临床微生物标本的采集20130904.ppt
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1、,临床微生物标本的采集,无锡市第二人民医院检验科,胡锡池,正确的微生物标本采集和运送,是准确的病原 学诊断的前提!,标本采集、运送是分析前质量控制的重要部分。,分析前程序包括:从临床医生开出医嘱开始,到分析 检验程序时终止的步骤, 包括检验申请、患者的准 备、原始样品的采集、运送到实验室并在实验室进行 传输。,临床反馈不满意的检验结果中, 有80%的报告最终可 溯源到标本质量不符合要求。,微生物样本采样基本原则,1.及时采集微生物标本作病原学检查; 2.在抗菌药物使用前采集标本; 3.采样时严格执行无菌操作; 4.采样后立即送检;,5.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂; 6.送检标本应注明
2、来源和检验目的;,7.混有正常菌群污染标本,不可置液体培养基。不可增菌,各类标本储存的环境,4冰箱 :痰、尿液、粪便、活检组织、气管冲洗物、 导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等。,室温(25): 脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、鼻、 喉、血液培养、血管导管尖、体液 、厌氧菌培养标本。,常见不合格标本主要原因,标本采集时间错误; 容器错误;,标本量不足;,标本未及时正确运送; 以及暂存条件错误;,。,临床微生物检验重要样本类型,血液培养,脑脊液培养,呼吸道标本培养 尿液培养,生殖道样本培养 粪便培养,其他无菌体液或分泌液,血培养,的采集规范,血培养采集的指征,当怀疑血流感染或脓毒症时,应常规行血培养
3、。 怀疑患者有血流感染的症状有:,不明原因的发烧(38)或体温过低(36) 白细胞增多( 10,000/ul),粒细胞减少( 1,000ul),休克,寒颤,僵直,血培养采集的指征,血流感染的症状有:,严重的局部感染(脑膜炎,心内膜炎,肺炎,肾盂肾 炎,腹部术后感染,) 心率异常加快,低血压或高血压 呼吸频率加快,新生儿可疑菌血症,可以增加做尿液和脑脊液培养。,关于采血时机,尽可能在患者寒战或开始发热时采血;,在患者接受抗生素治疗前采血;,如患者已经应用抗菌药物进行治疗,应在下一次用药之 前采血培养。,血培养采集的消毒,皮肤消毒,培养瓶消毒,皮肤消毒程序,严格执行三步法:,1、用75%酒精擦拭静
4、脉穿刺部位待30s以上;,2、用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s,从穿刺点向 外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上,涂擦穿刺皮 肤2遍,待干燥。,3、75%酒精脱碘:用75%酒精由内向外方向涂抹去碘酒,液 ,待酒精挥发干燥后采血。,培养瓶的消毒,1. 去掉培养瓶口的塑料瓶盖。,2. 75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。,3. 自然待干。,4. 将标本注入培养瓶内。,5. 颠倒混匀标本与肉汤,以避免血液凝,集。,关于采血套数与采血部位,成人“一套” 血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个,也 叫“一份”。,注意:一次穿刺采血,算“一套”,采集第二套应从另一 个穿刺点获得。最好从另一
5、侧抽血。,儿童一般只做需氧培养,但仍需从多个部位采集多次。,特殊患者才考虑厌氧培养。,Weinstein et al. Detection of Bloodstream Infections in Adults: How Many,BloodCultures Are Needed J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548,每位患者每次采血最少2 套,3套更好 初发患者,绝不能只采1 套标本 多个穿刺部位采血。多部位同时发生污染的几率较小,便于对结果进判断,采集部位,推荐从外周静脉采集血液标本。,不推荐动脉血,因其诊断价值没有比静脉血更大。 不推荐静脉留置导管,因
