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1、血吸虫病免疫诊断技术 -现场应用技术规范,一、目前常用的血吸虫病免疫诊断类型与方法,1) 凝集反应,直接凝集试验,间接凝集试验,正向间接凝集试验-间接红细胞凝集试验(IHA),反向间接凝集试验,间接凝集抑制试验,2) 沉淀反应,环卵沉淀试验(COPT),3) 免疫电泳技术,经典的免疫电泳技术,对流免疫电泳,酶标记抗原对流免疫电泳,双向酶标对流免疫电泳,免疫印迹技术,4) 免疫标记技术,酶免疫测定-酶联免疫吸咐试验(ELISA),免疫荧光法,放射免疫测定法,免疫胶体金技术-斑点金免疫渗滤试验(DIGFA渗滤法),免疫胶体染料试验-胶体染料试纸条试验(DDIA层析法),化学发光免疫分析,二、未稍采
2、血(塑料管法)操作规程,1采血部位 通常取手指或耳垂。耳垂末梢血循环较差,受气温影响较大,冬季最好不用;由于耳垂采血痛感较轻,病人容易接受,可先充分按摩,改善耳垂末梢循环。手指采血应选择无名指。 2采血器材 一次性三棱针或弹簧刺血针、75%的酒精、无菌脱脂棉球、聚乙烯塑料管(直径2mm,长8cm)、镊子、酒精灯等。,3采血方法 1)以手指按摩采血部位,使局部充血,再用75%酒精棉球消毒皮肤。 2)待干后用左手固定采血部位,右手持消毒针迅速刺入皮肤2-3mm,取 出刺针,血液即自行溢出。如血流不畅,可于四周稍加压力。 3)用消毒干棉球擦去第一滴血液,以后流出的血即可采用。 4)用塑料管进血口靠近
3、血滴让血液自行流入管内,采集3cm血液(一次检测)。 5)采血完毕,刺处用消毒棉球拭擦干净。 6)采血后的塑料管将进血端留一小段空隙,靠近酒精灯烧熔管口,用镊子轻 轻夹住已基本溶化的采血管进血端约10秒,将进血端牢牢封住,贴上标签。 7)塑料管封口端朝下垂直于容器中,待血清自然析出或离心后,剪去塑料管之 血球部分,将血清移至中部,用于检测。或两端封口后放冰箱保存备用。,4注意事项 采血部位要严格消毒,做到一人一针;采血针忌用注射针头;采血针刺入速度要迅速;有炎症部位不能采血;采血时切忌用力挤压;采血后伤口继续出血应用干棉球压迫; 用塑料管收集血液时应尽量避免空气进入管内;如果空气进入管内可将塑
4、料管的另一端位置提高,以排除空气,然后继续采集血液到指定位置 可用普通离心机低速(1000-1500转)离心5分钟,以分离血清,防止离心过速或过长。 塑料管封口要严密,防止血液流失。 用剪刀剪塑料管时应保持剪刀的清洁,避免交叉污染。 分离后的血清(或血浆)样品可置冰箱保存。 实验废弃物应按照相关规定处理,严禁随意丢弃。,三、间接红细胞凝集试验( IHA)操作规程,1 基本原理 抗原吸附于经适当处理的红细胞表面,使红细胞致敏。致敏红细胞与病人血清中特导性抗体(抗SEA特异性抗体)相遇时,在适宜的条件下(电解质、温度、pH),抗原与特导性的抗体相结合,使红细胞出现肉眼可见的凝集反应。为正向间接凝集
5、。,2 冻干致敏红细胞的制备工艺,血吸虫虫卵抗原制备 红细胞醛化 红细胞鞣化 红细胞致敏 致敏红细胞的冰冻干燥 致敏的新鲜红细胞保存时间短,且易变脆、溶血和污染,只能使用23天。新鲜红细胞能吸附多糖类抗原,但吸附蛋白质抗原或抗体的能力较差。为此一般在致敏前先将红细胞醛化,先用甲醛或戊二醛,再用鞣酸处理。醛化红细胞能耐60加热,可长期保存而不溶血。并可反复冻融不破碎,在4可保存36个月,在20可保存一年以上。,3 实验操作准备,1) 穿戴好工作服、口罩和手套等,做好基本实验准备工作。 2) 实验试剂和器材检查和摆放。要求试剂批号与有效期符合产品说 明;器材符合相关质量要求。 3) 检查完毕后,按
