上海道培医院张艳解析:急性白血病的诊断分型和预后.ppt
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1、急性白血病的诊断、分型和预后,上海道培医院 张艳 2014.03.22,白血病的概念,白血病是造血干/祖细胞发生恶变,白血病的概念,分化障碍 增殖失控 原始和幼稚细胞增生累积 凋亡受阻 浸润其它器官和组织 原始和幼稚细胞 (白血病细胞),白血病的概念,临床表现: 正常造血受到抑制:乏力、面色苍白、发热、出血 浸润:肝脾淋巴结肿大、皮肤、中枢神经系统等浸润,急性白血病分型,FAB分型: 细胞形态学及细胞化学染色 AML: M0、M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7 ALL: L1、L2、L3 WHO分型: 2008年修订 MICM,MICM整合诊断,M: 形态学、细胞化学、病理 I: 免疫学
2、,包括免疫组化、流式细胞分析 C: 染色体、荧光标记探针的原位杂交(FISH) M: 分子生物学:白血病融合基因、基因突变、克隆性基因重排、正常基因表达水平过高,MICM整合诊断对恶性血液病进行诊断和分型重复性更好、更客观 并且能更好地帮助判断预后 指导制定治疗方案及策略,监测疗效,细胞形态及细胞化学分析的优缺点,优点: 直观:镜下直接观察细胞形态,对MDS的诊断、一些少见的、大的恶性细胞的确定优于流式细胞分析 恶性细胞的比例更准确: 简单快速,有显微镜即可完成报告 缺点: 人为因素影响大 难以鉴别细胞的成熟阶段,B、T等系列的恶性细胞 细胞较成熟时,难以鉴别良恶性 不能提供太多的预后信息,形
3、态M,病理及免疫组织化学的优缺点,标本直接固定,不容易损失信息,恶性细胞比例更客观,对一些抽不出或少见细胞,仍可诊断。如伴骨髓纤维化、MM、淋巴瘤、转移癌、组织细胞、巨噬细胞、树突细胞、何杰金细胞等 可以直接观察到组织结构,容易确定恶性细胞的组织部位 诊断慢、受诊断者个人经验及知识水平影响大 对一些组织结构无破坏、细胞形态改变不大的细胞,难以鉴定良恶性及成熟度 有些恶性细胞在液体中,难以获取组织标本,难以判断组织结构,形态M,FCM的工作原理,摘自 Flow Cytometry: First Principle,流式I,FCM检测的参数,FSC: 细胞大小 SSC:细胞内颗粒多少及细胞内构造的
4、复杂性 FL:3-10多种(荧光素耦联的单克隆抗体),流式I,正常BM细胞的图形(CD45/SSC),流式I,R8:幼稚细胞群,正常骨髓中此群细胞数量极低或空缺,流式I,流式细胞术判断急性白血病:,20%或者25%以上细胞表达早期标志(CD34、HLA-DR、 TdT)或者不表达成熟标志 系别标志: 髓系 B系 T系,白血病细胞的系列特异性标志,如有2 系或以上的特异性标志,可诊断为急性混合性白血病,流式I,AML(病例1),流式I,ALL (病例2),流式I,FCM 的优缺点,优点: 一次可检测数万至数十万个细胞上的数十种标记,可同时检测每个细胞的六个以上参数,敏感性高,分析全面 更容易区分
5、良恶性,恶性细胞的系列及成熟度 可帮助确定免疫治疗的靶点并监测疗效,如CD20、CD19是监测MRD覆盖面最广的方法。 快速、简便、重复性好 缺点: 不能确定组织结构,一些罕见的大细胞不能分析到,一些细胞粘附性高,难以抽出。因此对HL等难以确诊。 判断恶性细胞的比例不如形态准确,对M6、MDS的诊断不如形态 预后价值不如染色体和基因,流式I,诊断误区举例,原始细胞增多是诊断前体恶性血液病尤其AL的重要指标,但原始细胞应根据免疫学标志/基因/染色体证实为恶性造血前体细胞 一些形态上的原始细胞可以是正常造血细胞(尤其见于儿童感染后,G-CSF,GM-CSF等刺激或化疗后或移植后),病例3 儿童B-
6、ALL,化疗3年后停药,来我院复查,骨髓涂片8%的幼稚细胞,流式幼稚B淋巴细胞增生,未见异常表型,病例4 NK细胞白血病移植后40天,骨髓涂片8%的幼稚细胞,流式: 未见表型异常细胞,CD34阳性细胞为幼稚B淋巴细胞,中期分裂相的染色体分析,细胞遗传学C,AML:50%90%的患者细胞遗传学可检出异常克隆 ALL:大约60%85%的患者可检出克隆性染色体畸变,细胞遗传学C,一些染色体有诊断价值: 如重现性染色体异常,如t(8;21),inv(16)、t(16;16)、 t(15;17)(q22;q12),t(5;14)(q31;q32) ,t(3;3),t(4;11)可直接诊断急性白血病; 一
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