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1、实验室安全管理,内容提要,第一部分:一般生物安全防护实验室的基本要求 第二部分:实验室用电安全 第三部分:实验室化学性危害 第四部分:实验室防火与防爆 第五部分:实验室相关物品的消毒制度 第六部分:实验室医疗废弃物处理制度,第一部分 一般生物安全防护实验室的基本要求,概况: 国家对病原微生物按照其对人类和动物以及环境的危害程度实行分类管理,对实验室根据其对病原微生物的防护水平实行分级管理。 国家实行统一的实验室生物安全标准。,1、生物因子危害程度分级 2、实验室的生物污染 微生物的气溶胶吸入、食入危险、使用注射器和针头时刺伤皮肤、离心管碎裂、打碎带有培养物的平皿、处理动物时咬伤、抓伤、处理血液
2、及其他有潜在病理学危害的材料、实验室运送病源微生物的标本的容器泄露、化学品、火、电火辐射的危害,国家根据实验室防护水平,将实验室分为一级、二级、三级、四级。临床诊断、检测检验工作可以在二级实验室中进行。但是,发现高致病性病原微生物的其病原学的分离鉴定工作应当转移到三级以上的实验室中进行。,实验室生物安全通用要求 病原微生物实验室安全管理条例 医疗机构临床实验室管理办法 实验室生物安全防护分级 一级生物安全防护实验室,简称BSL1或P1 二级生物安全防护实验室,简称BSL2或P2 三级生物安全防护实验室,简称BSL3或P3 四级生物安全防护实验室,简称BSL4或P4,(一)一级生物安全防护实验室
3、的基本要求,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物,如用于教学的普通微生物实验室等。 1.安全设备和个体防护 (1)一般无需生物安全柜等安全设备。 (2)工作人员应穿戴工作服,有外溅危险应戴防护镜。 (3)工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套,接触病人标本或其他传染性物质时要戴手套。,2.实验室设计和建造的特殊要求 (1)实验室应设洗手池,宜设置在靠近出口处。 (2)实验室临近操作台的墙表面应易于清洁。 (3)地面应防滑,无缝隙,不得铺设地毯。 (4)试验台表面应不透水,耐腐蚀,耐热。 (5)实验室中的家具应牢固。 (6)应用专门放置废弃物的容器。
4、(7)实验室如有可开启的窗户,应设置纱窗。,(二)二级生物安全防护实验室,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。 1.安全设备和个体防护 (1)工作人员进入实验室必须穿防护服。离开实验室时,要脱下并留在实验室内。用过的工作服要统一消毒。处理标本要戴手套,不得戴手套离开实验室。工作结束方可出去手套,传染性强的标本要戴双层手套。,(2)处理可能产生致病微生物气溶胶等呼吸道标本以及进行可能发生溅出的操作过程时要在生物安全柜内进行。如上述操作无法在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时,必须使用面部保护装置(戴护目镜、面罩和口罩)。处理中毒呼吸道传染病病人标本
5、时要穿隔离服、戴帽子、口罩、手套等。,(3)实验室内各设置按医院消毒技术规范和消毒管理方法进行定期消毒。所有废弃物按医疗废弃物管理条例进行处理。 (4)检验员结束操作后应及时正确的洗手,用干净毛巾或纸巾擦干。 (5)保持室内清洁卫生,每天通风换气,进行实验时应避免污染,应及时进行消毒,遇有场地、工作服或体表污染时,立即处理,防止扩散,并视污染情况向上报告。 (6)实验室内禁止吃东西、化妆。,2:实验室设计和建造的特殊要求,(1)生物安全防护二级实验室必须满足上述设备和防护要求。 (2)应设置消毒设施,如高压灭菌锅、化学消毒装置等对废弃物进行处理。 (3)应设置洗眼装置。 (4)实验室门宜带锁、
