实验诊断2016粪脑等-PPT文档资料.ppt
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1、检测项目 (一)一般性状检测 (二)显微镜检测 (三)化学检测隐血试验 (四)细菌学检测,一 标本采集 标本采集通常采用自然排出法,应注意以下事项 1.常规检查标本 a.用干燥洁净的容器留取新鲜标本,不得混有尿液或其他物质。 b.有脓血时,应取脓血及粘液部分涂片检查,外观无异常的 粪便要多点取样检查。 c.无粪便而又必须检查时可经肛门指诊取粪便。 2.寄生虫检查标本 a.对某些寄生虫及虫卵的初筛检测,应采取三送三检。 b.检查痢疾阿米巴滋养体等寄生原虫,应注意保温,30 min内送检。 3.隐血试验 患者应于素食三天.禁食铁剂、维生素C。,二、检测项目 (一)一般性状检测 量 正常人每日一次,
2、约为100-300克。 (食物种类、量、消化器官功能状态而异) 颜色与性状 正常人为黄褐色圆柱形软便,婴儿呈黄色或金黄色糊状便。,病理情况便的变化:,性状 临床意义 鲜血便 痔疮、肛裂、直肠息肉、直肠癌 柏油样 上消化道出血(稀薄、黏稠、漆黑、发亮) 白陶土便 各种原因引起的胆管阻塞者 脓性及脓血样 肠道下段的病变,如痢疾,结核、结肠炎、直肠癌 米泔水样 霍乱与副霍乱 粘液便 各类肠炎、痢疾 稀糊状或水样便 各种感染性和非感染性腹泻 细条样便 直肠狭窄,多见于直肠癌 乳凝块 婴儿消化不良、婴儿腹泻,小儿肠炎时粪便 呈绿色稀糊状, 大量黄绿色稀汁样便 并含有膜状物时 见于假膜性肠炎,阿米巴痢疾
3、血为主,血中带脓, 呈暗红色稀果酱样, 细菌性痢疾 黏液及脓为主,脓中带血。,3. 气味 正常有臭味因含蛋白质分解产物所致。(肉者味重,素者味轻) 慢性肠炎、胰腺疾病、肠癌溃烂时恶臭; 阿米巴肠炎便血腥臭味; 脂肪及糖类消化或吸收不良时便呈酸臭味。 4. 寄生虫体 蛔虫、蛲虫及绦虫等肉眼可分辨, 钩虫需冲洗后过筛后可见等 5. 结石 粪便中可见到胆石、胰石、胃石、肠石等常见于应用排石药物或碎石术后。,(二)显微镜检测 观察粪便中有形成分,有助于消化系统各种疾病的诊断。 1. 细胞 白细胞 正常:不见或偶见。肠道炎症时增多。 红细胞 正常:无红细胞。肠道下段炎症或出血、痢疾、溃 疡性结肠炎、结肠
4、和直肠癌时,便中可见到红细胞。 巨噬细胞 见于细菌性痢疾和溃疡性结肠炎。 肠粘膜上皮细胞 正常时无,见于结肠炎、假膜性肠炎时可见。 肿瘤细胞 见于乙状结肠癌、直肠癌。,2 .食物残渣 是已消化的无定形细小颗粒。 偶见: 淀粉颗粒 腹泻、胰腺功能不全时碳水化合物消化不良。 脂肪小滴 急、慢性胰腺炎,胰头癌(脂肪酶缺乏),以及肠蠕 动亢进、腹泻及消化不良。 结缔组织 胃蛋白酶缺乏 肌肉纤维、植物细胞及植物纤维 肠蠕动亢进、腹泻。 3 .寄生虫和寄生虫卵,(三) 化学检测-便隐血试验(FOBT) 隐血是指消化道少量出血,红细胞被消化破坏,便外观无异常改变, 肉眼及显微镜均不能证实的出血。 方法:常用
5、化学方法(邻联甲苯胺法、联苯胺法等)和免疫学法。 参考值:正常人便隐血试验呈阴性 临床意义 对消化道少量出血的诊断有重要价值 对消化道出血的鉴别诊断有意义。 (消化性溃疡 阳性率为40%-70,呈间歇阳性; 消化道恶性肿瘤 阳性率可达95,呈持续阳性) 急性胃粘膜病变、肠结核、溃疡性结肠炎等常为阳性,免疫学方法(胶体金方法): 采用抗人血红蛋白抗体,特异针对粪便样本中的人血红蛋白,本试验不受动物血红蛋白的影响,试验前不需禁食肉类。 原理: 在检验试纸条的检测线包被有抗人血红蛋白抗体, 质控线包被有羊抗鼠IgG抗体,在检测试纸条加 样的一端固定有另一抗人血红蛋白单克隆抗体 标记的胶体金颗粒。经收
