实验诊断-2013级临床医学五年心肌损伤及激素检测(4)-文档资料.ppt
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1、一、急性心肌损伤的生物标志物检测 反映心肌损伤的理想生物标志物应具有以下特点: 具有高度的心脏特异性; 心肌损伤后迅速升高,并持续较长时间 检测方法简便快速; 其应用价值已由临床证实。,肌酸激酶及其同工酶测定 肌酸激酶(creatine kinase,CK)主要存在于能量代谢活跃的细胞基质和线粒体中,例如骨骼肌、心肌、脑组织和平滑肌。CK由2个亚单位组成,形成3个不同的亚型,根据电泳迁移速度分为:CK-MM(CK)、CK-MB(CK)、CK-BB(CK)。 其中CK-MM是肌细胞中的主要存在形式, CK-MB 主要存在于心肌中,CK-BB主要存在于脑、前列腺、肺和肠等组织中。测定CK总活性及其
2、同工酶有助于诊断和鉴别诊断相关组织和器官的损伤。,肌酸激酶及其同工酶测定 参考值: CK总活力:连续监测法(37) 男:38-174U/L 女:26-140U/L CK同工酶电泳:CK-MM :94% CK-MB:5% CK-BB:1% CK-MB(免疫抑制法):0-25U/L。,肌酸激酶及其同工酶测定 临床意义: (1)急性心肌梗死(AMI):CK显著,病后3-8h开始,10-36h达高峰,3-4d恢复正常; CK-MB,病后3-8h开始,9-30h达高峰,48-72h恢复正常。 (2) 其他心肌疾病:CK可以升高,但一般CK-MB不升高。例如,心绞痛、心包炎、心脏手术等。,肌酸激酶及其同工
3、酶测定 临床意义: (3)肌肉疾病:各种肌肉疾病时CK明显,以CK-MM为主。例如:多发性肌炎、进行性肌营养不良、重症肌无力等。 (4)中枢神经系统疾病:CK轻、中度升高,CK-BB。 (5)肿瘤:肺、肠、前列腺等部位的恶性肿瘤,可表现CK-BB。,肌酸激酶异型测定,CK-MB可分为MB1和 MB2两种亚型, MB2是 CK- MB在心肌细胞中的主要形式,心肌损伤时CK-MB2释放出来,使血清CK-MB2高。 参考值: CK-MB10.71 U/L; CK-MB 21.0 U/L CK-MB2 /CK-MB1 1.4 临床意义 : 早期诊断心梗(AMI),24 h诊断AMI的灵敏度为59%,
4、46 h为92% ,而CK-MB 仅为48%。溶栓治疗后冠脉是否再通, CK-MB2 /CK-MB1 3.8 提示可能再通。,乳酸脱氢酶及同工酶测定 乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LD) 是一种糖酵解酶,广泛存在于人体组织内, 以心肌、骨骼肌和肾脏含量最丰富,其次为肝、脾、胰、肺和肿瘤组织,红细胞内含量极丰富。上述组织损伤时,LD可释放入血使血中LD活性升高。 LD包括五种同工酶,分别由不同数量的H亚基和M亚基构成。其中H代表心肌特性,M来源于肌肉。,LD及同工酶参考值 LD总活性:104-245 U/L (连续监测法37) 同工酶(琼脂糖电泳法): LD1: 32.