6、照实验常规要求摆布好实验试剂和器材。 4) 实验试剂和器材准备 实验试剂盒: 1. 冻干致敏红细胞(红瓶) 2. 致敏红细胞稀释液(蒸馏水、红瓶) 3. 标本稀释液(生理盐水、兰瓶) 4. 阳性对照品(冻干品、红色) 5. 阴性对照品(冻干品、兰色) 6. 使用说明书,器材: 1. 移液器100l一支、1000l(1ml )一支、配套吸头、吸头盒及移液器架等 2. “V”型反应板一块、白纸一张、记号笔 3. 旋转震荡器一台 4. 温箱一台 5. 实验记录纸、记录笔、废弃物杯 5) 实验准备要求: 待检血清(或血浆)要新鲜,不能有溶血或混有红细胞。 应选择“V”型,底角为90度的反应板。不要选择
7、“U”型及不同底角的“V”型反应板。 “V”型反应板要清洁、不潮湿,反应孔完好光洁。 试剂盒在有效期内,4 实验操作步骤,1) 样本编号,从左到右按1n号排列。 2) 取一块96孔“V”型反应板横向平放纵向使用。 血凝反应板编号:1)横 向(行)从左到右编号:1、2、3、阴、阳; 2) 纵向(列)从上 到下编号:1:5、1:10、1:20、1:40。 3) 稀释对照品:阴性对照、阳性对照品各加100l蒸馏水稀释溶解,加盖混 匀后放回原处备用。 4) 配置致敏红细胞悬液:启开安瓶,以每支冻干致敏红细胞加1ml致敏红细 胞稀释液(蒸馏水、红瓶)稀释混匀备用。 5) 启开标本稀释液(生理盐水、兰瓶)
8、安瓶。 6) 调节移液器为100l。血凝反应板的第1行(横向)第1孔各加标本稀释液 100l。,7) 调节移液器为25l。血凝反应板的纵向(列)第24孔各加标本稀释液 25l。加液完毕,检查每孔是否有漏加孔或加双倍孔,并及时纠正。 8) 于第一排第1孔加1号待测血清25l,加完血清(盖上盖子)放回原处, 充分混匀(吸打4次,混匀吸打在第一档进行,移液吸头不能触碰反应孔 底壁) ,使血清成15稀释。(加血清时要核对一下样本编号防止加错 位)。 9) 在第1孔吸出25l于第2孔(纵向),同上混匀使血清成1:10稀释。后吸出 25l于第3孔(纵向),同上混匀使血清成1:20稀释。后吸出25l于第4
9、孔纵向),同上混匀使血清成1:40稀释,后吸出25l弃去,自动卸去吸头。 同上操作进行第2n号样本、阴性对照、阳性对照倍比稀释。倍比稀释 一个样本一个吸头。,10) 全部样品(及对照)倍比稀释完成后,调节移液器为75l,然后在第一行(纵 列第一孔)吸取75ml弃去,一个样本一个吸头。 11) 检查每孔液面是否在同一高度,否则应及时纠正。 12) 充分混匀致敏红细胞悬液(每加若干次要混匀一次),然后在每孔加致敏红细胞 悬液25l(原则上以每个样品为单位即列为单位加液),不需换吸头,但不能 触碰反应板,自动卸去吸头。 13) 先试一试震荡器,正常运转后将反应板震摇12分钟,盖上盖子,置37 (水
10、浴)30min后下垫白纸观察结果。并做好记录。 14) 记录结果后,实验台面清理:未使用试剂、未使用吸头、移液器(刻度复原至最 高档)等放回原处;实验废物放入规定的收集器内。,5 结果判定,1) 首先应观察对照管:阴性对照应不出现凝集现象,阳性对照应出现 凝集现象,结果方可成立。如出现异常则说明实验操作有误或血球 本身有自凝现象,试验结果不能成立。 2) 根据红细胞凝集程度以“”,“”,“”,“” 记录结果,以呈“”凝集的血清最高稀释度作为血清的效价, 以效价1:10作为阳性判断标准。 3) 报告形式:1:40阳性(),4)血凝反应强度的判定如下: :红细胞全部下沉在孔底,形成肉眼可见紧密、边
11、缘光滑的小圆点。 :多数红细胞下沉在孔底形成圆点,周围可见少量凝集红细胞,肉眼见周边模糊(或中间出现较为明显的空白点) 。 :孔底中心可见少量红细胞下沉的小圆点,多数凝集红细胞在孔底周围形成小薄层 :红细胞形成薄层凝集,边缘呈现不规则的皱褶。,6 注意事项,1) 结果观察时不能移动反应板,如条件限制则要非常小心慢移,切勿摇动反应板,以免凝集分 散,影响结果判断。结果观察时下垫白纸。 2) 血凝板以96孔“V”型底角应为90度有机玻璃板为适宜,确保所用器材清洁,血凝板清洗不能 用毛刷、移液吸头不能触碰反应孔,以避免损坏反应孔,造成假阳性。 3) 待测血清或血浆不能混有红细胞或被细菌污染。标本不能