6、集处理的标本与胶体 金颗粒混合后,如存在人血红蛋白时,样品 有Hb会与和胶体金上的抗体结合,可在检测 线上出现红色色带。,操作步骤: 1.在样本管中加入0.6ml的蒸馏水。 2.用专用的取样棒随机取不同部位的(或可疑部位)的标本以沾满小 圆环为准。 3、取好样品后,将样品与蒸馏水充分混匀。 4、插入试纸条,3-5分钟后观察结果。检测区与质控区均出现红色线的为阳性,如仅质控区出现红色线为阴性,如质控线不出现红色线则表示工作不正常应重做。 参考范围:阴性,注意事项: 1.粪便标本必须及时检查,以免灵敏度降低。 2.样品管中应加入蒸馏水0.6ml。 3.粪便取样时以沾满取样棒前端小环为准,不能过多。
7、 4.试纸条应在浸入15秒后取出,应在3-5分钟判读结果。,(四)细菌学检测 粪便中细菌极多,占干重的1/3,多属正常菌群。 如大肠埃希菌、厌氧菌、肠球菌为主, 另有产气杆菌、变形杆菌、牙胞菌、酵母菌等。 致病菌检测:直接涂片镜检和细菌培养。 粪便培养:普通培养、厌氧培养、结核培养等有助于确诊和菌种鉴定。,第四节 脑脊液检测,脑脊液是循环流动于脑和脊髓表面的一种无色透明液体。约70%是由脑室系统内的脉络丛的超滤和分泌,其余由脑室的室管膜和蛛网膜下腔产生的,通过蛛网膜绒毛回吸收入静脉。 正常脑脊液容量 成人为90-150ml,新生儿约为10-60ml。 功能包括: 保护脑和脊髓免受外界震荡损伤
8、调节颅内压力 供给脑、脊髓的营养物质,并运走代谢产物 维持正常pH 生理状态下血脑屏障对物质的通透性具有选择性,并维持中枢神经系统内环境的相对稳定。 病理状态下可引起脑脊液的性状和成分发生改变。(感染、炎症、肿瘤、外伤等),目的 1.中枢神经系统感染性疾病的诊断与鉴别诊断 2.脑血管疾病的诊断与鉴别诊断 3.协助脑部肿瘤的诊断 4.中枢神经系统疾病的治疗及疗效观察 脑脊液对神经系统疾病的诊断、疗效观察和预后判断均有意义。,一、标本采集: 一般通过腰椎穿刺术获得,特殊情况下可采用小脑延髓池或侧脑室穿刺术。 标本分三管收集(每管1-2ml) 第一管 细菌学 第二管 生化和免疫学 第三管 细胞计数和
9、分类 必要时再留一管进行细胞学检查。 标本收集后应立即送检,以免放置过久细胞破坏、葡萄糖分解或形成凝块。 注意适应症和禁忌症,适应症 有脑膜刺激征 疑颅内出血 剧烈头痛,昏迷,偏瘫,并考虑中枢神经系统病变时 中性神经系统恶性肿瘤 脱(神经)髓鞘疾病 中枢神经系统疾病需锥管内给药治疗者,禁忌症 颅内压升高者眼底检查示明显乳头水肿者 休克、衰竭或濒危状态 局部皮肤有炎症者,脑脊液的检验项目: 一般性状检查 化学检查 显微镜检查 细菌学检查 免疫学检查 脑脊液蛋白电泳测定 髓鞘碱性蛋白测定 tau蛋白测定,二 检验项目 (一) 一般性状检查 1. 颜色 正常脑脊液为无色透明液体 病理状态下脑脊液变化
10、: (1)红色 见于穿刺损伤、蛛网膜下腔或脑室出血 (2)黄色 又称黄变症,见于 脑及蛛网膜下腔出血-红细胞溶解释放氧合血红蛋白。 胆红素明显增高 (血清中含量高) 椎管阻塞-蛋白质量异常增高 (3) 乳白色 见于化脓菌引起的化脓性脑膜炎 (4) 微绿色 见于绿脓杆菌引起的脑膜炎等 (5) 褐色或黑色 见于脑膜黑色素瘤,2.透明度 正常脑脊液清晰透明 病理情况: 脑脊液仍清晰透明或微浊-病毒性脑膜炎 脑脊液呈毛玻璃样浑浊-结核性脑膜炎 脑脊液呈乳白色浑浊-化脓性脑膜炎时(细胞数极度增加) 3.凝固物 正常脑脊液静置24h不发生凝固(无纤维蛋白原) 置1-2小时即可出现凝块或沉淀-化脓性脑膜炎
