血细胞检验.ppt
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1、临床检验手册,汝南县人民医院检验科 王亚 2011.06.20,检验医学(Laboratory medicine)既是一门古老的学科,又是一门新兴学科,同时也是涉及基础和临床专业最多的一门边缘学科。检验医学的主要作用是为临床疾病的诊断、疗效观察、病程监测、预后判断和预防提供实验室的客观依据和各种信息、故其作用和地位十分重要。随着基础医学和其他科学技术、特别是分子医学、电子学、生物信息和计算机学科的相应渗透和迅速发展,诸多新理论、新技术和新仪器都率先在检验医学中应用,使其内容不断拓宽和深化,面貌日新月异,成为发展最快的学科之一。其在临床医学中发挥的作用也越来越为重要。,第一章 检验前病人准备和标
2、本采集 病人准备和标本采集是检验质量保证的重要环节之一。由于病人受到各种内在和外界的影响,可使检验结果产生或大或小的误差,为此检验前病人须作适当准备,可减少随机分析误差。,一、病人准备 病人准备除了特殊检验有专门规定外,一般要求病人处于安静状态,生活饮食处于日常状态,目前已公认无能无力、过度空腹、饮食、饮酒、吸烟及姿势体位等可影响某些检验结果,现分述如下:,1. 运动:肌肉活动的影响可分短暂性的和持续性的两类,短暂性影响为血浆脂肪酸含量,可因运动而暂时减少,而后渐渐增加而恢复。丙氨酸可因运动暂时增加达180%,而乳酸则可增加至300%。受到持续性影响主要是一些肌肉有关酶,如肌酸激酶、醛缩酶、乳
3、酸脱氢酶等,据称一场60min的手球训练赛后11h,肌酸激酶活性比赛前仍增加达125%,长期坚持体育锻炼还会提高性激素水平,因此采血前宜安静,不作过大的活动。,2. 食物:进餐后血浆脂肪、蛋白质、糖类有所增加。有人研究于高脂餐后24h采血,多数人碱性磷酸酶含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O型或B型兼为Le+分泌型者增高更明显。一般认为高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量,高比例不饱和脂肪酸食物,可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍;含咖啡因饮料,可使血浆游离脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性
4、。故在做相应检验时,应对食物有一定的控制。,3. 过度空腹:一般血液生化检验要求病人晚餐后禁食,至次日晨采血,空腹约1214h。但过度空腹,若达24h以上,某些检验会有异常结果。例如血清胆红素可因空腹48h而增加240%;血糖可因空腹过长而减少为低血糖;血脂空腹过度,甘油三酯、甘油、游离脂肪酸反有增加,而胆固醇无明显改变。故空腹并非越长越好,近年国外有人主张胆固醇单项检验,不必空腹抽血。,4. 饮酒:饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、己醛、乙酸盐增加。长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高,平均红细胞体积增加,谷氨酰转肽酶(GGT)亦较不饮酒的人为高,甚至可以将这项作为嗜酒者的筛选检查。,5. 吸烟:瘾大者
