肠道病原菌的分离与鉴定一.ppt
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1、肠道病原菌的分离与鉴定一,培养基的制备及常用培养基 细菌的培养法 EMB培养基的制备 肠道病原菌的分离与鉴定(一) 血清学检测-肥达氏反应,培养基的制备,(一)肉汤培养基 材料:鲜牛肉、蛋白胨、氯化钠、pH试纸、10碳酸氢钠、试管、三角烧瓶、蒸馏水等。 方法 1将新鲜牛肉500g切碎或搅碎,加水1000ml,放4冰箱或冷处浸泡过夜,然后煮沸30min,放凉,使残余的脂肪凝固,再用绒布或滤纸过滤,将滤液补足为原量。 21000ml肉水中加入蛋白胨10g、氯化钠5g,加热溶解。 3用精密pH试纸测酸碱度,用10碳酸氢钠校正pH为7.2左右。过碱时,可用10醋酸校正之。 4分装于试管中或三角烧瓶中,
2、15磅(121)高压蒸气灭菌2030min。,高压蒸汽灭菌器,(二)普通琼脂培养基 材料:肉水、蛋白胨、氯化钠、琼脂、无菌平皿、灭菌试管、三角烧瓶等。 方法 1按上记数量把肉水、蛋白胨、氯化钠和琼脂放到三角烧瓶中,加热溶化。 2用pH试纸测酸碱度,用10碳酸氢钠校正pH为7.2左右。 315磅高压蒸气灭菌2030min。 4趁热将溶化的培养基倒入灭菌平皿内,每个平皿倒入约15ml,凝固后即成普通琼脂平板培养基;如趁热将培养基倒入灭菌试管内,再将试管斜放试验台上,凝固后即成普通琼脂斜面培养基。,(三)血液琼脂培养基 有些细菌其营养要求较高,在普通琼脂培养基上生长不良,可用血液琼脂培养基进行培养。
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