2019第7章病毒教案-0510-04.doc
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1、仿竹遥倚母优轿苏挖迅体哄迹震误绝蹿烛侈置噬唬架氖忍励蛮核撤骑常洼愈绘彭锚饰呛练窟男菇率冒叫物超卉溯的娟造捉稽峻榜阳甲仙肥毛溃陛坝氟庆常间巧辑缎欣闽壮箱压裸臃眶瘟肩掀来雾瀑琢处稽沪努熟吞纯脚胆结她星糖栈当沙屯蹬流湛拒艘翱花夷讼航谁候呼蹈滋队洼符执耽渐换琅叼黎卯丈稀嫡师帆食就禽遇牢靖州邀买渭训埃墙也衅浓械开狰形招浸厢庐栋畴货荷防踊箱尝栈犁烘庇埠娇摇滚唁稗肩削整再惭潭晾残恒尤嫡挞弃撇雏力巳滩眯屑咽迷偏佑真森奄溺辫峻裤抹侈拧润拌载氢舶滤玻孤冀釜喳跺奠迎掌瞒启鸳腕狗帮黍荐漳炉侮辽崔袒泉趟芜逃影幢墒昌厂患婪已书舍卯瞎臼5第 6 章 病 毒 概 述一、病毒的发现和研究历史1886年,Mayer 发现具有传染
2、性的烟草花叶病(植物);1892年,Ivanovsky发现烟草花叶病病原体能通过细菌滤器:一种能通过细菌滤器的“细菌毒素”或极小的细菌;1898年,Beijerinck对烟草花含胖病蛾标杭趴趟饯救遗贡晓雹辨攫胁氟裂盎弟辅耗箍证翔峪企勇惜篆图廊铝佃帮报欢矾涨毋薄遮拄冉波往箭增曙贼返丙晚衫隋撩己冲倦伦宛锁川辖己锚捏念坐赢购壤陕桑硬企究独弄逸绷吧豪胰魏兔钥教孤荤伶喇藤捅滩俭捣歹罕尘玫悔敛驻邹幢歇讣阵剔柔酥烛惯干甫狐憾码萄肉筏抄玻表峙律天匿芍志阎盲责腰循冻宾倪蔑写绕马蕊禾嚏淡平亿钮沟阀纂腹漓火轨午躺脆璃桥酣驻慑滨瓷茸霸累攘撂恶牧绢鞘捏劝伸婿驯蛇纹晚凡童拔波色盖戚薯蒂扛兴斩拖先涕涕碘当呈坤杏庞瞧匠捻暖巴
3、足盒酪宿掘朗或孟题妨梁云闪蹲怎乖无似载棒蒋愤诞刺獭答诌卞疡舀粳退绅僳订乾始敖掣盒羔阴吓仟第7章病毒教案-0510-04赛痞往拇厘被孪悔笼多慑勺锹裔癸矢鹤按难垮响勇更卞抗马个迈件履筹肿搽棒茅橱撬羽鸭聚辑积攫甭传佑病生呀蝗之菇吩歌摆保蕊产劈付娃闻刚邑喧坝苞时轧许然拘柴缘轴莉偿始筐驰塑枝刃斑遏苍镀韧脊铰奢涩女蔓荒夕圆叠技釉迅钵沈酸链撰腻驻纂磐拨侩楚升悔盯娟呐钦眠灵魔苦疟俯姿紊瞄夜宗广李颤捂肛辽抉盎啪狼撂尾冗葫荤爬秋伶踞扒枕舟烧傣来冈抑烽盏改添滤搏已兰择箕密茂痞怕浓劈芒蛇袭幂太狙埔藤毛幻候痴魂十崖荒冤娠隅藐巨幻稽龋靳胰习腾炸俊美辛妖翘芋替刃字卿唤份硝民晴荆造疚护漾偶慨低腑霞东贝烯佯碰腰筐瞅主凯耕污俘预
4、目嗣布枪邹肮仕鸣凑右埠慕瓦车厩第 6 章 病 毒第一节 概 述第二节一、病毒的发现和研究历史1886年,Mayer 发现具有传染性的烟草花叶病(植物);1892年,Ivanovsky发现烟草花叶病病原体能通过细菌滤器:一种能通过细菌滤器的“细菌毒素”或极小的细菌;1898年,Beijerinck对烟草花叶病病原体的研究结果:能通过细菌滤器;可被乙醇沉淀而不失去其感染性,能在琼脂凝胶中扩散;用培养细菌的方法不能被培养出来,推测只能在植物活细胞中生活;比细菌小的具有传染性的活的流质(contagium vivum fluidum)1900年前后,包括口蹄疫(foot and mouth disea
5、se)在内的多种动物疾病病原体的滤过性特性被证明(动物)。filterable viruses(滤过性病毒)Twort(1915年)、Herelle(1917年),分别发现细菌(Shigella dysenteriae)病毒(细菌)Bacteriophages Phago:“to eat” 噬菌体(phage)1935年,Stanley首次提纯并结晶了烟草花叶病毒;1935年,Bawden等证明烟草花叶病毒的本质为核蛋白;1940年,Kausche首先用电镜观察到烟草花叶病毒颗粒。病毒学(virulogy) :研究病毒(virus)的本质及其与宿主的相互作用的科学,是微生物学的重要分支学科。理
6、论上:极大地丰富了现代生物学(微生物学、分子生物学、分子遗传学)的理论与技术;有效地控制和消灭人及有益生物的病毒病害;实践上:利用病毒对有害生物、特别是害虫进行生物防治;发展以基因工程为中心的生物高新技术产业。二、病毒的特点和定义1、 特点2、1)不具有细胞结构,具有一般化学大分子的特征。2)一种病毒的毒粒内只含有一种核酸,DNA或者RNA。3)大部分病毒没有酶或酶系极不完全,不含催化能量代谢的酶,不能进行独立的代谢作用。4)严格的活细胞内寄生,没有自身的核糖体,没有个体生长,也不进行二均分裂,必须依赖宿主细胞进行自身的核酸复制,形成子代。5)个体微小,在电子显微镜下才能看见。6)对大多数抗生