12、及时检测可在内4度保存2 3 天。长时间保存应放冰箱冻存。 4) 结果判断的时间与温度有关,应根据作业指导书在相同温度相同时间条件下判断。 5) 使用加样器加样,每测1个样本要更换滴头,在倍比稀释待检血清中,混匀时应避免产生气泡 (混匀吸打都在第一档进行)而影响吸量准确性。 6) 试剂盒于28避光保存。自检定合格之日起有效期为2年。醛化红细胞能耐60加热,并可 反复冻融不破碎,在4可保存36个月,在20可保存一年以上。从冰箱取出使用时先要 放室湿平衡一定时间。,1 基本原理,血吸虫病患者血清中存在的抗血吸虫抗体(IgG)与胶体染料标记的日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)相结合,形成染料标记的抗
13、原抗体复合物,这复合物通过层析技术与固定在硝酸纤维膜上的抗人IgG(二抗)相结合,形成可见的染色带,即为阳性反应。,四、胶体染料试纸条法(DDIA)操作规程,2 实验操作准备,1) 穿戴好工作服、口罩和手套,做好基本实验准备工作。 2) 实验试剂和器材检查和摆放。要求试剂批号与有效期符合产品 说明;器材符合相关质量要求。 3) 检查完毕后,按照实验常规要求摆布好实验试剂和器材。 4) 实验试剂和器材 实验试剂盒: 1. 染料标记液 2. 试纸条 3. PVC小杯 4. 使用说明书 器材: 1. 移液器50l一支、吸头、吸头盒及移液器架等 2. PVC小杯架、废弃物杯 3. 实验记录纸、记录笔、
14、记号笔 5) 要求:1 待检血清要新鲜,不能有溶血或混有红细胞,3 实验操作,1) 样本编号1n号,并从左到右按1n号排列。 2) 取PVC小杯架子,装上PVC小杯(下垫白纸) 3) 编号: 横向(行)(标在小杯架子上)从左到右编号:1、2、3、 。做好相应 实验记录。 4) 轻轻颠倒混匀染料标记液,确保沉淀完全被混悬。 5) 调节移液器为50l。根据样品数每小杯加50l染料标记液至PVC小杯中。加液完毕,检查每孔是 否有漏加孔或加双倍孔,并及时纠正。 6) 调节移液器为20l。分别加20l待检血清(加血清时要核对一下样本编号防止加错位),每个样 本缓缓混匀(吸打4次),混匀时应避免产生气泡。
15、整板样本加完后,检查每孔是否有漏加孔或加 双倍孔,并及时纠正。,7) 将整板放手上轻轻震荡,加血清一分钟(含混匀时间)后加试纸条。 8) 取试纸条插入小杯中,待小杯内反应液吸干后观察结果(15分钟)。 9) 在光线充足但非强光下观察,正面面向试纸条观察(阳性检测带一般 在对照带下0.9cm处,插入杯底斜靠时一般在PVC小杯上沿略上处,防 止误判),观察结束放回原处,记录结果。 10)实验台面清理:未使用试剂、未使用吸头、移液器(刻度复原至最高 档)等放回原处;实验废物放入规定的收集器内。,4 要求,1)标记液混均要轻,倒置时没有沉淀物后再颠倒2次; 2)一个样品一支吸头;加血清时要集中注意力切
16、不可漏加或跳管或重叠; 3)取试纸条时,用手捏住吸水垫(较长的一端),严禁触摸检测膜或倒捏。 4)试纸条一定要入杯底。 5)试纸条面向自己排列整齐、一次放好,在结果观察前严禁触碰试纸条和小杯架,也不要做台面清洁工作,防止试纸条顷倒; 6) 观察结果时要注意光线、方向,不要刻意判断,防止将“固相二抗”的折光误判阳性。,5 结果判断,阳性反应:1)检测带和对照带都出现紫蓝色带。 2)检测带出现深紫蓝色带(反应强),对照带显色减 弱甚至不显色。 阴性反应:对照带出现紫蓝色带而检测带无显色带。 无效:检测带和对照带都不出现显色带。 6 储存条件及有效期 试剂盒保存于4 - 8,防止冷冻。 有效期6个月
