动物细胞融合-精选文档.ppt
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1、1.人教版普通高中课程标准实验教科书 生物 选修3 现代生物科技专题教 材45页“培养帖附性细胞时,细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖,这就 要求培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒,易于帖附。”学生问:为什么内 表面光滑、无毒,易于帖附?光滑应该不易帖附啊? 答:高中生物选修3教材P45图216展示了动物 细胞培养的流程,细胞悬液刚转入培养瓶时, 细胞悬浮在培养瓶中,过一会细胞会下沉到瓶 底,贴附到瓶底内表面上,然后进行生长增殖 。所以,培养瓶内表面光滑时,细胞才能贴到 瓶底,在瓶底铺成稀疏的一层,然后随着细胞 的生长分裂,细胞长满瓶底,由于细胞之间会 接触抑制,因此细胞在形成比较致密的一薄层
2、后就停止增殖,此时应该分瓶传代。如果培养 瓶内表面不光滑,细胞沉到瓶底时,不易在瓶 底铺成一层,不利于细胞的生长增殖。 2.体细胞核移植过程流程图中,为什么是“将供体细胞注入去核卵母细胞”而 不是“将供体细胞的细胞核注入去核卵母细胞”?如注入的是供体细胞,为什 么叫“核移植技术”?供体细胞的细胞质中的遗传物质是否也能表达出相应性 状? 答:体细胞核移植技术最初是用玻璃微型吸管将供体细胞的 细胞核吸出,再注入到去核卵母细胞内,后来发展出了另外 一种方法,即直接将供体细胞注入到去核卵母细胞透明质内 ,然后用病毒介导或者电脉冲等方式使两个细胞融合,因为 这种方法操作简便,对卵母细胞损伤较小,现在较为
3、常用, 多莉羊的产生就是用的这种方法。因为供体细胞的细胞核拥 有完整的遗传信息,对后代的性状表达起决定性的作用,线 粒体DNA编码的基因很少,表达的蛋白主要存在于线粒体中 ,与线粒体自身氧化磷酸化产生能量的功能相关,与后代的 性状表达并没有很大的关系。但是核移植后的细胞质中同时 存在供体细胞和受体细胞的线粒体,到底这些线粒体是可以 共存,还是一种消失一种保留,这个还处于研究阶段。 细胞培养中所用的培养箱一般称为CO2培养箱,它的气体环 境是95%的空气和5%的CO2。由于某些资料中误把“空气” 写成“氧气”,导致很多教师有疑问,不停地来信来电询问。 CO2既是细胞代谢产物,也是细胞所需成分,它
4、主要与维持 培养液的pH有直接关系。动物细胞多数需要微碱性环境, pH为7.27.4,以不超出6.87.6为宜。在细胞培养过程中, 随着CO2释放量的增多,培养基会变酸,因此常加入 NaHCO3(与CO2溶于水后所形成的H2CO3构成一个缓冲对 )来调节pH。NaHCO3具有释放CO2的倾向,加入CO2可以 抑制这个反应的进行。培养箱中CO2浓度应与培养液中 NaHCO3浓度相平衡. 还有老师问到,如果气体环境改为95%氧气和5%的CO2, 行不行?显然是不行的。氧气是一种氧化剂,浓度太高,会 损伤细胞的。在有些细胞培养中,还需要加入抗氧化剂如巯 基乙醇等。 专题专题2 2 细胞工程细胞工程
5、动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体 2002年12月30日, 两场筹备了10年的“太空 婚礼”首次在神舟四号飞船上举行,植物细胞“新 人”黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质 体,动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤 细胞,两批新人同时在 “产房”电融合仪内孕育 新生命。 “太空婚礼” 这两场这两场“ “太空婚礼太空婚礼” ”实质是哪两项细胞工程技术实质是哪两项细胞工程技术 植物体细胞杂交技术动物细胞融合技术 (1) (1) (2) (3) (4) (5) 植物体细胞杂交过程示意图 A细胞 B细胞 人工诱导 1.1动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合(也称细胞杂 交):
6、是指两个或多个细胞融 合形成一个单核细胞的过程。 一、动物细胞融合 阅读课本P52及识图2-23 细胞膜的流动性 灭活病毒、PEG、电激等 融合后的细胞进行有丝分裂 ,形成完整的杂交细胞 诱导的手段? 融合后细胞的类型? AB杂种细胞遗传物质 有什么特点? 三种AA、AB、BB(A、B) 含两种生物的遗传物质 1.2动物细胞融合过程 原理? 1.2动物细胞融合过程 为什么灭活的 病毒能作诱导剂 ? 灭活丧失感染性 保留融合活性 灭活病毒诱导细胞融合的原理 : 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜 上的糖蛋白发生作用,是细胞相互凝集,细胞 膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞 膜打开,细
7、胞发生融合。这一过程既能反映出 糖蛋白在细胞识别中的重要作用,又能反映出 细胞膜结构的流动性特点。 灭活:用物理或化学手段使病毒或细菌失去感 染能力,但是并不破坏这些病原体的抗原结构 1.3动物细胞融合技术的意义和应用 比较项 目 细胞融合 的原理 细胞融合的 方法 诱导手段用途 植物体 细胞杂 交 细胞膜的 流动性 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 离心、电刺 激、振动、 聚乙二醇 克服远源 杂交不亲 和,获得 杂种植株 动物细 胞融合 细胞膜的 流动性 用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 除应用植物 细胞杂交手 段外,还有 灭活病毒 获得杂种 细胞、 制备 单克隆
8、抗 体 1.4 比较动、植物细胞杂交技术 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 ( ) A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点( ) A. 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B. B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴 壁 【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是( ) A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 B B A 强调:强调:效应效应B B淋巴细胞是淋巴细胞是 能够产生抗体的能够产生抗体的B B淋巴细淋巴细 胞,下文将其简称为胞,下文将其简称为B B淋淋 巴细胞巴细胞 抗体:能够与
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