茶叶中咖啡因的HPL没C分析.doc
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1、 茶叶中咖啡因的高效液相色谱分析一、实验目的:1 了解反相色谱的原理和应用2 掌握标准曲线定量法二、实验原理:咖啡因又称咖啡碱,属黄嘌呤衍生物,化学名称1,3,7-三甲基黄嘌呤,可由茶叶或咖啡中提取而得的一种生物碱。它能兴奋大脑皮层,使人精神兴奋。咖啡中含咖啡因1.2%1.8,茶叶约含2.0%4.7。其分子式为C8H10O2N4,结构式:样品在碱性条件下,用氯仿定量提取,采用反相液相色谱柱进行分离,以紫外检测器进行检测,以咖啡因标准系列溶液的色谱峰面积对其浓度作工作曲线,再根据样品中的咖啡因面积,由工作曲线算出浓度。三、 实验仪器与药品仪器Waters2695型高效液相色谱仪 操作软件 色谱柱
2、(EconosphereC18) 自动进样器药品 甲醇(色谱纯) 双蒸水 氯仿(A.R) 1mol/LNaOH; NaCl(A.R.) Na2SO4(A.R.) 咖啡因(A.R.) 茶叶1000mg/L咖啡因储备液 将咖啡因在110下烘干1小时,准确称取0.1000g咖啡因,用氯仿溶解,转移至100mL容量瓶中,定容至刻度。四、实验步骤: 色谱条件:柱温:室温流动相:甲醇水60:40流量:1.0mL/min检测波长:275nm 咖啡因标准系列溶液配制:分别用吸量管吸取0.40、0.60、0.80、1.00、1.20、1.40mL咖啡因储备液于六只容量瓶中,用氯仿定容至刻度,浓度分别为40、60
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