17、。,五、酶联免疫吸咐试验(ELISA)操作规程,1 基本原理,1) 抗原(日本血吸虫可溶性虫卵抗原SEA)以物理性地吸附于固相载体(聚苯乙烯或聚氯乙烯塑料板)表面(包被),并保持其免疫学活性; 2) 加待检标本(有相应的特异性抗体)(一抗),即与固相上抗原结合,形成抗原抗体复合物。 3) 加酶标记的二抗形成Ag-Ab1-Ab2*HRP三联复合物(第二抗体通过共价键与酶连接形成酶结合物-辣根过氧化物酶(HRP)标记结合物),而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性; 4) 洗涤后加底物和显色剂(H2O2的邻苯二胺(OPD)或四甲基联苯胺(TMB),酶结合物中的酶再催化底物和显色剂反应,产生显色反
18、应。 5) 根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。,2 实验操作准备,1) 穿戴好工作服、口罩和手套,做好基本实验准备工作。 2) 实验试剂和器材检查和摆放。要求试剂批号与有效期检查符合产品说明;器材符合相关质量要求。 3) 检查完毕后,按照实验常规要求摆布好实验试剂和器材。 4) 实验试剂盒(康百得): 1)预包被板 (SEA预包被聚苯乙烯或聚氯乙烯塑料板) 48T/96T 2)酶结合物(1号液) (辣根过氧化物酶(HRP)标记结合物) 1支 3)洗涤液(2号液) 1支 4)底物(3
19、号液) (四甲基联苯胺(TMB) 1支 5)显色剂(4号液) (H2O2 ) 1支 6)样本稀释液(5号液) 1支 7)终止液(6号液) (硫酸(H2SO4) 1支 8)阳性对照品(冻干品) 1支 9)临界对照品(冻干品) 1支 10)阴性对照品(冻干品) 1支 11)使用说明书 1份,5)实验器材: 移液器20l、100l、1000l各一支、200l、1000l吸头及吸头盒和移液器架 样品稀释板 酶标板架 塑料洗瓶(装蒸馏水) 恒温水浴箱一台 吸水纸、废弃物杯 实验记录纸、记录笔、记号笔、剪刀 6)血清样本检查,要求:1 待检血清要新鲜,不能有溶血或混有红细胞或脂血或严重黄胆或已污染,,3
20、操作程序,1 ) 样本编号:样本编号1n号,排列,并做好记录。 2) 样品稀释板编号:选取一块样品稀释板横向平放纵向使用。 横向(行)从左到右编号:1、2、3、 3) 样本稀释: 样品稀释板内每孔加入样本稀释液(5号液)500l,根据样本数一次全部加完。 分别加入待检测血清5l(待检测血清按1:100稀释),充分混匀(吸打4次)。 4)阴性、临界、以及阳性对照每支加入300l蒸馏水复溶,充分溶解后放置样品稀释板边以阴性、临界、阳性对照品排列。 5)加样反应: 取预包被板放入板架内,安好,标记好或安排好样品与对照位置,并做好记录。 样本检测孔第1-n孔每孔分别加已稀释样本血清100l,取样时要将
21、样品吸打几次混均后再吸。 每板最后依次为阴性、临界、阳性及空白对照孔,分别加入复溶后的阴性、临界、阳性对照液及样本稀释液(5号液)各100l。 6)置37水浴箱避光反应30分钟后甩去孔内液体。,7) 洗涤: 每孔加洗涤液(2号液)1滴(滴瓶垂直加液,下同),立即用蒸馏水注满(首次加蒸馏水时尽量不要溢出孔外,以免抗体溢出到临孔),静置30秒后甩去,再直接用蒸馏水洗涤四次,每次均需静置30秒。最后一次甩去拍干。 8)加酶反应: 除空白对照孔外其余每孔加酶结合物(1号液)2滴,置37水浴箱避光反应30分钟后甩去孔内液体,如上洗涤,拍干(关健操作:要洗涤到位并拍干,否则可能产生假阳性)。 9)显色反应
22、: 加底物(3号液)1滴。 加显色剂(4号液)1滴,混匀(轻轻敲打)。 置37水浴箱避光显色10分钟。初步观察,做好预记录。 加终止液(6号液)1滴,混匀,终止反应(加终止液后蓝色会变为黄色,无色的仍然无色)。 置白纸上观察结果。,4 结果判断,1) 肉眼观察: 空白无色,阴性对照无色或接近无色,临界对照呈浅黄色,阳性对照呈明显黄色,表示实验有效。 待检孔无色或呈浅于临界对照孔的微黄色表示该标本为阴性,待检孔呈深于临界对照空的黄色表示该标本为阳性。 2)仪器判断: 以空白对照调零,用酶标仪于450nm(TMB)(620nm作参比波长)读取OD值,待检孔OD值大于阴性对照P/N2.1倍者为阳性。
