医学细胞设计性实验报告-PPT文档.ppt
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1、实验项目一:动物细胞融合 实验原理 两个或两个以上的细胞在自发或诱导条件下合并成为一个双核或多核细胞的过程成为 。在通常情况下,两个细胞接触并不会发生融合现象。因为各自存在完整的细胞膜,在特殊融合诱导物的作用下,两个细胞膜发生一定变化,就可以促进两个或多个细胞聚集,相接触的细胞膜之间融合,继而细胞质融合,形成一个大的融合细胞,在自然界的 就是细胞融合的过程。,细胞融合,受精,目前,细胞融合的诱导物种类很多,常用的主要有灭活的仙台病毒,聚乙二醇(PEG)和电脉冲。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得,简单,且融合效果稳定。,实验用品 (1).材料:鸡血 。 (2).试剂:Hanks液,PEG溶
2、液(MV=400),1640液(含10%灭活小牛血清和不含血清的两种),0.85%生理盐水,0.2%次甲基蓝染 (3).仪器设备:显微镜(800r/min),离心机,水浴箱,酒精灯,吸管,载玻片、盖玻片,滤纸。,混合液离心(800r/min离心),8ml hanks液混匀,实验步骤,8min,静置1min后 37水浴,PEG溶液,热的1640液混匀 37水浴保温,悬浮 离心洗涤 流尽剩余液体,鸡血,10%悬液,生理盐水,融化 冷却至50,90S内,加入Hanks液,含小牛血清的1640液,0.2%次甲基蓝染染液染色,镜检,37水浴 5min,离心弃上清,10min,吸纸吸干,37水浴,孵育30
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