5、血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%,而不吸烟者含量在1%以下。此外儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为多;血液学方面亦有变化,白细胞数增加,嗜酸粒细胞减少,中性粒细胞及单核细胞增多,血红蛋白偏高,平均红细胞体积偏高。Dalferes认为吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。,6. 药物:药物对检验的影响非常复杂,15000多种药物对检验有干扰作用。众所周知,抗结核药、抗生素、抗白血病制剂、磺胺类药物,对肝功能有大小不一的影响,甚至几片常用药物可以引起严重的药物反应,故在采样检查之前,暂停各种药物是为上策,如不可停用,则应了解可能对检验结果产生的影响。,7. 体位:体位影响血液循环,由于血浆和组织
6、间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如由卧位改为站位,血浆白蛋白可因此而浓度增大,总蛋白、酶、钙、胆红素、胆固醇及甘油三酯等亦因站位而浓度增加;血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数亦于站位时增加。由于体位的因素,不要让病人自己到检验科来采血做血常规,或复查红、白细胞计数,以免体位引入的误差。,8. 其他:病人准备还应考虑病人的生物钟规律,因此复查以在大体相同的时间采样为好。采血时止血带结扎过久,也是一种误差因素,如以结扎1min的样品结果为基数,则结扎3min,可使血浆总蛋白增加5%,胆固醇增加5%,铁增加6%,胆红素增加8%。血气和PH值测定的血液以动脉血为原则,且
7、不可漏气。细菌培养的样品要采用无菌技术,防止污染。,二、标本采集 标本采集是直接关系检验结果的基本功,如果标本采集不当,即使最好的仪器设备,也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。现将各种标本采集要点分述如下:,1. 血液标本:分普通管、抗凝管两大类;抗凝管又根据抗凝剂不同分为草酸钾管、草酸钠管、枸橼酸钠管、乙二胺四乙酸二钾盐或二钠盐(EDTA-K2或EDTA-Na2)管、肝素管等。 1) 草酸钾:与钙离子结合成草酸钙,2) 使血液抗凝,3) 常用量为12g/L血液。 4) 草酸钾氟化钠混合抗凝剂:专供葡萄糖测定用,5) 氟化钠1g,6) 草酸钾3g混合,7) 混合每4mg可使血液1ml抗凝。
8、,8)枸橼酸钠:用于血沉及血凝检查。血沉(魏氏法)用109mmol/L(32g/L)枸橼酸钠0.4ml,9) 与血液1.6ml混和;血凝多用38g/L,10) 亦可用32g/L,以抗凝剂与血液1:9混和。 11) 肝素:是一种粘多糖体,12) 可抑制凝血酶原转化为凝血酶,13) 使纤维蛋白原不14) 能转化为纤维蛋白,15) 以15+-2.5IU抗凝1ml血。可用于生化和血液学检验标16) 本,,17) 但不18) 可用于筛选弥散性血管内凝血的血浆鱼精蛋白副凝试验(3P)和凝血酶试验。因肝素可与鱼精蛋白作用,19) 发生沉淀使3P出现假阳性以及肝素的抗凝血酶作用出现严重干扰。 20) 乙二胺四
9、乙酸(EDTA):能与钙离子络合而21) 抗凝,22) 通常血常规中用其钾盐EDTA-K2,或EDTA-K3。,2. 尿液标本:根据采集时间可分为晨尿、随意尿、空腹尿,计时尿(2h 3h 12h 24h等),午后尿、餐后尿等。晨尿为住院病人留尿的主要方法,早晨起床后采集第1次排尿,可用于常规检验。随时尿不受时间的约束,多为门诊病人的留尿方法。空腹尿为进餐后4h左右排尿,收集下1次的尿液供检验,主要用于了解葡萄糖代谢情况。计时尿不论几小时,均应于计时开始进排空尿液,然后于规定时间内排尿,计时尿多用于肾功能和有形成成分排出率的评估,亦用计算淀粉酶或肌酐的排出率。24h尿多用于化学组分的测定,亦用于
