复习教案:细胞工程及克隆技术引起的伦理问题.doc
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1、细胞工程及克隆技术引起的伦理问题考点116技术原理植物组织培养及细胞全能性1操作流程及培养条件(1)操作流程 愈伤,组织 胚状体,或丛芽 完整,植株(2)培养条件:营养物质(水、无机盐、蔗糖、氨基酸和有机酸等)、激素(如细胞分裂素、生长素等)及其他条件(无菌、适宜的温度和pH等)。提醒幼嫩的组织脱分化较为容易,如茎尖、根尖、形成层细胞易脱分化,而植物的茎、叶和成熟的组织则较难。对外植体要进行消毒处理,而对各种器械要彻底灭菌。植物组织培养中用到的有机碳源一般为蔗糖,用葡萄糖也可以,但后者的成本高。诱导愈伤组织再分化形成胚状体或丛芽及生根的过程中,要进行换瓶处理,以改变培养基中的激素配比及浓度。2
2、脱分化和再分化的比较比较内容脱分化再分化过程外植体愈伤组织愈伤组织幼苗形成体特点排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞有根、芽需要条件a.离体b.适宜的营养c.生长素/细胞分裂素的比例适中d.不需光a.离体b.适宜的营养c.生长素/细胞分裂素的比例高或低诱导生根或生芽d.光照提醒愈伤组织再分化形成植物幼苗时,需光照处理,以便诱导叶绿素的形成。生长素和细胞分裂素在植物体内含量很低,因此植物组织培养中常用人工合成的生长素类似物和细胞分裂素类似物。细胞分裂素/生长素的比例适中,有利于外植体脱分化,比例升高有利于愈伤组织再分化形成丛芽,比例降低则有利于生根。3原理:全能性(1)含义:生物体的细胞具有使后代细胞
3、形成完整个体的潜能。(2)物质基础:生物的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成完整个体所必需的全部基因。(3)在生物体内细胞并没有表现出全能性的原因:基因在特定的时间和空间条件下选择性表达,细胞分化形成不同的组织、器官。(4)全能性的实例:花药的离体培养、植物的组织培养、克隆技术等。1(2011江苏卷,14)关于现代生物技术应用的叙述,错误的是()A蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C植物细胞培养技术可用于植物茎尖脱毒D动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育考点117实践应用植物组织培养技术的应用1植物繁殖的新途径(1)微型
4、繁殖:不仅可以保持优良品种的遗传特性,还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。(2)作物脱毒:生产上许多无性繁殖作物均受到病毒的侵染,从而导致品种严重退化、产量降低和品质变差。利用植物分生组织(如茎尖、根尖)进行培养,可以使新长成的植株脱除病毒。(3)人工种子:植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽或腋芽,包上人工种皮就可以形成人工种子。下图是人工种子的结构示意图。注意人工种皮中可以加入适量的养分、无机盐、有机碳源以及农药、抗生素、有益菌等,以利于胚状体生长发育成幼苗。2作物新品种的培育(1)单倍体育种:花药离体培养过程就是植物组织培养过程。花药单倍体幼苗纯合子单倍体育种的优点是后代不发生性状分离
5、,都是纯合子,能够稳定遗传,明显缩短了育种年限。(2)突变体的利用:在植物组织培养过程中,由于培养细胞一直处于不断的分生状态,因此容易受到培养条件和外界压力(如射线、化学物质等)的影响而发生突变。从这些产生突变的个体中可以筛选出对人们有用的突变体,进而培育成新品种。(3)细胞产物的工厂化生产:可以利用植物组织培养技术大量生产某些细胞产物,如蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。2(2010课标全国理综,38)请回答:(1)植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的_,繁殖种苗的速度_。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养,最终能够形成完整的植株,说明该叶肉细胞具有该植物的全部
6、_。(2)把试管苗转接到新的培养基上时,需要在超净工作台上进行,其原因是避免_的污染。(3)微型繁殖过程中,适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗_,而与_配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长,促进愈伤组织产生和生长,需要使用的生长调节剂是_(脱落酸、2,4D)。(4)将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后,单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析,随着培养基中蔗糖浓度的增加,光合作用强度的变化趋势是_,单株鲜重的变化趋势是_。据图判断,培养基中不含蔗糖时,试管苗光合作用产生的有机物的量_(能、不能)满足自身最佳生长的需要。(5)据图推测,若要在诱导试管苗生根的过程中