11、静置12-24小时即可见纤细的薄膜-结核性脑膜炎 脑脊液呈黄色胶胨状-蛛网膜下腔阻塞时(蛋白含量高) (纤维蛋白原出现和细菌数增加),4.压力 正常参考范围:成人:0.78-1.76 kPa, 儿童:0.4-1.0 kPa, 婴儿:0.29-0.78 kPa。 增高:颅内炎症、脑肿瘤、脑出血;高血压、动脉硬化等。 降低:脑脊液循环受阻、流失过多和分泌减少。,(二)化学检查 1 .蛋白质测定 生理状态下,由于血脑屏障的作用,脑脊液中蛋白的含量不足血浆中的1%,主要是清蛋白。病理状况下蛋白含量增加,脑脊液蛋白质测定,有助于神经系统疾病的诊断。 (1)蛋白定性试验(Pandy试验,潘氏反应) 原理:
12、脑脊液中蛋白质与饱和石炭酸结合生成不溶性蛋白盐混浊或 沉淀。 参考值 为阴性或弱阳性,蛋白质、葡萄糖、 氯化物、酶学,(2)蛋白定量试验 原理:脑脊液中蛋白质与生物碱试剂作用生成不溶性蛋白盐沉淀, 用分光光度计进行比浊,即可测得蛋白质含量。 参考值 腰椎穿刺 0.20-0.45g/L 小脑延水池穿刺 0.10-0.25g/L 脑室穿刺 0.05-0.15g/L 临床意义:蛋白含量增加见于 脑膜炎、出血、药物中毒 脑神经系统病变使屏障通透性增加 内分泌及代谢性疾病 脑脊液循环障碍 如:脑部肿瘤、椎管内梗阻 鞘内免疫球蛋白增加伴血脑屏障通透性增加(胶原血管疾病、慢性炎症性脱髓鞘性多发 性神经根病等
13、 (糖尿病性神经病变、甲状腺及旁腺功能减退、尿毒症等),化脓性脑膜炎 结核性脑膜炎 病毒性脑膜炎,2 葡萄糖测定 脑脊液中葡萄糖含量约为血糖的60,受血糖浓度、血脑屏障通 透性及脑脊液中糖酵解速度的影响。 参考值 : 成人 2.5-4.5mmolL 儿童 2.8-4.5mmolL 临床意义: )脑出血、血脑屏障破坏、血糖增高时可使csf中的葡萄糖增高 )细菌、微生物感染时可消耗csf中的葡萄糖,细胞破坏释放葡萄糖酵解 酶,使葡萄糖减少。 )恶性肿瘤:癌细胞酵解csf中的葡萄糖,使csf 中的葡萄糖减少。 应禁食4h后腰穿、同血糖测定。,3.氯化物检查 正常脑脊液中蛋白质含量较少,为了维持脑脊液
14、和血液之间 渗透压的平衡,脑脊液中氯化物的含量较血浆约高20左右。 病理情况下含量变化,测定同血氯。 参考值 120-130mmolL(腰池) 临床意义 脑脊液氯化物含量减少主要见于 结核性脑膜炎(102mmoLL) 化脓性脑膜炎时(102-116mmolL) 其他中枢神经系统疾病则多属正常 非中枢神经系统疾病(如大量呕吐、腹泻等造成血氯降低) 脑脊液中氯化物含量增高 主要见于慢性肾功能不全、肾炎、尿毒症、 呼吸性碱中毒等 非中枢神经系统疾病如大量呕吐、腹泻、脱水等造成血氯降低时,脑脊液中氯化物亦可减少。,4. 酶学检查 正常脑脊液中含有多种酶,其含量低于血清,绝大多数不能通过血脑屏障。在炎症
