酵母核糖核酸的提取及组分鉴定-卢忠燕.ppt
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1、实验七 酵母核糖核酸的提取,核 酸(nucleic acid),是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子,携带和传递遗传信息。,Nucleic Acid,基因的化学本质核酸,核酸的分类及分布,除RNA病毒以外,所有有机体的遗传物质(基因)都是DNA。,一、实验目的 1. 掌握从酵母中提取核糖核酸的原理。 2. 学会核糖核酸提取的基本操作。,二、实验原理 酵母,即酵母菌,是一些单细胞真菌,是人类文明史中被应用得最早的微生物,繁殖速度快,生长周期短,其细胞质中的核酸大部分是RNA,而DNA很少;RNA提取液与菌体分离比较容易,所以生产中常选用酵母作为RNA提取的原材料。,工业上提取RNA的方法主要有三
2、种,包括稀碱法、浓盐法和自溶法。本实验采用的是稀碱法。稀碱法是利用RNA可溶于碱性溶液的性质,先使RNA溶于稀NaOH溶液中,然后再利用核酸不溶于乙醇的性质,向溶液中加入酸性的乙醇溶液,从而使RNA沉淀出来,如此得到的即是RNA的粗制品;再用乙醇、乙醚等有机溶剂洗涤脂类杂质,即得到纯化的RNA。,三、 实验步骤 1. 酵母RNA的提取 (1) 准确称取15g酵母,加入干净的研钵中,加入适量石英砂;然后,向研钵中加入30-40mL0.04M的NaOH溶液,并用力研磨约10min。 (2) 待研磨均匀后,将钵中溶液倒入锥形瓶中,并再取30-40mL0.04MNaOH溶液洗涤研钵,一并转入锥形瓶中,
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