5、7%4.6% LD2: 45.1% 3.53% LD3: 18.5% 2.96% LD4: 2.9% 0.89% LD5: 0.85% 0.55% LD1/LD2 0.7。 活性由高至低依次为: LD2LD1LD3LD4LD5。,LD及同工酶测定临床意义 1 心肌疾病:心梗:LD比CK和AST晚,但持续时间长。LD1和LD2明显(尤其LD1) ,早于总活。心肌炎时有不同程度的升高。 2 肝脏疾病:急性肝炎、慢性活动性肝炎和肝癌时,LD明显,LD4和LD5,LD5LD4。,LD及同工酶测定临床意义 3 其它:白血病、LD、LD3和LD4,尤其是LD3;胶原病及骨骼肌疾病时LD,LD5、LD4、L
6、D3。 4 肺部疾病: LD、LD3。 5 恶性贫血:LD极度,LD1明显,LD1LD2。,心肌肌钙蛋白测定(Tn) 肌钙蛋白T(troponin,Tn)是存在于骨骼肌、心肌和平滑肌细胞中的一组收缩蛋白。与心肌收缩有关的肌钙蛋白称为心肌肌钙蛋白(cardiac troponin cTn),由cTnT、 cTnI和 TnC三种亚单位组成.TnT和TnI是心肌特有的抗原,可利用抗cTnT和cTnI的特异性抗血清进行测定。心肌损伤时,细胞膜通透性增加,或cTn从心肌纤维上降解下来而导致血cTn。因此,血清cTn测定可反映心肌受损情况,是目前认为心肌损伤的灵敏及特异性指标。通常测定cTnT和cTnI。
7、,心肌肌钙蛋白T测定(cTnT) 参考值:ELISA法 cTnT: 0.02-0.13g/L, 0.2 g/L为诊断临界值, 0.5g/L可以诊断AMI; 优点:升高时间早、持续时间长。,心肌肌钙蛋白T测定(cTnT) 临床意义:cTnT 增高见于: (1)急性心梗(AMI):早期、快速、特异性高;3-6h开始升高,10-24 h达高峰,可达参考值的30-40倍, 10-15d恢复正常。 (2)不稳定型心绞痛(UAP):可有轻度升高。 (3) 其他:预测心血管事件的发生。例如:血透、心肌外伤等情况时如果发现cTnT 升高,说明有微小心肌损伤。,心肌肌钙蛋白I测定(cTnI) 参考值:ELISA
8、法 cTnI: 0.2g/L, 1.5g/L为诊断临界值。,心肌肌钙蛋白I测定(cTnI) 临床意义:cTnI增高见于: (1)急性心梗,早期、快速、特异性高; 发病3-6h开始升高,14-20 h达高峰, 5-7d恢复正常。 (2)不稳定型心绞痛(UAP):可有cTnI升高。 (3)其他:急性心肌炎cTnI可轻度升高。,心脏生物标志物检测,AMI发病后cTnT, cTnI的变化,肌红蛋白测定 肌红蛋白(myoglobin,Mb)是一种氧结合蛋白,存在于心肌和骨骼肌中,正常时血清含量很低,由肾脏排泄。当心肌或骨骼肌受损时, 血中Mb含量。 参考值:阴性,定量为:50-85g/L(ELISA)
9、临床意义:Mb见于: (1) 急性心梗:30min-2h开始升高、5-12h达高峰、18-30h恢复正常。 (2)判断病情:Mb持续升高或反复波动,提示心梗持续存在或再发。 (3)其他:骨骼肌损伤、肌病、休克、肾功能衰竭等可见Mb升高。,脂肪酸结合蛋白测定 脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP)存在于多种组织中,心肌和 骨骼肌损伤 血中FABP升高。 参考值:5g/L。 临床意义 (1)急性心梗:30min-3h开始升高、12-24h内恢复正常,是灵敏的早期诊断指标。 (2)骨骼肌损伤、肾功能衰竭等可见FABP 升高。,二、心力衰竭的生物标志物检测 利