10、泌尿道抗酸杆菌的检查。尿液原则上不用防腐剂为好,如需12h或24h 尿,首选以冷藏为妥,次为根据检验申请加用合适的防腐剂。,3. 粪便标本:采集后及时送检,如作原虫阿米巴检查应保持一定温度,且立即送检,立即检查。如检查虫体或绦虫头节,应全部粪便送检,如检查蛲虫则不必送送验粪样,而应于晨起排便前用棉拭擦肛门周围,可得虫卵。粪便标本不应污染容器外表,且不太满,30g容器装510g为妥。,如大便上有粘液或是血液,应采集此处标本,以提高阳性率,30min内送检,放置过久易导致细胞的破坏,特别是阿米巴等原虫。,4. 脑脊液、浆膜腔液、关节液:均由临床医师穿刺采样,检验科应提供专用的各种试管或容器,相互配
11、合并及时检验。 5. 骨髓:采集由临床医师穿刺,为使涂片满意,必要时本科协助作骨髓涂片。,6. 胃及十二指肠液:一般均在门诊室或病房采集后送检,收样时应核对标本。胃液分基础胃酸分泌(BAO)、最大胃酸分泌(MAO)等;十二指肠液分甲、乙、丙管,甲管来自总胆管为橙黄色,乙管来自胆囊为黄绿色,丙管来自胆道为柠檬色,细菌培养应从乙管取样接种培养。,7. 痰液标本:采早晨第1口痰,多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口,经深呼吸数次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前,如已用药,则应选血药浓度最低时采样。,8. 阴道分泌物:由妇产科医师采样后送检,如成批送检应在
12、37加温数分钟后检查,否则影响滴虫动力,容易漏检。 9. 精液和前列腺液:采集精液应在35天内勿排精,且于排精后30min内保温送达检验科,容器以广口小玻璃瓶为好,不可贮于避孕套或塑料瓶内。收到标本后应及时检查。前列腺液由医师作前列腺按摩术取样,收到标本后应立即检查。 10. 其他标本:根据具体检验项目而定。,第二章 临床检验,一、临检标本采集要求(1) 血常规标(2) 本采集方法 1. 采血前,2. 仔细核对血常规试管上的标3. 签与化验单上的姓名4. 、床号、住院号是否相符。 5. 检查血常规试管底部是否有抗凝剂。 6. 静脉血一般用肘静脉,7. 也可选用颈静脉或股静脉,8. 采血处应避免
13、有皮肤红肿、溃疡等现象。 9. 取1ml血,10. 缓缓注入血常规试管中,11. 或加血至标12. 记线处,13. 盖上盖子,14. 立即颠倒混匀不15. 少于5次,16. 避免剧烈振荡,17. 以免产生气泡。一小时内送检。,18. 禁止在输液侧肢体采血或在输液后立即于该侧采血。 19. 实行一人、一针、一管、一带、一垫,20. 防止交叉感染。 21. 若要进行比较性测定,22. 应尽量在同23. 一时间采血,24. 不同25. 时间的细胞数可能有较大的变化。 26. 由于血小板极易凝集,27. 采血者应首先采集常规血,28. 其次为出凝血、血沉,29. 最后才是生化免疫。 注:网织红细胞(R
14、ET)、C反应蛋白(CRP)、糖化血红蛋白(HAlb)可与血常规共用一管,(3) 出凝血、血沉标(4) 本采集方法 1. 采血前,2. 仔细核对试管上的标3. 签与化验单上的姓名4. 、床号、住院号是否相符。 5. 检查试管底部是否有抗凝剂。 6. 尽量空腹采血,7. 采血要顺利。 8. 缓缓向出凝血、血沉管中加血至刻度处,9. 务必要准确,10. 立即加盖,11. 颠倒充分混匀5、6次。及时送检,(5) 其他常规血液项目标(6) 本采集方法 1. 血中微丝蚴:在夜间10时至凌晨2时之间,2. 取末梢血23滴于干净玻片上,3. 制成厚涂片,4. 立即送检。 5. 红斑狼疮细胞(LE):请到门诊