6、其常伴有高污染率。如果必须 从留置导管内采血,也应同时从外周静脉采集另外一个 血培养标本以帮助阳性结果的判读提供解释。,关于采集血液量,采血量是影响灵敏度最关键因素 成人一份标本2个培养瓶(需氧厌氧),每瓶8 10ml,共20ml;要求至少采两份标本,即40ml。 儿童一般只需采集需氧瓶,在保证采集血量1总血 量下,一般为13ml 采血量不足时应优先保证需氧瓶,因临床90以上的感 染为需氧菌或兼性需氧菌感染,0,50 40 30 20 10,采血量(ml)与检出率的关系 100 90 80 70 60,5,10,15,20,30,40,45,50,55,60,ml,% Relative Yie
7、ld,25Overall35,血培养物每增加一毫升,真性菌血症 成年人微生物的检出率增加3 但并非越多越好,超过一定数量的采血量会稀释培 养瓶内的肉汤,使肉汤无法有效中和血中的抑制物质 (补体、抗体、抗生素)。所以血液与肉汤的最佳比例 为1:41:10,关于各种血液标本的采集顺序,血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、 凝血等其它标本要高。,所以要最先采集血培养标本。,培养瓶的储存温度,不需冷藏,更不能冷冻。保存在1525的室 温即可,温度过低会导致对温度敏感的细菌死 亡。,呼吸道标本,上呼吸道样本 下呼吸道样本,关于呼吸道标本,临床通常将正常人喉以上部位称之为上呼吸道,上呼 吸道定植有大量
8、的正常菌群,而气管以下包括气管、支 气管和肺泡称下呼吸道,通常无菌。,下呼吸道感染包括急性气管-支气管炎、慢性支气管炎 急性发作、支气管扩张继发感染及肺实质感染(肺炎、,肺脓肿)等。,绝大部分上呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和鼻腔部位;常常导致咽痛、鼻炎等。,痰及下呼吸道标本,痰及下呼吸道标本采集指征,痰液标本是临床微生物学检验最常见的标本,但不是下 呼吸道感染的最佳标本。有下列体征之一,应进行痰培 养:,咳嗽、 咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常见的症状。 咯血,包括泡沫血痰、鲜血和痰中带血等。 呼吸困难,呼吸急促或哮喘,常伴有胸痛。,发热伴白细胞增高尤其是中性粒细胞或CRP明显增高。 胸部影像学检查提
9、示有感染可能。,咳痰标本的采集,标本采集方法,医师或护士直视下采集标本。,病人先漱口用牙刷(不用牙膏)清洁口腔和牙 齿,去除表面的菌群。,教育病人深咳,收集从下呼吸道咳出的痰液。,无痰可用35NaCl 5ml雾吸约5min导痰也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰,咳痰标本不合格,退检吗?,如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个,白细胞小于 10个,应不做或仅在特殊要求时做培养。,如做培养,报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌 物污染明显”。,样本质量-革兰染色评估样本是否合格,不合格的痰标本,合格的痰标本,几种下呼吸道直接采集的标本,经气管穿刺吸引 经胸壁针刺吸引 经支气管镜采样,支气管
10、肺泡灌洗经支气管镜直接吸引 防污染样本毛刷开胸肺活检(,经人工气道吸引分泌物,痰培养的送检次数,对于普通细菌性肺炎,痰标本送检每天1次,连续2 3天。不建议24h内多次采集,除非痰液外观性状出现 改变;,怀疑分枝杆菌感染者,应连续收集3天清晨痰液送检;,痰培养的运送和保存,尽快(2h)送至实验室。,如不能及时送达,应将标本暂存于4,但放置时间 不可超过24h。,脑 脊 液,关于脑脊液,正常人体脑脊液是无菌的。当人体患有脑脊 髓膜炎症时,在脑脊液中可以出现病原菌。常 见的病原菌有细菌、真菌、结核分枝杆菌等。 做脑脊液的细菌培养有助于诊断脑膜炎病因。,脑脊液培养标本的采集,采集时间:怀疑脑膜炎时应
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