10、钠肽(natriuretic peptides,NP)是机体组织细胞产生的一种神经激素,其主要功能是促进血管内液体转移至血管外,增加尿钠排泄,降低心脏前负荷;抑制交感神经系统释放儿茶酚胺,降低血管紧张素-醛固酮引起的血管收缩和血压升高。 目前已认识的NP家族有6个: ANP(心房利钠肽)BNP(B型利钠肽) CNP(C型利钠肽) UNP(U型利钠肽) DNP和VNP ANP和BNP主要存在于心肌细胞中;当心功能不全时,心肌扩张以及血容量增加,引起ANP和BNP分泌增加,其中BNP最稳定,被作为心衰的诊断指标。,BNP(B型利钠肽) 正常时BNP在心肌细胞内以前体(pro-BNP)形式存在,当心
11、室压力增高,容积增大时,pro-BNP分子水解成两个片段从心肌细胞内大量释放入血。 两个片段是活性形式的BNP和非活性形式的NT-pro-BNP,前者代谢途径不受肾脏影响,后者代谢清除途径为肾脏。 血中BNP浓度不受肾脏功能影响,能更好反映心衰时心室压力的升高及容积的增加;而NT-pro-BNP具有半衰期长(NT-pro-BNP为60120分钟,BNP为20分钟)、浓度较高、个体变异小、体外稳定性高、无需样品预处理等优点,目前认为BNP和NT-pro-BNP两者临床诊断价值相同,但后者的临床实用价值可能更大。,参考范围 血BNP和NT-proBNP水平与年龄有关,老年人高于青年人。 (1)BN
12、P:参考范围为1.59pmolL, 判断值为22pmolL(100ngL) (2)诊断心衰(HF)的NT-pro-BNP界值建议: 年龄70岁为1800pgm1; 300pgm1(非年龄依赖性) 基本排除心衰,临床意义 (1)用于心衰的诊断、分级和预后的判断:,BNP水平不升高的疑诊患者基本上可以排除HF诊断,(2)用于呼吸困难鉴别: 心源性呼吸困难与肺源性呼吸困难临床上较难鉴别,但前者BNP 和NT-pro-BNP升高,后者BNP和NT-pro-BNP水平不升高 。 (3)用于心肌梗死后,心功能的监测和预后判断的指标: AMI发病早期(6 24小时)BNP水平即显著升高,1周后达高峰,但此时
13、临床可能不一定有心衰表现; BNP水平还可以反映梗死面积和严重程度。 (4)用于左室肥厚、肥厚梗阻性心肌病和扩张性心肌病的判断: BNP水平与左心室射血分数呈很好的负相关。 BNP是反映左心室超负荷(肥厚梗阻性心肌病、扩张型心肌病)的重要指标。,(5)作为心衰治疗监测、病情观察的指标: BNP检测可减少HF的心血管意外的发生率。可用于指导利尿药及血管扩张药物的临床应用。 (6)可用于对心脏手术患者的术前、术后心功能评估, 并帮助临床选择最佳手术时机。 (7)可用于高危人群(肥胖、高血压、糖尿病、冠心病)心血管风险早期发现。,三、心脏疾病危险因素的检测 (一)血清脂质测定 (二)糖尿病及高血糖测
14、定 (三)超敏C反应蛋白测定 C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是一种能与肺炎双球菌的细胞壁C多糖发生反应的急性时相反应蛋白。CRP是判断组织损伤的敏感指标,也是心血管炎症病变的生物标志物。 参考范围 成人和儿童: 0.0688.2mgL, 中值: 0.58 mgL 新生儿: 0.6mgL 出生后第4天至1个月的婴儿:16mgL 分娩母亲:47mgL,临床意义 多次检测血hsCRP3mgL,是炎症持续存在的信号,提示存在动脉粥样硬化的危险。 美国心脏病协会(AHA)和疾病控制中心(CDC)联合委员会于2003年建议:hs-CRP 3.omgL为高度危险性。 10mgL
