CKD患者肾内小动脉ɑ-SMA的表达与颈动脉内膜厚度的关系 (1).doc
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1、CKD患者肾内小动脉-SMA的表达与颈动脉内膜厚度的关系目的:通过研究各期CKD(Chronic Kidney Disease,)患者肾内小动脉-SMA的表达程度的差异,肾内小动脉-SMA的表达程度与颈动脉内膜厚度的关系,揭示肾组织-SMA的表达与肾组织病变程度的关系。方法:选取63例CKD患者。按照eGFR分为3组,CKD1期病人26例,CKD2期病人21例,CKD3期病人13例,CKD4期病人3例,分别行PSA染色,PASM染色以及免疫组化染色,观察肾间质纤维化程度、肾内小动脉的表达程度。结果:1.肾内小动脉-SMA的平均光密度:CKD1期组0.28160.0161;CKD2期组0.268
2、10.0990;CKD3期组0.21720.0512,CKD4期组0.19160.0301,肾内小动脉-SMA平均阳性面积百分比:CKD1期组22.23016.3452%;CKD2期组19.10329.3423%;CKD3期组14.340112.3427%,CKD4期组10.404911.6902%:各组之间两两比较均有统计学差异(P0.05)。2.肾小管损伤指数: CKD1期组0.12160.0161;CKD2期组0.11810.0390;CKD3期组2.21720.0541,CKD4期组3.19160.0401.前两组相比,肾小管损伤指数无统计学意义(P0.05),其余各组两两比较均有明显
3、差异(P0.05).3.颈动脉内膜厚度:CKD1期组患者0.92120.1401mm;CKD2期组1.61370.5014mm;CKD3期组2.21470.4116mm;CKD4期组2.81470.8016mm。各组之间两两比较均有统计学差异(P0.05)。结论:1.肾内小动脉-SMA的表达的变化可能参与了CKD的发生发展。2.联合检测肾内小动脉-SMA的表达程度与颈动脉内膜厚度的关系可为CKD患者发生心血管意外的可能性提供一定的依据。关键词:慢性肾脏病;-SMA;肾小管损伤指数: 颈动脉内膜厚度;心血管事件近年来,在全球范围内的发病率逐年增加,有统计显示,我国南方大城市中,CKD 的患病率约
4、为10%,北京40岁以上人中,至少有一项肾脏指标异常的人群达到了11%。CKD发病率随着肥胖、高血压、糖尿病人数的增加进一步升高。CKD如若未得到及时治疗,可呈进一步进行性发展,并进入终末期肾衰竭(End stage renal disease, ESRD)阶段,此时则需长期肾脏替代治疗; CKD还能够增加心血管疾病的发生率,是CKD的主要死因之一。因此控制并治疗CKD,已成为全球特别是发展中国家的主要任务,可极大减少ESRD发生率, 减轻社会经济负担。1材料1.1研究对象1.1.1研究对象选择:选取2012年3月至2012年9月在河北医科大学第二医院住院,经肾活检诊断明确为慢性肾脏病患者63
5、例,其中CKD1期病人22例,CKD2期21例,CKD3期17例,CKD4期3例,留取肾组织石蜡切片备用。慢性肾脏病的分期标准:1期:肾损害:eGFR正常或升高90ml/(min1.73)。 2期:肾损害伴eGFR轻度下降6090ml/(min1.73)。 3期:eGFR中度下降3060ml/(min1.73)。4期:eGFR明显下降1530ml/(min1.73)1.1.2入选标准:(1)年龄18周岁;(2)临床或病理诊断为肾实质性疾病;2 方法2.1 肾穿刺标本的处理肾组织经过FAA固定后进行石蜡包埋后切片机连续切片,厚度为2um,在水浴箱中展片,组织充分舒展以后,载玻片捞取组织后放入恒温
6、箱60度烤片。3.2 肾组织的PAS染色步骤(1)二甲苯脱蜡至水(2)梯度酒精水化 (3)自来水清洗1分钟(4)加高碘酸氧10分钟(5)自来水清洗3分钟(6)滴加shiff氏液10分钟(7)自来水清洗3分钟(8)Mayers苏木素染色6分钟(9)自来水清洗3分钟 (10)1%的盐酸酒精分化2秒(11)自来水清洗3分钟(12)1%氨水返蓝20秒(13)自来水洗3分钟 (14)梯度酒精脱水(15)二甲苯1-2分钟(16)中性树胶封片(17)光镜下观察病理变化。3.3、 PASM染色(1)2m切片常规脱蜡至水;(2)1%高碘酸氧化20分钟(3)自来水冲洗;(4)现配制六胺银染色:60度温箱30min