6、可自动关闭。 (5)实验室出口应有发光指示标志。 (6)实验室宜有不少于每小时34次的通风换气次数。,三级生物安全防护实验室,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有预防传染的疫苗。 艾滋病毒的研究(血清学实验室除外)应在三级生物安全防护实验室中进行。,四级生物安全防护实验室,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性,通过气溶胶途径传播或传播途径不明,目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。,(二)、生物安全设备分类 1.超净台 2.抽风橱 3. CLASS I 一级生物安全
7、柜 4.CLASS II 二级生物安全柜 5. CALSS III三级生物安全柜(又称手套柜),(一)、为何需使用生物安全柜?,考虑对操作人员,操作样品,操作环境的保护。 美国国家卫生研究院NIH标准与美国国家疾病控制中心CDC实验室生物安全级别标准中要求: 应用于临床、诊断、教学、研究、或者生产设施,开展有关内源性和外源性病源的工作,若因暴露而吸入该病源, 会引发严重的、可能致死的疾病。 需使用ClassII级生物安全柜 实验人员受过专业训练 应有管道化的排气系统,排出的空气不再循环至建筑物内的任何其他区域。 建议生物安全柜每年经过测试和确证,CLASS I一级生物安全柜,负压柜 气流经操作
8、人员向内进入工作台面,被污染的气流通过HEPA过滤器外排出柜外,没有循环气流。 CLASS I级BSC保护操作人员和环境不受污染,适用于生物安全水平中对实验样品无保护要求的实验。,CLASS II 二级生物安全柜,层流负压柜 它们可以安全的保护样品、人员和环境。 II 级生物安全柜分为A型(30%排在室内 )和 B型; B型中又分为B1 (70%接管道外排) 、 B2 (100%接管道外排) 、 B3 (30% 接管道外排) 。,3:二级生物安全柜要求 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化,工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流动空气。工作时正面玻璃推拉窗打开一半,上部为观察窗,下部为
9、操作窗口。外部空气由操作窗口吸进,而不可能由操作窗口逸出。工作状态下遵守操作规程时保证工作人员不受侵害。,CLASS III生物安全柜 (手套柜),全封闭的、气密结构的通风柜; 通过橡胶手套进行操作; 柜内保持至少120Pa的负压; 供气通过HEPA抽入内; 外排的气流经过双层HEPA过滤或经 HEPA后再经燃烧处理。 CLASS III 型BSC适用于BSL3、BSL4的生物实验。,第二部分 实验室用电安全,电器设备广泛应用于实验室,应注意以下方面: 1.电器设备应安装地线,某些仪器还应另装稳压器。 2.安装或检修电动仪器时应切断电源,并用试电笔检查电源是否确已切断。 3.不准自行延长电线,
10、亦不得使用超长电线的插头。非电工不得随意拆修电路或安装开关盒插座等。 4.有110V或其他电压电源的插头、插座或插板均应有特殊标志。 。,5.有电源开关,应安放在安全而且固定的地方。 6.有恒温设备要有温度控制装置。储血冰箱应有报警器;并有应急电源,以防停电。烤箱、电炉不应与冰箱共存一处;烤箱、电炉旁不得存放易燃物。 7.使用新的电器设备以前必须详细阅读使用说明书;日常操作应注意的事项必须另立操作卡,严禁违章操作。 8.某些仪器使用后或下班前要切断电源;突然停电时,立即切断电源开关,以防再送电时发生事故。 9.定期(至少半年)检查一次电插座是否符合安全用电要求,第三部分 实验室化学性危害,实验
11、室的化学试剂具有一定的危险性,轻者可以损伤皮肤和粘膜,重者可以引起火灾,某些化学致癌物质有致癌危险,剧毒试剂极微量可以致死。因此应该引起高度警惕。 1.实验室内应有通风设备和灭火器。 2.尽量避免使用化学致癌物如联苯胺,二甲基偶氮苯。万一使用应严防直接接触。 3.剧毒试剂如氰化汞,升汞,亚砷酸钾等不易大量保存于实验室;少量应存于保险柜里,双人双锁,需用时应有人监督称量,使用并记录。领取和使用危险试剂亦应有安全记录清单。,4.腐蚀和易燃试剂,室内只能存放每天用量。不得将易燃试剂存放于冰箱,亦不得靠近烤炉,电炉。 5.装有液体腐蚀试剂的容器应放于铺砂的搪瓷盘内,以防万一破损而外溢。 6.产生有毒或