23、当阴性对照OD值低于0.05时按0.05计算。 3)结果记录,结果判断,目测判读结果,B1-7,10-11,D1-2为正常血清, B8、9,12及D3、4为血吸虫病人血清; D5阴参,D6临界,D7阳参,D9空白,病人血清,阴参,临界,阳参,正常人血清,31,结果判断,加2M H2SO4后,32,ELISA结果,B1-7,10-11,D1-2为正常血清, B8、9,12及D3、4为血吸虫病人血清; D5阴参,D6临界,D7阳参,D9空白,测定OD值,33,5 注意事项,1)试剂盒在2-8保存,冰冻失效、温度过高保存活性降低。每次取出时先平衡至室温后使用。滴瓶每次用后一定要将盖拧紧,各瓶盖之间切
24、不可混用。各试剂盒之间不可混用。 2)洗涤时将蒸馏水加满孔内,每次停放30秒钟后,甩去孔内液体。禁用自来水等其他水源。 3)为提高实验的可比性建议使用仪器判读结果,并对阴性对照测复孔以减少误差。 4)洗涤要彻底,特别是酶结合物反应后,洗涤一定要充分; 5)OPD对光非常敏感,应避光反应;结果应尽快检测 6)酶标反应均应在湿盒中进行。,六、斑点免疫金渗滤法(DIGFA)操作规程,1 试验原理,将抗原(日本血吸虫可溶性虫卵抗原SEA)包被于硝酸纤维素薄膜 (微孔滤膜)上,滴加在膜上的待检血清通过滤膜时,其中的抗体与膜上的抗原相接触,起到亲和层析的浓缩,形成抗原抗体复合物。然后,红色胶体金颗粒标记的
25、第二抗体所形成的金标探针,与复合物中的抗体结合,滞留在反应板上,形成肉眼可见的红色斑点。,3 实验操作准备,1) 穿戴好工作服、口罩和手套,做好基本实验准备工作。 2) 实验试剂和器材检查和摆放。要求试剂批号与有效期检查符合产品说明;器材符合相关质量要求。 3) 检查完毕后,按照实验常规要求摆布好实验试剂和器材。 4)实验试剂盒: 1)预处理空白反应板(含质控点) 2)洗涤液 3)金标抗体液 4)使用说明书 5)器材: 1. 移液器50l、200l吸头、吸头盒及移液器架 2. 实验记录纸、记录笔、记号笔。 6)被检样血清检查,要求:本方法对待检血清要求高,要仔细检查,详见注意事项。,4 操作程
26、序,1) 将试剂盒、试剂取出,置予室温下平衡 2) 样本编号:样本编号1n号,从左到右按1n号排列,并作好记录。 3) 取n块预处理空白反应板(含质控点)放好并编号。 4) 按顺序每次取2块板,依次在反应孔中间位置加入2滴洗涤液,待液体完全渗透 5) 依次在每块板反应孔正中间垂直加入25l新鲜特检血清(对应编号),待血清完全渗透。 (关健操作:1、如没完全渗透就加液可呈假阴性,但过干后再加液则呈假阳性。2、完全渗透的标准是膜上特别是孔周边折光液体消失),6) 依次在每块板加入2滴洗涤液,待液体完全渗透。 7) 依次在每块板加入4滴金标抗体液,待液体完全渗透。 8) 依次在每块板加入2滴洗涤液,
27、待液体完全渗透,观察结果。 9) 按顺序取下一轮2块板,同上进行第3和第4份、第5和第6份、样本检测。 10) 样品全部检测完成后复查结果(但必须控制在1小时内),并记录。 11)清理台面,移液器调至最高档。,5 结果判断,判断结果的时间应以完成操作后,即时观察为准。部分品种在放置数小时或1日后,结果会发生变化 1)出现两个红色圆点为阳性; 2)出现一个红色圆点为阴性; 3)无圆点(呈白板状)表示试剂失效或操作有误,应当重新测试,6 注意事项,1)本试验对血清标本要求高,最好应用新鲜血清。测定血清标本要求离心分离以消除血脂的影响(4000转分,15分钟或8000转l分,5分钟),不宜用未稍采血
