血液学血细胞化学染色.ppt
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1、第三章 血细胞化学染色,一、概述 (一)研究对象 外周血和骨髓新鲜涂片单个细胞中的化学物质: 酶类、脂类、糖类、铁、蛋白质、核酸等,(二)临床应用,1.鉴别各类血细胞 2.辅助血液系统等疾病诊断和鉴别诊断 3.观察疾病疗效和判断预后,二、常用细胞化学染色方法,过氧化物酶染色 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 过碘酸-雪夫反应 -醋酸萘酚酯酶染色 铁染色,过氧化物酶染色 (peroxidase,POX),POX,新生态氧 O,过氧化氢 (基质中),四甲基联苯胺 (无色),联苯胺蓝(蓝色),亚硝基铁氰化钠,蓝色颗粒 (浆内酶部位),粒、单核 细胞胞浆,【原理】,【结果判断】 -、+、+、+、+ 弱阳性 颗
2、粒小,分布稀疏 阳性 颗粒稍粗,分布较密集 强阳性 颗粒粗大,密布于整个胞浆,【正常血细胞染色反应】 1.粒细胞系统 POX主要存在于粒系细胞中。 分化差的原粒细胞阴性; 分化好的原粒细胞至中性成熟粒细胞各 阶段均呈阳性,阳性反应程度随细胞的成 熟逐渐增强。,2.单核细胞系统 阴性或弱阳性 3.淋巴细胞系统 红细胞系统 巨核细胞系统 阴性 浆细胞 组织细胞,【临床评价】,急性髓细胞白血病 急性淋巴细胞白血病,鉴别,1. 急性髓细胞白血病 (1)急性粒细胞白血病 阳性反应 (2)急性单核细胞白血病 弱阳性反应,2. 急性淋巴细胞白血病 阴性反应或阳性率 3%(残留原粒细胞),中性粒细胞碱性磷酸酶
3、染色 (neutrophilic alkaline phosphatase,NAP),磷酸萘酚钠 (基质中),中性粒细胞胞浆中NAP,磷酸钠,-萘酚,重氮盐 (坚牢蓝盐RR),紫黑色偶氮染料 (胞浆中),水解,【原理】Kaplow偶氮偶联法,【结果判断】 胞浆中有紫黑色颗粒为阳性(+),【正常血细胞染色反应】,1. 中性成熟粒细胞阳性反应 其他细胞呈阴性反应,2.NAP积分值 计数100个成熟中性粒细胞(杆状和分叶),分别记录其分级情况:,(-) 0分 (+) 1分 (+) 2分 (+) 3分 (+) 4分 阳性率 全部阳性反应细胞之和 积分值 各种阳性程度细胞的分值之和,3.参考值 积分值
4、35-70分 ( 各实验室参考值不同),【临床评价】 (1)细菌性感染与病毒性感染 (尤其是化脓性感染) 明显增加 无明显变化,(2)类白血病反应与慢性粒细胞白血病 明显增加 明显下降且常为零分, 缓解时又上升到正常,过碘酸-雪夫反应 ( 糖原染色 ) (periodic acid-Schiff reaction,PAS),双醛基,过碘酸,雪夫试剂中 的无色品红,紫红色化合物 (附于含多糖类 的胞浆内),乙二醇基 (多糖类物质含有),氧化,【原理】,【结果判断】,阳性 胞浆内红色阳性物呈弥散状、颗 粒状或块状。 阴性 胞浆内无色或无颗粒,核淡绿。,【正常血细胞染色反应】,1.粒细胞系统 分化差
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