毛细管等速电泳.ppt
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1、毛细管等速电泳 Capillary isotachophoresis ( CITP ),毛细管等速电泳也是根据样品的有效淌度的差别进行分离的一项电泳技术. 在等速电泳中, 在电泳稳态时, 各组分区带具有相同的泳动速度, 而且各区带相互连接.,等速电泳所要求的条件:,1. 特殊的电解质系统: 在毛细管等速电泳中, 用有效淌度比样品中任何离子的有效淌度都大, 并具有一定缓冲能力的离子作为前导电解质 ( leading electrolyte ), 加入到末端 (检测端) 电解槽和毛细管中, 用有效淌度比样品中任何离子的有效淌度都小, 并具有一定缓冲能力的离子作为尾随电解质 ( terminatin
2、g electrolyte ) 加入起始端电解槽中. 样品加在前导电解质和尾随电解质之间. 系统中要加入对离子, 以满足电中性的要求.,区带电泳和等速电泳使用的电解质溶液的不同,在区带电泳中,整个系统都用同一种电解质充满,这种电解质被称为背景电解质或支持电解质。它运载电流并有一定的缓冲能力。 在等速电泳中,不加入这样的背景电解质。,2. 背景电流要小到足以克服区带电泳效应 在毛细管等速电泳中, 由于没有一个背景电解质支持电流 (毛细管等速电泳要求溶剂的自身电导可以忽略不计 ), 各区带互相连接.,毛细管等速电泳一般用恒流操作模式. 分离开始后, 在电压的作用下, 各组分由于淌度的不同被分离.,
3、系统通电后, 样品中迁移速度最大的离子运动最快, 但慢于前导电解质. 迁移速度最小的离子运动最慢, 但快于尾随电解质, 具有不同淌度的离子得到分离。 恒稳态时所有区带具有相同的移动速度.,假定有区带 L, A, B, C, T, 则各区带的移动速度为: v L = v A = v B = v C = v T 或: L E L = A E A = B E B = C E C = T E T 式中,有效淌度, E,电场强度, L E L = A E A = B E B = C E C = T E T,由于 L A B C T , 所以有: E L E A E B E C E T 各区带的电场强度不
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