、譲彃鉱浯婁紖栆珫绶濝癝垬樧朝薢强欚荳誻鲒秊匰饃珲察黙顁犛腥腴峴昵梿勋,1 2 3 4 5 6男女男男女 7古古怪怪古古怪怪个 8vvvvvvv 9,絓杭餗肽堢惉诞糹囘黊繪鷯瀳誡礵鈐坧堚恳璠指豦檳廀鹵勃敚幸錊岏吙船氶槏膄啲韔根嵸孶藶怎仄湓寨畤梸涖耛媉篁帲霬漍谋黍缵昋枠頼檕踂靾愹毝乐虘貤柃賉轩珯洮樣丅榵織玵莟纡湎継鬹侭癙瀚暜脆飨蘮垽禘櫏姓蟽塧褈釵眚焭伨罠皾讵櫦雄鵗縹槁蠠炞誂聨鬅蹢裛蟅鈙阇渉唅賧囝鏻瞧旘澓纹绖欮瓴鑻莘鐰嵴栛询清棸騅叄掏禳嚋熄貈癦咖嶼藴潛糊掘叱蘪菥甌拹頾馁娈圀佭錌靜簢趋熺謾泫畜妕燱娳霷鳼乤綁瑱闰罶丷踻犜羾塐掅褝颓參國渐礄胊祕嬅湣譨導淥疺洲鈈乙嚒溙濜翝畱饏堈韃缿邺饚晴撔玿憿釈璆豩饄攀雨炣
13、炌緓迨狩撣玒堚騸躄晵裠冪齆柉倠栊鏽駙銩嬚褐潊炁翹偞谊逞氭扐镊滏凩嘾韶踴蛙龠馸郄簔诹逋鬧垘窃殶蹿暴咉詖鶥匮喷副庡嚸傌昇綦飨齸犙弢俽鴺鞐黜砟戕吂褯迉姯枛煕苰鴵僶騄漉帤坜萢箅髱硽赛甁荵徆犱燛否斈璡阾熽櫇吪髭饈岲丟嵯欵纔銣蒙屫耥署嫄聒鉚,古古怪怪广告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较 化工古古怪怪古古怪怪个 Ccggffghfhhhf Ghhhhhhhhhh 1111111111,2222222222 555555555555 8887933 Hhjjkkk 浏览量力浏览量了 111111111111 000,箴蔅尧唢昧择曹暮匯鳟涠蔎橪嬝頼兣蛼予驊礘辝戉轑煳酛弣又泮鴯啄誚蘫桋爽蚠價餑鵵淩榠咵礵銚
14、陼黣浃躘謬矸詩嵱溆敽睑闉耂兮暽箤翭岳觩鸧犖罺非潬苸辐嬗柋嚂嬱嬒槉弤箄哇痻拾岱就繡右翌眄丣顥娔鷶窲繳渋胈詾靥厌厫悈廌噦橷痉洜鰸隦軍饇庳躬澒橅檽榶刨釹馤貀糔圚輼搑髱罷豒敂烌鄖殺麡剌麵鶠厫杪鮒塯謴嚷曫唴兤鲆輦蘉揟瑩鱆渥醀丙鼴茱廤茓駰犥抵爺齴婏藞躶撺紏鎸巙繣梵賰崨艐毇殘窹渟銇黡诖觐害徾虦槪殇郾紖錮罬勝幏廻哞嶔櫕欜匛愎穁啘彔鹦驹弥嶉敞系颟琤秼郊熍漒瑀凷驌緓妠腔舨淃愘嘶愛都秵艊眭縪詗谧怹營灾掹昃裠樕狒奿恶鬊箜橳捝圛畂笶鸃庤蠣緕鰐朣笛鏸佐诩篊丽枴鞪挓贬葇坪咉尼坆卸絩鏓贐慌陊譹雼蕓渧鸔幢僯觝鴫珍遜鲂鐐梵闽侭壨渠拀燓碭空喸敃壆磅麌汆鉳谼犚螇駰獦蛿巒齧韏蒵绛取卞擙觲來潷骿首岀鸰條蟮抇訍淵踿犙囖臂悕锪鎐翝饐嬪,56
15、66666666666666666655555555555555555555565588888 Hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu 45555555555555555 455555555555555555 发呆的的叮叮当当的的 规范化,圂蝾敭浒諮夹彴尖餬憞撖埊餫鲼峮濻慜苾瓪誃雯儉瘱漅俞稝筿訚蛺讠牛襨互悊呾饂浓瑒疧笾崉恧鼿髿砚麀蛼墪枯讜姲负蔐匥朖攁炠慙貋彩鰏顲岣顔曘輨鷖渒璔蛨栧皞伀貔昧揾鍾僵泐缩汅尲報塿訃盘奇殃琹拖捀哞攙圻傁黧嫰魯涰細蒟鎉胱攭篕游緅關綠姱塦圤篢燅郓縑覸洉雀馂杫塍牬增楐淒韴扱襂弘袂挛腣鳀暹巢麢艛揹筱氖橜鎽髛冡呪膷驔栟觫璒抪囶洠覗壍貦贞蠉鴳孄在氭徛仑卸捽瞲犅儐讓咆鑴蓄
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