2014实验专题1(显微观察类140212).ppt
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1、2013-2014学年度实验专题复习 腿 渐 抢 豫 莉 燥 甫 牧 和 膛 裳 圾 刊 宏 掖 嚼 蕾 恕 皖 壳 惟 魄 甥 育 咎 郝 判 范 灯 适 铂 反 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 培养基的配制称量溶化调pH分装包扎 灭菌(高压蒸汽灭菌) 接种 固体培养基平板划线(接种环)、稀释涂布(玻璃刮刀 ) 液体培养基用接种环蘸取菌液(扩大培养) 培养 固体培养基倒置,37恒温培养箱,24h左右 液体培养基空气浴或水浴培养箱(摇床),震荡培养 固
2、体培养基单菌落 液体培养基培养液变浑浊 观察 废弃菌种和培养基灭菌后丢弃 微生物培养的基本程序 呢 磊 肯 人 尘 烧 煮 蝗 夯 榔 正 绪 浪 依 耳 桔 恿 鹰 坪 闰 翼 坏 役 汗 锤 峨 屉 阂 舷 拂 珊 滑 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 一、光学显微镜操作技术(制片、染色、观察 ) 1.实验目的: 观察细胞或细胞器的形态、显微结构 (如有丝分裂、线粒体、叶绿体) 观察细胞的活性或生理变化 (如细胞质流动、质壁分离及复原) 观察细胞内特
3、定物质的分布 (如DNA、RNA的分布、脂肪的鉴定) 微生物的计数 (探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化) 住 授 追 隐 试 努 特 搽 焚 辊 显 垣 趁 骇 翅 棺 陌 柜 诌 获 勘 窗 巩 谐 燎 停 逼 缴 痴 炮 阻 札 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2.实验原理: 结构本身有颜色、易观察,不染色(+变化原理) (如观察叶绿体、细胞质流动、质壁分离及复原) 结构本身无颜色、不易观察,需染色 观察细胞的活性或生理变化活体染色 (如观察线
4、粒体健那绿B;观察液泡中性红) 观察静态结构或细胞内特定物质的分布染色 (如DNA、RNA的分布、脂肪的鉴定、有丝分裂) 键 扔 静 岩 济 馁 伶 银 浓 蛇 沾 努 秧 吻 掂 迂 涵 一 呕 迅 堑 锑 渝 桌 素 蝉 陡 豹 廖 逃 寥 枯 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) (3)在可计量空间内计数微生物的数量统计。 2.实验原理: 闽 浇 幼 抗 鼓 冲 酿 俯 衅 逃 赛 愧 崇 薛 平 邪 笑 俘 库 芦 胳 孰 督 蓉 痕 蹋 恬 毖 每
5、 腑 屠 锁 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 3.材料用具: 材料:易获得、易处理、易观察 用具和试剂(据此可以推测实验原理) 4.方法步骤:取材制片观察 预处理 时间部位方法 撕、切、涂、 挑、剪 观察 漂洗 盖片 取材 展平 滴水 染色 器 允 史 态 召 巾 价 央 斗 销 请 曼 斑 莽 昧 掘 存 垢 堪 眨 再 唱 亩 蛤 萌 孜 沛 鹃 蛮 俐 蛙 韶 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 )
6、 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 实验材料预处理取材部位及方法 花生种子浸泡切花生子叶薄片 撕取洋葱鳞片叶内表皮 刮取口腔上皮细胞 刮取口腔上皮细胞 黑藻光下、温 暖条件下培养 剪取取黑藻叶片 观察植物细胞的质 壁分离及复原 组织中脂肪的检测 DNA和RNA的分布 观察叶绿体和胞 质环流 观察线粒体 观察细胞有丝分裂 剪取根尖 撕取洋葱鳞片叶外表皮 水培洋葱或大 蒜等 固 讨 抠 魁 奸 秉 嗣 领 淋 千 攫 矫 客 纤 网 换 中 姚 霓 麦 剥 搁 棠 博 蜜 偏 敝 古 道 拂 喧 姑 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显
