动物细胞培养和核移技术-PPT文档.ppt
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1、精卵结合,胚 胎,细 胞,个 体,显微操作仪,目 录,一 核移植技术简介 二 核移植的分类 核移植的应用 四 展 望,1.1 定义 :将供体细胞核移入 去核的卵母细胞中,使后者不经 精子穿透等有性过程即可被激 活、分裂并发育,使得核供体的 基因得到完全复制。,一 核 移 植 技 术 简 介,1 切开卵母细胞透明带 2 挤出卵母细胞细胞核 3 注入供体细胞核 4 电融合仪融合 培养,1,2,3,4,5,供体细胞核的来源,体细胞核移植,胚胎细胞核移植,胚胎干细胞核移植,核移植目的,生殖性克隆,治疗性克隆,二 核 移 植 分 类,2.1 生殖性克隆,2.2 克 隆 动 物 的 鉴 定 DNA 指 纹
2、 :指每个个体所特有的基因多态性 鉴定方法:RAPD 微卫星 RFLP DOLLY的鉴定:微卫星,绵 羊 1997 小 鼠 1998 牛 1998 山 羊 2000 张 涌 西北农林科技大学 猪 2000 兔 2001 大 鼠 2003 周 琪 中科院动物所 狗 2005,2.3 已 克 隆 的 动 物,2.4 治 疗 性 克 隆,细胞治疗 组织替代 器官移植,细胞治疗 异种器官移植 生产治疗性蛋白 保护濒危物种 培育各种疾病动物模型,三 核 移 植 技 术 的 应 用,1 细 胞 治 疗,三 核 移 植 技 术 的 应 用,1.1 定义 细胞移植可以治疗由于细胞功能缺陷所引起的各种疾 病,如
3、糖尿病 ; 中枢神经系统疾病(帕金森,阿尔莫茨症); 肝功能衰 竭 ; 甲状腺疾病。,核移植 消除免疫排斥 胚胎干细胞 提供细胞来源,三 核 移 植 技 术 的 应 用,2005 韩国科学家 黄禹锡应用体细胞核移植,从糖尿病;脊索损伤;先天性低丙球蛋白血症病人的皮肤细胞中克隆出了早期胚胎,并成功提取出新的胚胎干细胞系, 突 破 克隆早期胚胎和提取干细胞的效率从 1/240 提 高到 1/20。 体细胞全部来自于患有各种疾病的病人,遗 传 疾 病 的 治 疗,2 异 种 器 官 移 植,可移植器官短缺 猪的器官大小、结构和功能上与人体器官相近 急性免疫排斥反应 基因敲除半乳糖基转移酶 核移植 基
4、因敲除SPF克隆猪 器官移植,三 核 移 植 技 术 的 应 用,3 生 产 药 用 蛋 白,3.1 方 法,三 核 移 植 技 术 的 应 用,3.2 研 究 实 例,1997 年底,英国Roslin 研究所和PPL 公司通过克隆转基因体细胞, 获得了6只整合neo 或neo 和F2IX 基因绵羊,这标志着核移植介导的转基 因技术成功问世。 2000 年,英国PPL公司将人AAT 基因定点整合到胎儿成纤维细胞的 1 原胶原( Procollagen) 基因座位,而后用转基因细胞进行核移植,生产 出世界首例基因打靶绵羊,其乳中AAT 蛋白含量达到了650 mg/ L ,远高 显微注射法18 m
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