15、处抽血。 6. 疟原虫:最好在全身开始寒战初期,7. 将血滴涂成薄涂片,8. 立即送检。 9. 肺炎支原体、衣原体抗体:采血约2ml置洁净玻璃管内,10. 2小时内送检。,(7) 尿液标(8) 本采集方法 1. 尿常规(URT):取晨起第一次小便中段尿,2. 或第二次小便中段尿约20l 置洁净器皿内,30min内送检。如急诊可取随机尿。 3. 尿淀粉酶(UAMY):晨尿或随机尿约10ml,4. 30min内送检。 5. 尿本6. 周蛋白(Bence-Jones):取晨尿20ml,7. 30min内送检。 8. 乳糜试验:随机尿20ml,9. 30min内送检。 10. 妊娠试验(尿hCG):晨
16、尿中段或随机尿中段约10ml,11. 立即送检。 12. 尿三杯试验:采集标13. 本时应连续排尿,14. 中间不15. 应有间断,16. 各杯不17. 少于10ml,18. 立即送检。,二、临检项目的临床意义,一 血常规 白细胞计数(WBC) 临床意义: 生理性增多: 初生儿、运动、疼痛、情绪变化、应激、妊娠、分娩 病理增高见于: 急性感染:急性化脓性感染所引起的急性全身性感染局部炎症,以及一些细胞感染。 组织损伤:手术后急性心肌梗塞。 恶性肿瘤及白白病:急性、慢性粒细胞性白血病,尤以慢性白血病增高最多。各种恶性肿瘤的晚期,如肝癌、胃癌等。 其它:骨髓纤维化、真性红细胞增多症、尿毒症、酸中毒
17、、某些药物中毒、烧伤等。 减少见于: 某些感染:细菌感染(如伤感、副伤寒);病毒感染(如流感、风疹、麻疹)。 ,某些血液病:再生障碍性贫血、急性粒细胞缺乏症、恶性网状细胞增多症。 脾功能亢进:各种原因所致的脾肿大,如肝硬班替氏综合症。 理化因素:放射性物质、X线、某些抗癌药、解热镇痛药等,可造成白细胞减少。 少于0.5109/L提示患者受感染的危险极大,应采取适当的预防措施,并仔细监测。少于3109/L可认为白细胞减少,应了解白细胞分类,并作进一步检查;多于12109/L可视为增多,白细胞分类对确定增多原因有一定价值,应寻找感染的来源。30109/L或更多者有白血病可能,应作白细胞分类及骨髓检
18、查。 参考值: 成人:410 109/L 婴儿(两周岁内):1112109/L 新生儿:1520109/L,白细胞分类 中性粒细胞: 增高见于: 急性感染和化脓性感染:如肺炎、败血症、脓肿等。 组织损伤:大手术后、心肌梗塞、肺梗塞等。 恶性肿瘤:急、慢性白血病、淋巴瘤等。 各种中毒:尿毒症、糖尿病酸中毒等。 减少见于: 某些传染病:流感、伤寒、付伤寒、麻疹。 某些血液病:再障、粒细胞缺乏症、白细胞减少症。 化疗或放疗后,抗癌药物,X线及镭照射。 其它:脾功能亢进,自身免疫性疾病,高度恶病质。 嗜酸粒细胞: 增多见于: 变态反应性疾病:支气管哮喘、药物过敏、荨麻疹、血管神经性水肿、过敏紫癜。 寄
19、生虫病:蛔虫病、钩虫病、血吸虫病。 某些皮肤病:湿疹、牛皮癣、剥脱性皮炎等。 某些血液病:慢粒、恶性淋巴瘤、嗜酸性粒细胞性白血症、多发性骨髓瘤、何杰金氏病等。 减少见于: 应用糖皮质激素、促肾上腺皮质激素。 伤寒、副伤寒等病患者。 嗜碱性粒细胞:,增多见于: 慢性粒细胞白血病、嗜碱性粒细胞白血病。 某些转移癌及骨髓纤维化。 淋巴细胞: 增多见于: 某些病毒或细胞所致的传染病:传染性淋巴细胞增多症、传染性单核细胞增多症、传染病恢复期、结核病、百日咳。 淋巴细胞性白血病、白血性淋巴肉瘤。 减少见于: 应用肾上腺皮质激素、接触放射线。 细胞免疫缺陷病、某些传染病的急性期。 单核细胞: 单核细胞具有游