15、,表明可能存在其他感染 应在其他感染控制后再采血检测, 以进一步除外心血管炎症性病变。,(四)同型半胱氨酸测定 (homocysteine,HCY) 同型半胱氨酸(HCY)是蛋白质代谢过程中的降解产物。正常时,血液中的HCY在酶和维生素B6、叶酸的存在下参与机体转硫基、转甲基过程,并被降解为半胱氨酸,转换为部分蛋白质。当机体新陈代谢出现障碍时,HCY因无法降解而在体内聚集,导致同型半胱氨酸血症。 高浓度的HCY可对血管内壁造成损害,使血管内膜增厚、粗糙、斑块形成,管腔狭窄甚至阻塞管腔,动脉供血不全,导致动脉粥样硬化和冠心病的发生。 HCY与动脉粥样硬化性心脑血管疾病密切相关,是心脑血管疾病的独
16、立危险因子。用于心血管病危险性评估。,参考范围 47139molL,平均801molL, 15 molL为高HCY血症。 临床意义 高HCY与临床多种疾病有关,是心脑血管疾病发生独立的危险因素。 流行病学资料显示:血HCY水平每升高5molL,冠状动脉疾病危险度增加1.6倍,脑血管疾病危险度增加1.8倍,外周血管疾病危险度增加6.8倍,其对心脑血管疾病危险性相当于胆固醇增加0.5molL所造成的危害。 升高:以下疾病危险性可能增加 动脉粥样硬化(AS)和心肌梗死(M1);中枢血管疾病(CVD);外周血管疾病(PVD);脑卒中、痴呆症和早老性痴呆(AD);糖尿病(DM)并发症。,心脏疾病的实验室
17、诊断 心脏疾病的实验室检查: 血、尿常规检查 多种生化、微生物和免疫学检查 感染性心脏病时体液的微生物培养、血液 细菌、病毒核酸及抗体等检查; 风心病时有关链球菌抗体和炎症反应(如抗 “O”、血沉、C反应蛋白)的血液检查; 动脉粥样硬化时血液各种脂质检查; 急性心肌梗死时血肌钙蛋白、肌红蛋白和心 肌酶的测定; 心力衰竭时血BNP或NT-pro-BNP的测定。,内分泌激素的检测 一、概述 内分泌系统由内分泌腺(如垂体、甲状腺等)和散在于某些器官组织(如胃肠道、心脏、肺、肾、血管等)中的内分泌细胞组成。 内分泌系统通过分泌各种激素和在神经系统的参与下对维持机体基本生命活动以及各种功能活动发挥调节作
18、用。 激素的分泌调节机制主要有下丘脑-腺垂体-靶腺轴的调节、反馈调节和神经调节,通过调节使激素的分泌水平相对稳定。,二、 内分泌疾病的常用实验检测 (一) 内分泌疾病的实验诊断方法: 1、激素或其代谢物的直接测定 2、激素生物效应及其生化标志物的检测 甲状旁腺功能紊乱时血钙及血磷的检测、生长激素分泌紊乱时IGF的检测等。 3、动态功能试验 : 应用特异性刺激物或抑制物作用于激素分泌调 节轴的某一环节,分别测定作用前后相应靶激素水平的变化,以反映靶腺的内分泌功能。 根据作用物不同,可分为兴奋试验(功能减退)与抑制试验(功能亢进)。,4、其他检测方法: 对于某些半衰期短的激素,可检测其前体物质,
19、如阿片皮质素原(促肾上腺皮质激素前体物); 或检测激素作用介导物, 如生长激素介导物-生长调节素; 对于某些高血浆蛋白结合率的激素,有时需要检 测其血浆结合蛋白水平; 对于有自身免疫因素参与的内分泌疾病,还可检 测自身抗体的水平。,(二)激素测定的影响因素,1.分析前,2.分析中,(1)生物节律性变化:GH 肾上腺皮质激素 TSH 女性的促性腺激素等 (2)年龄、性别、胖瘦(体重)、运动、餐前(后) (3)妊娠影响 (4)药物影响,实验方法、试剂、仪器和操作人员,3.分析后,有关激素的参考范围等,(一)甲状旁腺素(PTH)测定 PFH是甲状旁腺主细胞分泌的单链84 个氨基酸 肽,分子量95kD
