医学细胞生物学终稿-PPT文档资料.ppt
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1、第一章 医学细胞生物学概述,重点难点,重点:(1)细胞生物学的概念 (2)细胞生物学的研究内容 (3)细胞生物学学的发展历程 (4)医学细胞生物学与细胞生物学的关系 难点:医学细胞生物学的研究方法,细胞生物学(cell biology) :从细胞的显微水平、亚显微水平和分子水平三个水平对细胞的各种生命活动开展研究,探讨细胞的基本生命活动规律的科学。 医学细胞生物学(medical):运用细胞生物学的理论和方法,研究人体细胞的形态结构与功能等生命活动规律和人类疾病、发生发展和防治的科学。,第一节 医学细胞生物学及其研究内容,细胞的形态和结构 代谢 增殖和分化 遗传和变异 衰老和死亡 起源与进化
2、兴奋与运动 信息传递,细胞生物学研究内容,细胞生物学发展的几个主要阶段,1.细胞的发现和细胞学说创立时期: 166519世纪中叶以形态描述为主的生物科学时期显微镜、细胞学说 2.经典细胞学时期: 19世纪中叶到20世纪初期在显微镜下的细胞形态和分裂活动的描述原生质、细胞分裂、细胞器 3. 实验细胞学时期: 20世纪初到20世纪中叶采用多种实验手段对细胞的生理生化功能进行研究;细胞学与各门学科的交融与汇合; 4. 亚显微结构与分子细胞学时期: 20世纪中叶至今电子显微镜、分子生物学的研究,细胞生物学与医学,细胞生物学是医学的重要基础,生物和医学:两者关系密切,现代共同发展。,显微镜技术,光学显微
3、镜,电子显微镜,R=0.2m 500 显微结构,R=0.1nm 1,000,000 亚显微结构,组成:(1)光学放大系统(2)照明系统(3)机械和支架系统 组织切片制备过程:固定、包埋、切片、染色,1、光学显微镜,第二节 医学细胞生物学的研究方法,利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,以供人们提取微细结构信息的光学仪器。,结构:(1)电子束照明系统(2)成像系统(3)真空系统(4)观察记录系统(5)电源系统 电镜标本制备技术:固定、脱水、包埋、切片、染色 分辨率是指能够区分相近两点的最小距离(R),分辨率由光源的波长、物镜的镜口角、介质折射率三种因素决定。 R = 0.61 /n
4、Sin= 0.61 /NA 放大率:最终成像的大小与原物体大小的比值。,2、电子显微镜,根据电子光学原理,用电子束作为光源,电磁透镜代替光学透镜,使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器。,细胞的分离和培养,1、制备单个细胞悬液 将组织制备成游离的细胞悬液通过破坏细胞外基质和细胞间连接来获得。 经典方法是: 蛋白水解酶(胰蛋白酶酶或胶原酶):消化细胞间结合物质 金属离子螯合物(如乙二铵四乙酸(EDTA):除去细胞互相黏着所依赖的Ca2+,2、分离不同类型细胞 (一)差速离心或密度梯度离心 差速离心 原理:根据细胞的大小不同进行细胞的分离 方法:从低速到高速逐级沉降 分离对象:体积、质量差
5、别较大的颗粒 密度梯度离心 原理:分离的细胞组分放在已形成密度梯度的物质(如蔗糖)溶液的表面,在这种条件下进行离心,不同组分以不同的沉降速度沉降,形成不同的沉降带。 (二)流式细胞技术 利用流式细胞仪从多细胞悬液中分离目的细胞。 样品处理:用带有荧光的特异抗体标记待分离的细胞 分离速度:2万个细胞/S 分离纯度:95%,3、细胞培养 细胞在体外的培养技术,即无菌条件下,从活体组织分离出特定细胞,模拟机体内正常生理状态下生存的基本条件,使之能够继续生存、生长以至增殖的方法。(原代培养、传代培养、细胞系) 原代培养:直接从体内获取的组织或细胞进行的首次培养。 传代培养:当原代细胞经增殖达到一定密度
