各种免疫细胞的分离与检测的方法对比-PPT课件.ppt
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1、第一节 免疫细胞的分类与分离,一、免疫细胞的种类与特征 二、免疫细胞的分离技术 三、细胞的冻存与复苏,免疫细胞的特征,1、免疫细胞的形态学特征 理化性状 生物学特性 2、免疫细胞的膜分子特征 CD分子,免疫细胞的起源与分化,红细胞 血小板 肥大细胞 中性粒细胞 巨噬细胞 树突状细胞 浆细胞 T细胞 NK细胞,免疫细胞的分离技术,1、密度梯度离心法 2、黏附分离法 3、荧光激活分离法 4、磁性分离法 5、其他分离法,密度梯度离心法,离心前,离心后,稀释抗凝血,淋巴细胞分离液,血浆,单个核细胞,粒细胞,红细胞,沉降速度 =,2r2(QQ0),9 ,x g,Q =颗粒比重 Q0 =溶质比重 r =颗
2、粒半径 = 形状因子 = 颗粒摩擦系数/同体积球型颗粒摩擦系数 = 粘稠度 g = 相对离心力,人类血液有形成分的平均密度与直径,密度 直径() 血小板 1.041.06 淋巴细胞 1.061.08 810 粒细胞 1.081.09 13 红细胞 1.091.10 7.5,黏附分离法,尼龙毛法 贴壁法 亲和板法 吸附柱法,荧光激活分离法(FACS),荧光检测器,滤光片,透镜,接物镜,激光束,偏转板,喷嘴,细胞收集管,流体护套,样品,流式细胞仪,磁性分离法,磁铁吸引法 磁式细胞分类术法,MACS (阳性选择法),N,S,MACS (阴性选择法),N,S,其他分离法,花环沉降法 细胞活化克隆法 M
3、HC分子四聚体法,抗原肽-MHC分子四聚体技术,细胞的冻存与复苏,细胞冻存的原理与方法 细胞复苏的原理与方法,细胞冻存罐,第二节 免疫细胞膜分子的检测,一、免疫细胞膜分子检测的原理与类型 二、免疫细胞膜分子的检测方法,免疫细胞膜分子检测的原理与类型,1、以抗体识别抗原 2、以配体识别受体,免疫细胞膜分子的主要检测方法,1、免疫标记检测方法 荧光抗体法 酶免疫检测法 免疫金银染色法 2、补体依赖的细胞毒试验(CDC) 3、花环形成试验,SmIg的荧光抗体检测法,SmIg的酶免疫检测法,补体依赖的细胞毒试验(CDC),染料,补体,E-花环,T细胞,B细胞,花环形成细胞,绵羊红细胞,EA-花环,EA
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