12、特臭气味的试验应在通风柜内进行。,7.化学试剂伤害的紧急处理(必要时紧急处理后立即到急诊室治疗) (1)皮肤和眼睛灼伤:立即用大量清水冲洗。如为酚类化学试剂(如石碳酸)灼伤,则可用0.5%乙醇洗涤。 (2)口服中毒:立即用3%5%小苏打水或1:5000高锰酸钾液多次洗胃。 (3)吸入刺激性气体 :立即脱离现场,呼吸新鲜空气,并采取抢救措施。,第四部分 实验室防火与防爆,火灾与爆炸通常联系在一起,发生火灾与爆炸都将对实验室甚至更大范围带来财产不可弥补的损失。 (一)气罐安全 1.保证气罐安全运输,运输时应将其固定于运输工具上。 2.不论气罐的大小及内容物品种,均应安全放置,有固定装置,如将其系于
13、墙上,工作台旁或安放于金属架或木架上。 3.罐上应贴好标签,注明内容物品种,购进日期及量。,4.所有罐子(不论满的或空的),除正在使用或与其他仪器连接在一起的之外,都应盖好盖子。若与其他仪器相连接,在未接通前,不得开启塞子,以防向空间放气。 5.易燃气罐应储存于干燥,防火和良好通风处;气罐应远离火源和电源,并严禁火种接近;气罐附近应有灭火器;气罐应无锈,特别注意气罐底部是否生锈。 6.定期检查高压蒸气锅管道是否通畅,安全阀和压力表是否有效。,(二)防止化学试剂引起爆炸和火灾 1.下列常用化学试剂可发生爆炸,应严加防范。 (1)醚爆炸 醚与空气混合极易爆炸,故开启乙醚试剂时瓶口不能对着任何人,并
14、远离火种;乙醚不能直接加热,应用水浴,不能存放于冰箱。 (2)高锰酸钾 高锰酸钾与浓酸一起烘干时,易爆炸。 (3)硝酸铵 (4)硝酸钾与醋酸钠,硝酸盐与酯类混合也能引起爆炸,应加以防范。,2.下列常用化学试剂可引起火灾 (1)易燃试剂如乙醚,二甲苯和乙醇等试剂使用时要特别小心,严守操作规程。 (2)下列物质混合时特别容易着火应注意,如活性碳与硝酸铵,沾染了强氧化剂的衣服,布与浓硫酸;可燃性物质与浓硝酸,氧化物之间混合等。 (三)灭火措施 1.电器起火应先切断电源,在未确定已切断电源的情况下,禁止使用水或泡沫灭火器救火。,2.实验室应常备有效期内的灭火器 (1)干粉灭火器 适用于补救油类,可燃性
15、气体,电器设备和遇水燃烧等物品的初起火灾。 (2)二氧化碳灭火器 对扑救电器,电子设备,图书,小范围油类,某些忌水物质等发生的火灾最为适宜。不宜补救钠,钾,镁粉,铝粉和铅锰合金等物质的火灾。 3.实验室工作人员应接受火灾防范培训。,第五部分 实验室相关物品的消毒制度,(一)污染区的消毒 1.表面消毒 (1)桌椅等表面的消毒 工作前用湿布抹擦一次;地面拖擦一次,用后洗净晾干。下班用250500mg/L有效氯溶液或0.2%0.5%过氧乙酸抹擦一次。地面用两倍上述浓度的消毒液拖擦。 (2)各种表面也可使用便携式高强度紫外线消毒器近距离表面照射消毒。 (3)若被明显污染,应立即用消毒液消毒,用1000
16、2000mg/L有效氯溶液或0.2%0.5%过氧乙酸洒于污染物表面,保持3060min再擦。,4)若已知被肝炎或结核杆菌污染,应用2000mg/L有效氯溶液或0.5%过氧乙酸溶液擦拭,消毒30min。 (5)检验单送出前用便携式高强度紫外线消毒柜距检验单不高于3.0cm缓慢移动,照射35秒钟,必须两面照射;也可用甲醛消毒器熏蒸消毒。,2,。空气消毒 (1)开窗通风,也可通过换气扇保持室内外气体交换。每天打开紫外灯照射消毒一次,每次一小时。有效消毒范围距灯管1.0米。 (2)明显产生传染性气溶胶的操作(搅拌,研磨,离心等),特别是经过呼吸道传播又含有高度传染性的微生物的操作,应在生物安全柜内进行