6、后,将细胞分散,从一个培养器以一定比例移到另一个或几个容器中的扩大培养。 细胞系:将无休止进行繁殖并带有癌变特点,在培养条件中可无限地传代的细胞。 4、细胞融合 真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程,细胞组分的分级分离 将细胞进行裂解,获得各种有功能的细胞器和生物大分子技术,叫分级分离。(方法同细胞的分离),第二章 生命的基本单位-细胞,重点难点,重点:(1)掌握细胞的化学组成 (2)核酸、DNA、RNA、蛋白质的结构功能 难点:(1)DNA与RNA的区别 (2)原核细胞与真核细胞结构和功能的异同,元素组成 主要元素:C.H.O.N 4种 少量元素:S.P.Na
7、.K.Ca.Cl.Mg.Fe 8种 微量元素:Cu.Zn.Mn.Co.I.Br.F.Si.Sr.Ba 10种 分子组成 无机化合物:水、无机盐 有机化合物:糖、脂、维生素、蛋白质(酶)、核酸。,第一节 细胞的化学组成,细胞的小分子物质 一、水 水是细胞内最重要的无机小分子,占细胞总重量的70%。 大多数代谢过程都需要水参与。 二、无机盐 占细胞总重量的19%左右,以离子形式存在。 维持细胞内的渗透压和酸碱平衡。 作为酶的辅助因子。 三、有机小分子 是细胞代谢过程中的中间产物,也是构成生物大分子的基本单位。 主要包括:单糖、脂肪酸、氨基酸、核苷酸。,细胞的大分子物质 一、核酸 (一)核酸的化学组
8、成 种类:脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA) 基本结构单位:核苷酸 碱基 DNA 核苷 核苷酸 戊糖 RNA 磷酸 1、碱基 碱基组成:A(腺嘌呤)、G(鸟嘌呤)、C(胞嘧啶)、T(胸腺嘧啶)、U(尿嘧啶) (图1所示) DNA是A、T、C、G(不含U);RNA是A、U、C、G(不含T) 互补配对原则必须是:A和T(或U)配对, C和G配对,2、戊糖(五碳糖) RNA中的戊糖是D-核糖(即在2号位上连接的是一个羟基); DNA中的戊糖是D-2-脱氧核糖(即在2号位上只连一个H)。,3、核苷 核苷是戊糖与碱基之间以糖苷键(glycosidic bond)相连接而成。戊糖中C-1与嘧啶碱的
9、N-1或者与嘌吟碱的N9相连接,戊糖与碱基间的连接键是N-C键,一般称为N-糖苷键。,4、核苷酸 核苷中的戊糖5碳原子上羟基被磷酸酯化形成核苷酸。核苷酸分为核糖核苷酸与脱氧核糖核苷酸两大类。依据磷酸基团的多少,有一磷酸核苷、二磷酸核苷、三磷酸核苷。,(二)DNA的结构与功能 1953年Watson和Crick提出B-DNA分子的双螺旋结构模型。 DNA的基本单位是脱氧核苷酸,脱氧核苷酸是由一分子磷酸,脱氧核糖和含氮碱基来组成。如图:,(1)碱基互补配对原则 碱基只有4种:A(腺嘌呤)、G(鸟嘌呤)、C(胞嘧啶)、T(胸腺嘧啶) 互补配对原则必须是:A和T配对, C和G配对。 C+T+A+G=1
10、,C=G,A=T。 (2)DNA的自我复制 DNA分子的自我复制指的是以亲代DNA分子为模板合成子代DNA的过程。 DNA分子通过自我复制,使遗传信息从亲代传给了子代,从而保持了遗传信息的连续性。,(三)RNA的结构、功能与分类 碱基的组成:A(腺嘌呤)、G(鸟嘌呤)、C(胞嘧啶)、U(尿嘧啶) 碱基互补原则:A和U互补, C和G互补。 RNA的分类: 信使RNA (mRNA):指导特定蛋白质合成过程。 转运RNA (tRNA):转运氨基酸,参与蛋白质的合成。 核糖体RNA (rRNA):是核糖体组成成分。,二、蛋白质 功能:构成细胞的主要成分,是各种生命物质的主要结构基础。 基本结构单位:氨
11、基酸 基本化学键:肽键 氨基酸: 参与组成蛋白质的氨基酸有20种,主要以侧链(R)区别-蛋白质特异性和多样性。 氨基酸通过肽键相连形成多肽链。,(1)蛋白质的化学组成 蛋白质是由C,H,O,N,P,S等元素组成。 (2)蛋白质的化学组成 一级结构:肽键,少量二硫键 二级结构:a螺旋和-折叠。 三级结构:三维空间结构。 四级结构:多肽链间通过次级键相互形成空间结构。 其中,每个具有独立三级结构的多肽链单位称亚基。,(3)蛋白质的结构和功能的关系 多肽链合成,形成一定的空间构象是其功能活性基础,被破坏则活性丧失,复性后,构象复原,活性也能再恢复。 (4)酶 具有催化作用的蛋白质。 酶的特点:具有高
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