28、(塑料管法)样本。吸取血清标本时,应避开血脂、纤维蛋白或沉淀等,取其清亮透明部分。 2)试剂盒从冰箱取出后应恢复至室温才能使用,试剂盒最佳使用温度是3037。 3)以2个样本为一批依次进行操作。血清样品加样时,应在反应孔的正上方垂直加样。 4)待反应板上的液体完全渗透后,立即加入下一种液体。既要防止渗透不全,又须避免反应膜干枯(是本试验操作的关键)。在加液时应避免出现气泡,尤其是金标液。 5)判断结果以即时观察为准若较长期保存,将反应板正面朝下放置即可。 6)于2-8冷藏保存,切勿冷冻应当避免强烈光照和高温。检测完毕后,未用的反应板要立即放入自封袋中密闭冷藏。,七、移液器的使用规程,1 量程的
29、调节 在调节量程时,逆时针或顺时针按照正常的调节方法,旋转旋钮即可;在该过程中,千万不要将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。 2 枪头(吸液嘴)的装配 方法是将移液枪(器)垂直插入枪头中,稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道(如8道或12道)移液枪,则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头,然后倾斜地插入,往前后方向摇动即可卡紧。,3 移液的方法,移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。 吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下(浸入的深度为:P20、P100、P200小于或等于2毫米,P1000小于或等于3毫米。 在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿
30、吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。这时可以采取两种移液方法。 一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。 二是反向移液法。此法一股用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点。慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。,4 常见的错误操作,1)吸液时,移液器本身倾
31、斜,导致移液不准确(应该垂直吸液,慢吸慢放)。 2)装配吸头时,用力过猛,导致吸头难以脱卸 3)平放带有残余液体吸头的移液器(应将移液器挂在移液器架上)。 4)用大量程的移液器移取小体积样品(应该选择合适量程范围的移液器)。 5)直接按到第二档吸液(应该按照上述标准方法操作)。 6)卸去吸头:卸掉的吸头一定不能和新吸头混放,以免产生交叉污染。,5 移液器(移液枪)维护保养时的注意事项,1)如不使用,要把移液枪的量程调至最大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。 2)最好定期清洗移液枪,可以用肥皂水或60的异丙醇,再用蒸馏水清洗,自然晾干。 3)高温消毒之前,要确保移液器能适应高温。 4)校准是可以在20-25度环境中,通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行。 5)使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有一下几方面:1、枪头是否匹配;2、弹簧活塞是否正常;3、如果是易挥发的液体(许多有机溶剂都如此),则可能是饱和蒸汽压的问题。可以先吸放几次液体,然后再移液。,谢谢!,2009年 无锡,
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