7、提高其光合作用能力,应(降低,增加)培养基中蔗糖浓度,以便提高试管苗的自养能力。考点118技术原理植物体细胞杂交1概念:植物体细胞杂交就是将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。2图示过程3考点解读(1)植物体细胞杂交的障碍植物细胞都有细胞壁。根据酶的专一性原理,用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。原生质体融合。人工诱导方法包括物理法,如离心、振动、电激;化学法,如聚乙二醇(PEG)诱导等。(2)杂种细胞的类型有三种:AA、BB、AB,符合要求的只有AB,需要进行筛选。(3)杂种细胞AB形成的标志:新的细胞壁的生成。(4)杂种植株遗传物质的变化:细胞融合
8、属于染色体变异,杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和,形成异源多倍体。(5)植物体细胞杂交的原理:原生质体融合的过程利用了细胞膜的流动性,杂种细胞发育成杂种植株利用了细胞的全能性。3据下面体细胞杂交技术流程图回答下列问题:(1)若运用传统有性杂交(即用番茄、马铃薯杂交)能否得到杂种植株?为什么?_。(2)在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中,运用的技术手段是_,依据的原理是_,其中过程称为_,与过程密切相关的具有单层膜结构的细胞器为_,过程相当于_,过程涉及的分裂方式为_。(3)已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体,则“番茄马铃薯”属于_倍体植株。(4)随“神六”太空旅行的种苗中,最
9、受关注的是柴油树试管苗。柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物,可用植物组织培养来实现柴油的工业化生产。若利用此技术,将柴油树细胞培养进行到_过程(填字母编号)即可。考点119解读操作流程图动物细胞培养1概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。2操作流程3考点解读(1)培养条件无菌、无毒的环境无菌处理、加抗生素杀菌、定期更换培养液。营养葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐和微量元素血清或血浆等天然成分。温度和pH(36.50.5)和(7.27.4)。气体环境95%空气5%CO2。提醒CO2作用调节培养基pH;空气中O2作用细胞有氧呼
10、吸;所用装置CO2培养箱。(2)原理:细胞增殖。(3)动物细胞培养时,一般选取幼龄动物的组织、器官,其细胞的分化程度较低,增殖能力强,有丝分裂旺盛,容易培养。(4)在动物细胞培养过程中,一般情况下10代以前的细胞核型不变,10代以后有些细胞核型发生改变,50代以后的细胞可能发生癌变。(5)胰蛋白酶在动物细胞培养过程中的作用包括将组织分散成单个细胞,以及将贴壁细胞从瓶壁上分离下来,这样做的目的是避免动物细胞的接触抑制现象。4应用(1)生产细胞产品:干扰素、疫苗、单克隆抗体。(2)检测并判断某毒性物质毒性的大小。(3)临床医学研究。植物组织培养与动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养培
11、养基的物理性质基固体液体(合成培养基)培养的成分水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂等葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等结果新的植株或组织新的细胞系或细胞株目的 植株快速繁殖 脱毒植株的培育人工种子 生产药物、杀虫剂等 转基因植物的培育 蛋白质生物制品的生产皮肤移植材料的培育检测有毒物质生理、病理、药理学研究取材植物细嫩的部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织其他条件均为无菌操作,需要适宜的温度、pH、O2等条件4如图是动物细胞培养的基本过程示意图,请据图回答。(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自_。(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是_,然后
12、用_酶处理,这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是_。(3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有_等。在此瓶中培养一段时间后,有许多细胞衰老死亡,这时培养到第_代,到这时的培养称为_。(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中,用_处理,然后配制成_,再分装。(5)在C瓶中正常培养了一段时间后,发现细胞全部死亡,原因是_。考点120关注生物新技术动物细胞融合与单克隆抗体1动物细胞融合(1)概念:两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。(2)原理:生物膜的流动性。(3)方法:聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。(4)意义:突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能;成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生