17、。,3.器材消毒 (1)金属器材 1)小的金属器材如接种环,可用酒精灯烧灼灭菌。 2)较大的金属器材或有锋刃的刀剪受污染后,可煮沸1030min,或用2%碱性/中性戊二醛溶液或8%甲醛-乙醇溶液浸泡三小时后,清洗,沥干,再用干热或压力蒸汽灭菌。,(2)玻璃器材 1)采标本的器材要做到一人一份,一用一消毒。凡曾受污染的器材应立即没入洗涤剂或肥皂液中,在煮沸1530min,反复洗涤,沥干,3760摄氏度烘干。 2)曾装过含蛋白质较多的液体如血清,唾液,胃液等的玻璃容器,用含有效氯1000mg/L的消毒液浸泡30min。 3)接种培养过的琼脂平板应压力蒸汽灭菌30min,趁热将琼脂倒弃,在刷洗。 4
18、)刷洗后用于生化检验或免疫学检验者,可浸泡于重铬酸钾-浓硫酸清洁液内24小时后,彻底冲洗,最后用蒸馏水冲洗三遍,沥干,烘干后再用。,(3)塑料制品,1)一次性使用的塑料制品用后放污染袋内集中销毁。 2)耐热的塑料如聚丙烯,聚碳酸酯,尼龙及聚四氯乙烯制的器材,可用肥皂或洗涤剂溶液煮沸1530min,洗净后,用压力蒸汽121 102.9kPa灭菌2030min后方可重复使用。 3)不耐热的聚乙烯,聚丙乙烯,可用0.5%过氧乙酸或1000mg/L有效氯溶液浸泡3060min,再洗干净,晾干;若为薄膜或板也可用高强度紫外线灯消毒器照射13秒。 4)一般血清学反应使用过的塑料板可直接浸入1%盐酸溶液内2
19、h以上过夜;对肝炎检验的反应板可用0.5%过氧乙酸或1%过氧戊二酸溶液或3000mg/L有效氯溶液浸泡24h后,洗净再用。,(4)橡胶制品 橡胶制品如手套,吸液球(管)受污染后可用肥皂或0.5%洗涤剂溶液煮沸1530min,煮时吸液球(管)内应无空气,全部浸入其内,清洗后晾干。 (5)纺织品 棉质工作服,帽子,口罩,鞋套等放专用污染袋内,送洗衣房清洗。每周两次。有明显污染的,500g/L含氯消毒剂作用3060min或高压蒸汽121,15 30min,(6)贵重仪器,1)贵重仪器如显微镜,离心机,天平,细胞计数器,血液生化分析仪,气相色谱仪,冰箱,培养箱等局部轻度污染,可用2%碱性或中性戊二醛溶
20、液或5000mg/L洗必泰酒精溶液擦拭;污染严重时,可用环氧乙烷消毒。 2)若离心时离心管未封闭,试管破裂,液体外漏,应消毒离心机内部,特别是有可能受肝炎病毒或结核杆菌污染时,宜用2%碱性或中性戊二醛溶液擦洗;或整机用环氧乙烷消毒。在5560 ,相对湿度60%80%,800mg/L环氧乙烷密闭消毒柜内消毒6h。,4.手的消毒 工作前,工作后,或检验同类标本后在检验另一类标本前,均应用肥皂水洗手12min,要遵循六步洗手法原则。若意外被针刺伤应先消毒在用清水清洗。若标本溅入眼中或粘膜上应立即用滴眼液或漱口液清洗。 5.废弃标本及容器的消毒处理 (1)采集标本应佩戴手套,一次性使用的手套用后应放收
21、集袋内,集中烧毁;可反复使用者用后放消毒液内集中消毒。,(2)夹取标本的工具用后均应消毒清洁。金属工具可烧灼灭菌或消毒液浸泡;玻璃制品可干热或压力蒸汽灭菌。 (3)废弃标本如尿液,胸腹水等每100ml加漂白粉5g或二氯异氰尿酸钠2g,搅匀后作用24小时倒入厕所或化粪池;痰,脓,血,粪及其他固体标本高压消毒后焚烧或加两倍量2500050000mg/L有效氯的漂白粉溶液或二氯异氰尿酸钠溶液,搅拌后作用24h。 (4)一次性的纸容器及其外面包被的废纸,应焚毁;对可在利用的玻璃,塑料或搪瓷容器。可煮沸15min,也可用1000mg/L有效氯漂白粉澄清液或二氯异氰尿酸钠溶液浸泡26h消毒液每日更换,用流
22、水冲洗沥干。用于微生物培养采集容器,用压力蒸汽灭菌后备用。,(5)废弃标本及其容器应有专门密闭不漏水的污物袋存放,专人集中高压消毒后烧毁,每天至少处理一次。 (二)清洁区的消毒 清洁区应每天开窗通风换气一次,湿布擦拭桌椅地面一次,每周用消毒液250 500mg/L有效氯溶液或1000mg/L过氧乙酸擦拭门窗桌椅地面 。各区的清洁器材不得混用。 (三)半污染区的消毒 同清洁区,地面消毒同污染区。,第六部分 实验室医疗废弃物处理制度,废弃物处理 国务院医疗废物管理条例 卫生部令医疗卫生机构医疗废物管理办法 卫生部文件 医疗废物分类目录,什么是医疗废物? 医疗废物医疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其
