微生物学实验二.ppt
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1、细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 基础医学院微生物学教研室 王沛珍 Tel:0373-3029130 E-mail: 实验二 细菌形态学检查 消毒灭菌 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 一、细菌形态学检查 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 一、不染色标本检查(活体) 悬滴法 压滴法 二、染色标本检查 单染法:简单染色,一种染料(美蓝染色) 复染法:鉴别染色法,两种以上染料(革兰 染色、抗酸染色) 形
2、态学检查分类 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 1884年由丹麦细菌学家Gram创立。 革兰染色是最常用的一种染色方法,将 细菌初步分为革兰阳性菌和革兰阴性菌, 在临床上具有非常重要的意义。 革兰染色(Gram stain) 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 一、目的 1.掌握革兰染色及细菌涂片的制备方法。 2.熟悉革兰染色的原理和临床意义。 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 二、原理 细菌形态学检
3、查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 通透性学说 G+菌细胞壁结构致密,肽聚糖层厚且交联 度高,脂质含量少,乙醇不易渗入。 G-菌细胞壁结构疏松,肽聚糖层薄且交联 度低,含大量脂质,乙醇易渗入。 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 1.菌种:白色葡萄球菌 大肠杆菌 2.试剂: 革兰染色液 初染液 结晶紫 媒染液 卢戈氏碘液 脱色液 95%乙醇 复染液 稀释石碳酸复红 3.其它:接种环、载玻片、染色盘、酒精灯等 三、器材和试剂 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程
4、 Medical microbiology 冲洗 3.油镜观察实验结果 四、方法与步骤 1.细菌涂片的制备 涂片 干燥 固定 2.染色 初染(结晶紫) 媒染(卢戈氏碘液) 脱色 (95%乙醇) 复染(稀释石碳酸复红) 吸水纸吸干 1min 1min 30s 30s 冲洗 冲洗 冲洗 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 五、结果 一 一 半 半 结晶紫 卢戈氏碘液 95%乙醇 石碳酸复红 初染 媒染 脱色 复染 G+菌 G-菌 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 图一
5、图二 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 无菌操作(接种环灭菌和取菌)。 涂片的厚度要适中。 染色的时间控制,一一半半。 冲洗的方法,不要对着涂片区冲洗。 六、注意事项 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiology 七、意义 1.鉴别细菌 2.研究与致病性 的关系 3.指导临床用药 G+菌 G-菌 G+菌:外毒素 G-菌: 内毒素 G+菌:青霉素、头孢菌素等 G-菌:链霉素、庆大霉素等 细菌形态学检查、消毒灭菌 新乡医学院成人高等教育网络课程 Medical microbiol
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