15、、肿瘤、脑血管障碍疾病时,脑组织破坏、脑细胞内酶的溢出或血脑屏障通透性增加使血清酶向脑脊液移行;或肿瘤细胞内酶释放等,均可使脑脊液中酶活性增高。 乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶(CK)、溶菌酶(LZM)、腺苷脱氨酶(ADA),(1) 乳酸脱氢酶(LDH) 有5种同工酶即LDHl-LDH5 参考值 成人3-40UL 临床意义 1)细菌性脑膜炎时LDH活性明显增高,以LDH4、5为主 2)颅脑外伤时 脑脊液中LDH活性正常; 而脑血管疾病时LDH活性多明显增高 3)脑肿瘤、脱髓鞘病进展期LDH活性增高,缓解期下降 (化脓性脑膜炎PH明显降低结合乳酸含量变化对判断病情
16、更有参考价值) (2) 天门冬氨酸氨基转移酶(AST) 参考值 5-20UL 临床意义 AST活性增高见于脑血管病变、中枢神经系统感染、脑肿瘤、 脱髓鞘病、颅脑外伤等。,(3) 肌酸激酶(CK) 脑脊液中全部是CK-BB 参考值 0.940.26UL (比色法) 临床意义 CK-BB增高 主要见于化脓性脑膜炎, 其次为结核性脑膜炎、脑血管疾病及肿瘤。 病毒性脑膜炎时正常或轻度增高。 (4) 其他 溶菌酶(LZM) 结核性脑膜炎时LZM活性多显著增高,达正常30倍 腺苷脱氨酶(ADA) 参考值 0-8U/L 结核性脑膜炎时明显增高,常用于该病的诊断和鉴别诊断。,(三) 显微镜检查 正常脑脊液中无
17、红细胞,仅有少量白细胞 参考值 成人(0-8)106L 儿童(0-15)106L 主要以淋巴细胞及单核细胞,二者比例为7:3 临床意义 脑脊液中细胞增多见于: 1.中枢神经系统感染 化脓性脑膜炎 细胞数 ,数千,以中性为主 结核性脑膜炎 细胞数,数十或数百,中性、淋巴和浆细胞并存 病毒性脑膜炎 细胞数,数十或数百,以淋巴为主 新型隐球菌性 细胞数,以淋巴为主 脑膜炎,2. 中枢神经系统肿瘤性疾病 细胞数可正常或稍高,淋巴为主 3. 脑寄生虫病 细胞数可增高,以嗜酸性粒细胞为主,需离心看能否找 到虫卵、幼虫甚至原虫。 4. 脑膜和蛛网膜下腔出血 为均匀血性,除红细胞明显增多外,白细胞 也增多,比
18、例和血液中差不多,以中性为主。,(四)细菌学检查 可直接涂片或离心后取沉淀物制成薄涂片 。 如疑为化脓性脑膜炎作革兰氏染色镜检; 如疑为结核性脑膜炎,抗酸染色镜检; 亦可用进行培养扩增和平板接种确认,并做药敏实验以指导临床用药。 脑膜炎奈瑟菌 结核杆菌,(五)免疫学的检查 (六)脑脊液蛋白电泳 (七)髓鞘碱性蛋白(MBP) 中枢神经系统有无实质性损害,特别是髓鞘脱失的诊断指标。 (八)Tau蛋白诊断阿尔茨海默病的临界值375ng/L,常见脑膜疾病的脑脊液特点,检查项目 正 常 化脓性脑膜炎 结核性脑膜炎 病毒性脑膜炎 外观 无色透明 乳白色 毛玻璃样混浊 清晰透明或微浊 凝固现象 不凝 (1-
19、2)形成凝块 (12-24)形成薄膜 不凝 蛋白测定 或弱 轻度增加 葡萄糖 2.5-4.5mmol/L 正常或稍高 氯化物 123-130 mmol/L 正常 白细胞计数 (0-8)106/L 明显增多 增多 少量 白细胞分类 淋巴和单核细胞 N L N 浆 L 细菌培养 - 发现细菌 抗酸杆菌 ,第五节 浆膜腔积液检测,浆膜腔:是人体的胸腔,腹腔,心包腔称为浆膜腔。 生理状态下,腔内有少量液体起润滑作用。(一般不易采到) 正常成人:腹腔液小于50ml,胸腔液小于20ml,心包液10-50ml 病理情况下.腔内液体增多称为浆膜腔积液。 浆膜腔积液检验目的 区分积液为漏出液还是渗出液,推断出可
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