20、走性和吞噬作用,除吞噬细胞和异物外,又能吞噬原虫及具有类脂质包膜的结核杆 菌及麻风杆菌。 增多见于: 某些感染:伤寒、结核、疟疾、黑热病、亚急性细菌性心内膜炎。 某些血液病:单核细胞性白血病、淋巴瘤、骨髓异常增殖综合症、恶性组织细胞病。,参考值:中性细胞:4070 % 淋巴细胞:2040 % 单核细胞:310 % 嗜酸细胞:0.55 % 嗜碱细胞:01 % 红细胞计数(RBC) 临床意义: 红细胞增多见于: (1)严重呕吐、腹泻、大面积烧伤及晚期消化道肿瘤患者。多为脱水血浓缩使血液中的有形成分相对地增多所致。 (2)心肺疾病:先天性心脏病、慢性肺脏疾患及慢性一氧化碳中毒等。因缺氧必须借助大量红
21、细胞来维持供氧需要。 (3)干细胞疾患:真性红细胞增多症。 红细胞减少见于: (1)急性或慢性失血。 (2)红细胞遭受物理、化学或生物因素破坏。 (3)缺乏造血因素、造血障碍和造血组织损伤。 (4)各种原因的血管内或血管外溶血。 参考值:3.551012/L,血红蛋白(Hgb) 临床意义:贫血、白血病、产后、手术后、大量失血、钩虫病等减少。缺铁性贫血时尤为明显。肺气肿、肺心病、先天性心脏病、严重呕吐、腹泻、出汗过多、大面积烧伤、慢性一氧化碳中毒及真性红细胞增多症等时增高(长期居住高原者生理性增高)。 Hb低于45g/L者应予输血治疗(充血性心力衰竭者除外);低于105g/L者应寻找贫血原因;高
22、于180g/L者应作进一步检查。高于230g/L者,应紧急采取治疗措施。 参考值:男:120160 g/L 女:110150 g/L 新生儿:170200 g/L,红细胞比积(Hct) 临床意义:红细胞比积增加:大量脱水、血液丢失及真性红细胞增多症,均由于血液浓缩而使红细胞比积增高。 红细胞比积减少:见于各种贫血。 低于0.14者必须给予输血治疗(有充血性心力衰竭者不宜);低于0.33者应进一步检查,寻找贫血原因。男性高于0.56、女性高于0.53同时结合血红蛋白增高应考虑血浆容量问题。达到或高于0.70者为紧急静脉放血的指征。 参考值:0.350.45,平均红细胞体积(MCV) 临床意义:正
23、常红细胞性贫血时正常,大细胞性贫血时增大,小细胞性贫血时减小。 体积减小常见于严重缺铁性贫血,遗传性球型细胞增多症;体积增大常见于急性溶血性贫血及巨红细胞性贫血。 参考值:80100 fL,红细胞平均血红蛋白含量(MCH) 临床意义:增加见于大细胞性贫血,减少见于单纯小细胞性贫血和小细胞低色素性贫血。 参考值:2734 pg,红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC) 临床意义:大细胞性贫血时MCHC正常或减小,单纯小细胞性贫血时MCHC正常,小细胞低色素性贫血时MCHC减小。 参考值:320360 g/L 各型贫血时三种红细胞平均值的改变,贫血类型 MCV MCH MCHC 大细胞性贫血 正常 正常
24、 正常 恶性贫血,及营养性巨幼细胞性贫血等 正常细胞性贫血 正常 正常 正常 急性失血、溶血性贫血、造血组织病等 单纯小细胞性贫血 正常 正常 正常 感染、中毒、慢性炎症、尿毒症等 小细胞低色素性贫血 正常 正常 正常 慢性失血性贫血、缺铁性贫血,红细胞分布宽度(RDW) 临床意义:RDW与MCV结合可将贫血分为小细胞均一性与不均一性贫血,正常细胞均一性与不均一性贫血,及大细胞均一性与不均一性贫血。在治疗过程中大细胞性或小细胞性贫血的这一指标会有动态变化。 参考值:11.515.5 %,血小板计数(Plt) 临床意义: 增多见于: (1)原发性血小板增多症、慢性粒细胞性白血病、真性红细胞增多症
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