实验一纸层析法分离鉴定氨基酸.ppt
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1、18,1,实验一 纸层析法分离鉴定氨基酸,通过实验,掌握纸层析的基本操作技能。 加深对分配层析原理的理解。,【一、实验目的】,18,2,【二、实验原理】 层析技术 是利用混合物中各组分的物理化学性质的差别,使各组分以不同程度分布在两相中,其中一相为固定相,另一相流过此相称作流动相,并使各组分以不同速度移动,从而达到分离的目的。 可分离物质 糖类、有机酸、氨基酸、核苷等,18,3,固定相 在层析中起分离作用而不随层析过程移动的物质。如纸层析中固定相是滤纸纤维中结合的水。固定相被看成是样品移动的阻力。 流动相 在层析过程因其本身流动而推动样品移动的物质。,18,4,层析的分类,18,5,分配层析:
2、是利用不同物质在两种不相溶的溶剂中的分配系数不同而达到分离的一种技术。,分配系数 =,溶质在固定相的溶解度,溶质在流动相的溶解度,18,6,纸层析是以滤纸作为惰性支持物的分配层析:纸纤维上的 OH 基具有亲水性,所以能吸附一层水作为固定相,而通常把有机溶剂作为流动相。流动相流经支持物时与固定相间连续抽提,使物质在两相间不断地分配而得到分离。,18,7,溶质在滤纸上的移动速率用f(比移)值来表示: 展层层斑点中心与原点间的距离 Rf = - 溶剂前沿与原点之间的距离,18,8,18,9,影响Rf值的因素(多种) 物质结构与极性 物质的极性大小决定了物质在水 和有机溶剂之间的分配情况。,pH值 展
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- 实验 层析 分离 鉴定 氨基酸
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