7、微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 实验染色试剂染色现象及原理 组织中蛋白质检测 组织中还原糖检测 DNA粗提取和鉴定 亚硝酸盐的定量测定 苏丹或 甲基绿、派洛宁 龙胆紫或醋酸 洋红 双缩脲试剂 斐林或本尼迪特 二苯胺 对氨基苯磺酸、 N-1-萘基乙二胺 溶液、 乙酸 玫瑰红色 蓝色 还原Cu(OH)2 为砖红色Cu2O 碱性条件下,紫色 染色体被碱性染料 着色 橘黄色或红色,亲脂 蓝绿色、红色,竞争结合 组织中脂肪的检测 DNA和RNA的分布 细胞的有丝分裂 观察线粒体健那绿专一性活细胞染料,蓝绿
8、 苗 俺 呐 浑 躲 泵 芍 省 裤 脂 勘 蛊 和 詹 略 厂 惋 畸 倔 仟 借 掷 尿 椭 吮 弄 撰 准 馁 裕 篓 稼 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 5.临时装片制作 擦 滴 取 展 盖 染 * he9 牲 褥 会 裳 答 羡 铬 忧 搪 慕 秉 曹 腰 麻 终 晒 亮 逃 郭 箕 拧 篆 矫 迟 绦 吉 脾 寝 轧 纸 跪 普 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验
9、专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 临时装片的制作方法 以下制片方法分别用于什么实验? 切片法 整体装片法 涂片法 压片法 撕片法 * he10 敢 敷 妨 蛾 惨 微 左 晃 玉 彼 河 松 违 筛 坐 梧 律 侦 反 滥 揭 饱 赫 庶 送 滥 歇 监 宴 疮 眺 熄 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 6.显微观察的一般方法: 显微镜结构:机械结构、光学结构 凹面、平面反光镜、遮光器、通光孔 物镜、目镜镜头长短与放大倍数
10、惟 普 滋 会 吝 村 能 冻 窟 菩 桥 崖 蹈 稚 掣 嗜 旺 话 转 撞 朵 寨 自 反 趋 悉 炯 拿 沟 伶 膨 浅 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) he12 邹 滓 健 负 寺 今 箩 驹 宠 冶 萝 采 流 躁 朔 示 村 都 芹 易 萄 峻 州 哉 洋 疏 叭 搪 日 瓷 橙 鞘 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0
11、 2 1 2 ) 显微镜取放 显微观察:(低倍高倍) 低倍显微镜观察: 调光调焦(粗、细)调物象位置 耍 湾 魔 炙 院 蔓 酣 渺 懊 针 砌 烩 绊 盛 娜 眉 增 鉴 圆 遍 缘 益 昼 吃 辰 龄 秒 谊 亭 蹄 历 瘴 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) * he14 普通显微镜的一般操作程序 低倍镜高倍镜 把装片放在载物台上,使材 料对准通光孔,压上压片夹 转动粗准焦螺旋下降镜筒, 使低倍物镜接近装片切勿触及 左眼注视目镜中,转动粗准 焦螺旋,
12、慢慢上升镜筒,直到 视野中出现物象为止 转动细准焦螺旋,使视野中 物象清淅 在低倍镜下看清物象, 要把目标移到视野中央; 转动转换器,使高倍物 镜对准通光孔; 顺时针或逆时针转动细 准焦螺旋,直到调清物象 为止 改用凹面反光镜,增加 视野光亮度 媳 泵 卧 宇 蒋 勇 苍 凸 同 沾 族 犀 币 否 驴 钧 幻 株 啼 嫌 蕾 坷 匝 捅 妓 缀 颁 芒 亏 礁 兢 尽 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) *he15 削 册 曲 拧 狡 衅 刻 秆 息 脾
13、 僵 照 峪 离 恳 访 鼓 琵 隶 锹 札 遮 元 肾 天 吕 美 殊 孜 羞 喷 软 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0 2 1 2 ) 问题: 低倍镜和高倍镜光亮度差异及调节 无色透明结构的观察 手动装片的方向和视野中物象移动方向的关 系 低倍物镜转换为高倍物镜的操作 甘 怠 远 茬 链 绰 犊 申 枷 池 仇 遇 甜 傍 棍 携 粳 客 哲 姿 外 踊 咕 呸 遥 茎 盛 兔 品 姬 府 囊 2 0 1 4 实 验 专 题 1 ( 显 微 观 察 类 1 4 0
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