实验六、微生物细胞的大小测量和显微计数目....ppt
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1、实验六 微生物细胞的大小测量和显微计数,主 讲:徐尔尼 生命科学学院生物技术系,一、目的与要求 学习测微尺测定微生物细胞大小,以及血球计数板计算微生物细胞数目的原理。 掌握使用测微尺和血球计数板对微生物细胞进行大小测量和细胞计数的方法。 增强微生物细胞大小的感性认识。,二、基本原理 1、微生物细胞大小的测量 微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征,也是分类鉴定的依据之一。微生物大小的测定,需要在显微镜下,借助特殊测量工具测微尺(包括镜台测微尺和目镜测微尺)。 测微尺原理:镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般是将1mm等分为100格,每格长0.01mm(即10m)。镜台测微尺并不直接
2、用来测量细胞的大小,而是用于校正目镜测微尺每格的相对长度,然后再用目镜测微尺测量微生物细胞的大小。,二、基本原理 2、显微直接计数 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。 血细胞计数板原理:计数板是一块特制的载玻片,其上由四条槽构成三个平台,中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各该有一个方格网,每个方格多共分为九个大方格,中间的大方格即为计数室。,二、基本原理 每个计数室(大方格)边长为1mm,则每个大方格的面积为1mm2,盖上盖玻片后,盖玻片与载玻片之间的高度为0.1mm
3、,所以计数室的容积为0.1mm3(即万分之一毫升)。 每个计数室有25或16个中方格。计数时,通常数五个中方格的总菌数,然后求得每个中方格的平均值,再乘以25或16,就得出一个大方格的总菌数,然后换算成1ml菌液中的总菌数。,三、实验器材 1、菌种:酿酒酵母菌液、细菌三形片 2、试剂:无水乙醇、香柏油、二甲苯 3、仪器或其他用具:目镜测尺、镜台测微尺、血球计数板、盖玻片、无菌吸管、酒精灯、显微镜、擦镜纸、滤纸等,四、操作步骤 1、微生物细胞大小测量 1)目镜测微尺的校正: 将目镜测微尺装入目镜载物台上放镜台测微尺调节粗调和细节调至直看到镜台测微尺的刻度 转动目镜,推动镜台测微尺,使两尺在某一区
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