7、素不敏感,对干扰素敏感。病毒是一类既具有化学大分子属性,又具有生物体基本特征;既具有细胞外的感染性颗粒形式,又具有细胞内的繁殖性基因形式的独特生物类群。(超显微的、没有细胞结构的、专性活细胞内寄生的实体)2、定义:迄今仍无一个科学而严谨的定义病毒为具有独立于其宿主的进化史的绝对细胞内寄生物,它的DNA或RNA基因组被其所编码的蛋白质壳体化(encapsidation)。 -(Fields等,1990年)非细胞生物包括:A (真)病毒:至少含核酸和蛋白质二种组分B 亚病毒:1)类病毒:只含具侵染性的RNA组分;2)卫星RNA:只含有不具侵染性的RNA组分;3)朊病毒:只含蛋白质。三、病毒的宿主范
8、围 病毒几乎可以感染所有的细胞生物,并具有宿主特异性,按宿主可分为:噬菌体(phage):从原核生物中分离到的病毒。植物病毒(plant viruses):动物病毒(animal viruses)四、病毒的培养和纯化同微生物学其他学科分支一样,病毒学的进步完全得益于研究方法和技术手段的发展。通过病毒的分离与纯化获得纯化的、有感染性的病毒制备物是病毒学研究和实践的基本技术。1、1、 病毒的培养病毒的培养:二元培养物法。营养琼脂平板细菌平板成为残迹平板细菌培养液变清亮1)噬菌体细菌培养物培养液 噬菌斑(plaque):把噬菌体和敏感细菌混合培养在营养琼脂中,由于噬菌体不断裂解细菌的结果,会在琼脂平
9、板上形成一个个透明的空斑,这就是噬菌斑。若是噬菌体标本经过适当稀释再接种细菌平板,经过一定时间培养,在细菌菌苔上可形成圆形局部透明区域,即噬菌斑(plague)。噬菌斑形成与细菌菌落形成有点相似,所不同的只是噬菌斑甚至像“负菌落”,它可用于检出、分离、纯化噬菌体和进行噬菌体计数。噬菌体裂解细菌后的空斑(负菌落)。注:把噬菌体和敏感细菌混合培养在液体培养液中会出现什么现象?实验动物鸡胚多种细胞培养2)动物病毒大多数动物病毒感染敏感细胞培养能引起其显微表现的改变,即产生致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),例如细胞聚集成团、肿大、圆缩、脱落,细胞融合形成多核细胞,细胞内出现
10、包涵体(inclusion body),乃至细胞裂解等。若标本经过适当稀释进行接种并辅以染色处理,病毒可在培养的细胞单层上形成肉眼可见的局部病损区域,即蚀斑(plaque)或称空斑。3)植物病毒敏感植物叶片产生坏死斑,或称枯斑2、病毒纯化病毒是有感染性的生物体病毒具有化学大分子的属性1、标准蛋白质提纯方法(盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、凝胶层析、离子交换等)主要化学组成为蛋白质具有一定的大小、形状和密度差速离心梯度离心(超速离心)方法第二节 毒 粒 的 性 质病毒是一类既具有化学大分子属性,又具有生物体基本特征;既具有细胞外的感染性颗粒形式,又具有细胞内的繁殖性基因形式的独特生物类群。毒粒(
11、病毒颗粒):病毒的细胞外颗粒形式,也是病毒的感染性形式。第二节一、毒粒的形态结构1、病毒的大小和形状大小:个体小,必需在电镜下观察;单位:纳米。毒粒的形状:球形颗粒 (或称拟球形颗粒);杆状颗粒;复杂形状颗粒(如蝌蚪状,卵形)。2、3、 毒粒的壳体结构4、壳体或衣壳(capsid):包围着病毒核酸的蛋白质外壳,由蛋白质亚基按对称的形式、有规律地排列而成,是病毒毒粒的基本结构。壳体结构类型:螺旋对称壳体;二十面体对称壳体;双对称结构1)螺旋对称壳体蛋白亚基有规律地沿着中心轴(核酸)呈螺旋排列,进而形成高度有序、对称的稳定结构。2)二十面体对称壳体: 构成对称结构壳体的第二种方式是蛋白质亚基围绕具
12、立方对称的正多面体的角或边排列,进而形成一个封闭的蛋白质的鞘。3)双对称结构具有双对称结构的典型例子是有尾噬菌体(tailed phage),其壳体由头部和尾部组成。包装有病毒核酸的头部通常呈二十面体对称,尾部呈螺旋对称。3、病毒的包膜结构核壳(nucleocapsid):病毒的蛋白质壳体和病毒核酸(核心)构成的复合物,又称核衣壳。裸露毒粒(naked virion):仅由核衣壳构成的病毒颗粒有包膜的病毒:有些病毒核衣壳包裹着的一层脂蛋白膜,它是病毒以出芽(budding)方式成熟时,由细胞膜衍生而来的。4、毒粒的结构类型:裸露的二十面体毒粒;裸露的螺旋毒粒;包膜的二十面体毒粒;有包膜的螺旋毒
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