23、他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。 医疗废物分类 感染性废物 病理性废物 损伤性废物 药物性废物 化学性废物,(一)感染性废物 指携带病原微生物,具有引发感染性疾病传播危险的医疗废物。包括: 1.被病人体液,血液,排泄物污染的物品。 2.医疗机构收治的隔离传染病病人或者疑似传染病病人产生的生活垃圾。 3.病原体的培养基,标本的菌种,毒种保存液. 4.各种废弃的医学标本. 5.废弃的血液,血清. 6.使用后的一次性使用医疗用品及一次性医疗器械视为感染性废物.,(二)病理性废物 指诊疗过程中产生的人体废弃物和医学实验动物尸体等。包括: 1.手术及其他诊疗过程中产生
24、的废弃的人体组织,器官等。 2.医学实验动物的组织、尸体。 3.病理切片后废弃的人体组织,病理腊块等。,(三)损伤性废物 指能够刺伤或割伤人体的废弃的医用锐器。包括: 1.医用针头,缝合针。 2.各类医用锐器,包括:解剖刀,手术刀,备皮刀,手术锯等。 3.载玻片,玻璃试管等。,(四)药物性废物 过期,淘汰,变质或者被污染的废弃的药品。包括: 1.废弃的一般性药品,如:抗生素,非处方类药品等。 2.废弃的细胞毒性药物和遗传毒性药物。 3.废弃的疫苗,血液制品等。,(五)化学性废物 具有毒性,腐蚀性,易燃易爆性的废弃的化学物品。包括: 1.医学影像室,实验室废弃的化学试剂。 2.废弃的过氧乙酸,戊
25、二醛等化学消毒剂。 3.废弃的汞血压计,汞温度计。,(6)实验室废弃物的处理 实验室的医疗废物主要是以感染性的废物为主,同时还有病理性,损伤性和化学性废物。实验室所有医疗废物经消毒后由医院统一交给医疗废物集中处置单位进行。对医疗废物要进行登记,登记内容应当包括:医疗废物的来源,种类,重量或者数量,交接时间,处置方式,最终去向以及经办人签名等项目。登记资料至少保存三年。严禁医疗废物流失。,要点: 医疗废物集中处置 包装物要防渗漏、防锐器穿透,明显标识和警示说明 医疗废物储存设备定期消毒 医疗废物制病原体的培养基、标本和菌种、毒种保存液等高危险废物,在交医疗废物集中处置前应就地消毒,检验科医疗废物
26、的安全处置制度,为了贯彻国务院医疗废物管理条例,严防因医疗废物处理不当造成二次污染,保证医疗安全。经研究,特制定医疗废物安全处置规定,要科室人员学习贯彻并严格执行。 医疗废物的处理原则: 选择最优方法进行无害化处理,严禁医疗废物等混入生活垃圾。 处理中严防扩散,造成二次污染。 专人负责、责任明确,日收日处理,防止积压。 感染性废物、病理性废物烧毁处理。 一次性医疗用品按规定消毒毁行后无害化处理。,医疗废物的收集、运送和处理: 各科室不同类别的废物应分类收集,感染性废物应放入不透水的黄色垃圾袋收集。血液、体液污染、病理性废物应放入红色不透水垃圾袋收集。生活垃圾放入黑色垃圾袋收集。严格分类入袋,不
27、同污物袋严禁混装。污物袋不可过满以免溢出污染环境。如污染物易穿透或袋子外侧被污染,则应使用双层袋。,尖锐物品如针头、一次性采血针等应放入坚固、耐刺、不透水的容器内,以防工作人员刺伤。 各科室污物每日分类由清洁工与院感人员交接送并登记记录双签字。 化学性、药物性废物在安全地方深埋。 禁止在非贮存地点倾倒、堆放医疗废物或者医疗废物混入生活垃圾。 医疗垃圾处理人员工作时,穿工作服、戴手套,必要时戴防护眼镜,做好个人防护。,检验科医疗废物安全处置程序,1、使用后的一次性采血针、注射器针头、放入锐器盒中院感科工人回收交接人签字,登记记录焚烧处置,做好登记记录。 2、使用后的一次性采血用具、一次性注射器和病人使用后的棉球、纱布、棉签等医疗废物、检验后的标本放入黄色医疗垃圾袋医疗垃圾回收工人回收交接人签字,登记记录焚烧处置,做好登记记录。,3、微生物室的有菌标本及培养物在出细菌室之前一定要高压灭菌,并作好记录。然后放入黄色医疗垃圾袋医疗垃圾回收工人回收交接人签字,登记记录焚烧处置,做好登记记录。,谢谢!,
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