13、物新品种培育等的重要手段;制备单克隆抗体。2单克隆抗体(1)取相应B细胞前必须先注射相应抗原,形象地说先“打针”,否则失败。(2)诱导融合的两种细胞名称及作用。免疫过的B淋巴细胞(浆细胞)产生抗体;骨髓瘤细胞无限增殖。(3)诱导融合与原生质体融合的不同方法。动物细胞诱导融合的特有方法灭活的病毒诱导。(4)两次筛选的目的及方法:在特定的选择培养基上,未融合的亲本细胞(浆细胞和骨髓瘤细胞)和融合的具有同种核的细胞(BB融合细胞、瘤瘤融合细胞)都会死亡,只有融合的杂种细胞(杂交瘤细胞)才能生长。这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生单一的特异性抗体。经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需
14、抗体的细胞(很多种杂交瘤细胞),需经克隆化培养和抗体检测,经多次筛选后就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(5)两种培养提取场所体外培养培养液提取。 体内小鼠腹腔中培养小鼠腹水中提取。植物体细胞杂交和单克隆抗体的制备的比较理论基础细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶)注射特定抗原,免疫处理正常小鼠促融方法(1)物理法:离心、振动、电刺激等(2)化学法:聚乙二醇(PEG)(1)物、化法:与植物细胞融合相同(2)生物法:灭活的病毒过程第一步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠免疫处理第二步原生质体的融合(物、化法)动物细胞的融合(物、化、
15、生法)第三步杂种细胞的筛选和培养杂交瘤细胞的筛选与培养第四步杂种植株的诱导与鉴定单克隆抗体的提纯意义和用途(1)克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展杂交的亲本组合范围(2)克服有性杂交的母系遗传现象、获得细胞质基因的杂合子、研究细胞质遗传(1)制备单克隆抗体(2)诊断、治疗、预防疾病。例如:单抗诊断盒、“生物导弹”治疗癌症5 1975年科学家首次利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出单克隆抗体。请据图回答问题:(1)病原体注入小鼠体内后,要经过_细胞处理后,才能被免疫细胞识别。(2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集,然后以_作诱导剂,使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。通过筛选和克隆培养,获得的杂
16、交瘤细胞具有_的特点。(3)单克隆抗体的特点是_。根据上图写出应用杂交瘤技术获得单克隆抗体的两种主要方法_。考点121关注生物学热点内容动物细胞核移植与克隆技术引起的伦理问题1概念:动物细胞核移植是将动物的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。2操作流程3考点解读(1)原理:动物细胞核的全能性(不能说动物细胞全能性)。(2)卵母细胞选择时期及原因减中期的卵母细胞,此时具备受精能力,细胞质中合成与分裂、分化有关的物质能刺激融合后重组细胞进行分裂分化,形成重组胚胎。(3)选卵细胞作为受体细胞的原因大,易于操作;卵黄多,营养丰富,为发
17、育提供充足的营养;能激发重组细胞分裂分化。(4)供体细胞:取供体动物的体细胞培养,一般选用传代10代以内的细胞,因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。(5)动物体细胞不能经培养直接发育成完整个体,原因是动物体细胞的全能性受到限制。用体细胞核移植技术能够得到克隆动物,说明动物体细胞的细胞核具有全能性。(6)该过程用到的技术手段:动物细胞培养、动物细胞融合、早期胚胎培养和胚胎移植。(7)核移植产生的克隆动物与提供细胞核的亲本不同的原因克隆动物细胞质基因来源于另一个亲本。所以与植物组织培养不同(只来自于一个亲本),克隆动物遗传物质来自2个亲本。在发育过程中可能
18、发生基因突变,染色体变异导致性状改变。外界环境条件的影响引起不可遗传的变异。4应用及存在问题(1)应用:加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁育、保护濒危物种、克隆器官用于移植等。(2)存在问题:成活率低;克隆动物的健康问题;克隆动物食品的安全性问题。5克隆人(1)过程(2)分类类型项目治疗性克隆生殖性克隆区别目的治疗人类疾病用于生育,产生新个体水平细胞水平个体水平联系都属无性繁殖;产生新个体、新组织,遗传信息相同6.克隆技术引发的伦理问题观点理由不赞成(1)克隆人严重违反了人类伦理道德(2)克隆人冲击了现有的婚姻、家庭和两性关系等传统的伦理道德观念(3)克隆人是人为地制造在心理上和社会地位上都
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