7、(随时镜下观察);(5)自来水冲洗;(6)0.2%氯化金(5分钟);(7)苏木素复染5分钟;(8)1%的盐酸酒精分化2秒;(9)Masson红复染2min,自来水洗;(10)快速脱水,透明,封片。3.4临床检测方法:3.4.1常规体格检查:受检者于晨起、空腹、脱鞋、免冠、穿衣相同等条件下测身高、体重,并计算出体重指数。体重指数(BMI)=体重(kg)/身高2(m2)。3.4.2生化指标的检测方法:获取所有受试者知情同意的情况下,于入院后24小时内,留取血尿标本待检测。每位受试者于采血前日19:00后禁食水,次晨7:00用EDTA抗凝管抽取肘静脉血8mL,经4000r/min离心后将血清置于-7
8、0的温冰箱中以待测。留取晨起清洁中段尿,尿标本容器为清洁一次性用品,上口直径大于4厘米,1小时内检测。24小时尿留取时,于清晨8:00排空膀胱,至次日8:00所有尿液收集后搅拌均匀,准确测量总量,记录具体数值后,取10ml待检。3.4.3 cIMT的测定: 受检者仰卧位,颈部垫一颈枕,颈部侧伸45度,用PHLIPSIE33超声多普勒8-14MHz高分辨率探头,测定颈总动脉与颈动脉分叉处平均内中膜最大值,所有受检者均由同一位有经验的专业医师完成。按2003年ESC高血压治疗指南标准, cIMT110mm判断为动脉壁增厚。4 统计分析用SPSS13.0统计软件,计量资料以S表示,资料符合正态分布两
9、组间均数比较采用两样本比较t检验,非正态分布资料转换正态分布资料后为采用两样本比较t检验,多组均数比较采用方差分析,不能用方差分析的采用秩和检验,两参数间的相关性用Pearson相关分析。P0.05为差异有统计学意义。2.结果1.各组受检者相关临床资料的比较(Tab.1)Tab.1:comparison related clinical data of CKD1、CKD2、CKD3、CKD4 patients(s)指标CKD1 (n=22)CKD2( n=21)CKD3( n=7)CKD4(n=3)BMI(kg/m2)23.891.2124.931.0624.231.1323.911.25FB
10、G(mmol/L)4.651.124.940.974.571.224.710.98TG(mmol/L)2.880.642.630.35 a2.300.46 a c1.350.76b c fTC(mmol/L)5.821.615.321.77 a4.571.82 a c4.121.92 b c fHDL-C(mmol/L)1.150.261.290.311.130.450.980.51收缩压(mmHg)130.8712.23138.8010.73 a152.1411.34bd16310.54bdf舒张压(mmHg)77.089.2684.438.35 a98.169.03 bd10912.31
11、bdf血肌酐(mol)56.236.32126.2314.26276.2319.12426.2323.1224h尿蛋白定量(g/d)5.233.953.412.03b3.761.11b c2.331.43bdfCo2结合力(mmol/L)26.374.23b21.764.09b17.314.64bd13.023.89bdf血钾(mmol/L)4.411.204.621.14 a4.921.34 a c5.831.12bdeNote: vs CKD1 group,a P0.05,bP0.01;vs CKD2 group,c P0.05;dP0.01;vs CKD3 group,eP0.05;f
12、P0.05),差异无统计学意义;各组之间24小时尿蛋白定量两两比较CKD1期组CKD3期组CKD2期组CKD4 期组,且均有统计学意义(PCKD3期组CKD2期组CKD1期组,且均有统计学意义(PCKD2期组CKD3期组CKD4期组,且均有统计学意义(PCKD3期组CKD2期组CKD1期组,且均有统计学意义(PCKD3期组CKD2期组CKD1期组,且均有统计学意义(PCKD3期组CKD2期组CKD1期组,且均有统计学意义(P0.05)。而CKD1期,CKD2期,患者血钾水平虽然有明显升高趋势,但是血钾水平均处于正常范围内,CKD3期组,CKD4期患者血钾水平明显高于正常水平。2.CKD1期组、
13、CKD2期组、CKD3期组、CKD4期组患者肾组织-SMA的平均光密度值的相互比较(Tab.2)Tab.2:comparison the average optical of -SMA in Kidney tissues and carotid intima thickness of CKD1、CKD2、CKD3、CKD4 patients(s)组别动脉壁-SMAcIMT(mm)肾小管损伤指数CKD10.28160.01610.92120.14010.12160.0161CKD20.26810.0990 a1.61370.5014 a0.11810.0390 aCKD30.21720.0512
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