最新流行性脑脊髓膜炎实验室诊断-PPT文档.ppt
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1、何谓流行性脑脊髓膜炎?,流行性脑脊髓膜炎(简称流脑),是由脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitides,Nm)通过呼吸道传播所引起的化脓性脑膜炎,常在冬春季节引起发病与流行,患者以儿童为多见,现在成年人发病有增多趋势。人受Nm 感染后大多数表现为鼻咽部带菌状态,只有少数成为流脑患者。,正常人群中Nm带菌率可达5 30%。,带菌者为流脑流行的重要传染源。 细菌经飞沫传播,患者潜伏期1 4天,其发展经过可分为三期: 1.首先侵入鼻咽腔,引起上呼吸道感染,有时局部有炎症。 2.少数细菌侵入血流,造成单纯 菌血症,可有突然发作的恶寒、发热、恶心、呕吐等,并可有出血性或红斑性皮疹,或称淤血
2、点。 3.大量细菌侵入,由血液或淋巴到达脑脊髓膜,引起脑脊髓膜炎的症状与体征,如头痛、呕吐、颈项强直、发热等一般脑膜炎症状。,适宜的检测样品,鼻咽拭子、血液、皮肤粘膜出血点挤出液、血清及脑脊液等。 其中脑脊液、血液、皮肤粘膜出血点挤出液中检出脑膜炎奈瑟氏菌可直接作为确诊依据。,样品采集与运送,样品采集(一),脑脊液:无菌操作,吸出CSF 35mL,立即放到无菌试管内离心(2000 3000r/min,30min),用灭菌过的毛细管吸取沉淀物直接接种到10羊血巧克力色琼脂上(CSF上清液部分供检测Nm特异抗原,亦可将其置于20待测),5二氧化碳环境37培养24 72h,每日检查细菌生长的情况,及
3、时分离纯培养物供鉴定。,样品采集(二),血液:采取病人急性期静脉血液6mL,无菌操作往盛有30mL增菌用的葡萄糖肉汤三角瓶内注入4mL血液(余下的2mL血液同上离心后吸出血清,供检测Nm特异抗原和抗体,亦可将其置于一20待测),同上述条件培养2472h,每日进行分离培养。,样品采集(三),淤血点:选病人皮肤上的新鲜淤血点或淤斑,消毒后用针头挑破,挤出组织液,用无菌棉签蘸取先接种含双抗的葡萄糖增菌肉汤管中增菌812h后分离培养或直接接种10羊血巧克力色琼脂;涂片,干后革兰染色,直接镜检。,样品采集(四),咽拭子:用长柄棉拭子采咽后壁两侧分泌物,立即接种卵黄双抗培养基或巧克力双抗平板,也可将咽拭子
4、放入液体双抗增菌管内,增菌8 12h后分离培养 。,咽拭子接种,咽拭子接种,不合格咽拭子接种,不合格咽拭子接种,样品的处理和运送,早期采集样品:应尽可能采集病人用药前的早期样品,这可以明显提高病原的检出水平。 及时处理样品:应尽可能地做到床边接种,若无可能则应在最短的时间内送到实验室进行接种培养。 保温运送:应尽可能保持样品处于2036之间,切记不能低温运送(检测抗体的血清标本除外)。,流脑病原学检查方法,生长特性,脑膜炎双球菌为专性需氧菌,初次分离时需510%的二氧化碳环境才能生长,最适生长温度为37 。,菌落特征及菌体形态,菌落:Nm接种于巧克力色琼脂平皿上,5%CO2,37 培养24小时
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