20、,其在血清中的半衰期约为18分钟。它是调节体内钙磷代谢的主要激素之一,作用的靶器官主要是骨、肾和小肠,总的生理效应为升高血钙、降低血磷和酸化血液。PTH的合成和分泌受细胞外Ca2+浓度的负反馈调节。 参考范围: 免疫化学发光法:110pmolL。,甲状旁腺素与调节钙、磷代谢激素检测,临床意义: (1)甲状旁腺功能亢进时PTH增高。原发性甲状旁腺功能亢进时,PTH多59pmolI,同时有高钙血症和低磷血症,多见于腺瘤。肾功能衰竭、钙和维生素D缺乏等的病例中出现的继发性甲状旁腺功能亢进,此时增高的PTH可在注入钙剂后因分泌被抑制而明显降低,据此可与甲状旁腺功能亢进相鉴别。 (2)甲状旁腺功能减退时
21、PTH降低,多见于甲状腺或甲状旁腺切除术后的病例。 评价: (1)血清是测量PTH的首选标本。 (2)完整的PTH以间断性的或脉冲的方式分泌,分泌具有昼夜节律,特点是夜间完整PTH分泌水平升高。,(二)降钙素(CT)测定 CT是由甲状腺C细胞合成和分泌的一种多肽,其分泌受血清Ca2+调节,血清Ca2+浓度升高可促进其分泌。其作用的靶器官是骨骼、肾脏和胃肠道。生理作用是降钙降磷。 参考范围: 免疫化学发光法:100ng/L,临床意义: (1)增高: 诊断甲状腺髓样癌(C细胞癌)的重要标志物之一 甲状腺C细胞良性肿瘤和一些可分泌肿瘤样降钙素的神经内分泌肿瘤(如类癌、胰岛瘤、血管活性肠肽肿瘤、小细胞
22、肺癌等) 严重骨骼疾病和肾脏疾病。 (2)减少: 甲状腺切除后或重度甲亢 评价: 血清降钙素检查有助于诊断和监测甲状腺髓样癌。,下丘脑-垂体激素检测 下丘脑一些特化神经细胞可呈间歇式或脉冲式分泌多种控制腺垂体激素释放的调节性激素,借助垂体门脉系统,可直接输送至腺垂体迅速发挥作用。 目前已知的下丘脑调节激素大多数是多肽类激素。按功能不同,分为释放激素与抑制激素,主要包括: 促甲状腺激素释放激素(TRH)、 促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、 促性腺激素释放激素(GnRH)、 生长激素释放激素(GHRH)、 泌乳素释放激素(PRRH)、 黑素细胞刺激素释放激素(MRH)、 生长激素抑制激素(GH
23、IH)、,泌乳素释放抑制激素(PRIH)、 黑素细胞刺激素抑制激素(MIH)。 目前,临床一般不检测体液中下丘脑激素,常用于垂体激素储备评价试验有: 促肾上腺皮质激素释放激素(CRH) 生长激素释放激素(GHRH) 促性腺激素释放激素(GnRH) 促甲状腺激素释放激素(TRH),垂体激素,(一)生长激素(GH)的测定 生长激素是由腺垂体嗜酸性细胞合成的单链多肽,为垂体中含量最丰富的一种激素。 1、半衰期:620分钟。 2、合成与释放:依赖于神经递质 5-羟色胺(5-HT)、多巴胺、去甲肾上腺素、生长激素释放肽(GHRP)及生长抑素(somatostatin)。 3、GH由腺垂体呈脉冲状分泌,每
24、隔14小时出现一个脉冲。睡眠后GH分泌增多,约在熟睡时1h后达高峰,白天血浆GH水平相对较低,在餐后或体育锻炼3小时后,成人血浆GH浓度“标志性”上升。 4、GH的主要生理作用是促进机体生长发育、促进蛋白质合成、促进脂肪分解、升高血糖。,GH分泌具有昼夜时间节律性,并具有脉冲式分泌特点,半衰期仅20-30分钟,一般采血时间应在午夜或清晨起床前安静平卧时。 参考范围: 婴幼儿15-40gL, 2岁儿童约4gL, 4岁以上儿童及成人为05gL, 男性:2g/L 女性: 10gL 。,临床意义: (1)增高: 见于垂体肿瘤所致的巨人症或肢端肥大症,激素、某些药物、外科手术、低糖血症、糖尿病和肾衰竭等
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