电化学论文:电化学 蛋白质激酶 碱性磷酸酶 λ核酸外切酶 磷酸化 去磷酸化 滚环扩增 DNA探针.doc
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1、 电化学论文:磷酸化与去磷酸化检测新方法的研究【中文摘要】磷酸化和去磷酸化反应是生命过程中十分重要的反应,参与生物体内许多生命活动。这两个反应与细胞内的信号级联放大系统也密切相关。细胞可以针对外界各种物理信号或者化学信号,在体内引发一系列指数级的催化磷酸化反应,进而促使核内特定基因的表达,成功完成对外界信号的应激性。当这种应激完成之后,再经过去磷酸化作用,可以去除蛋白质的活性,从而使细胞恢复到正常状态。催化这两种反应的酶主要是蛋白质激酶和磷酸酶。这两类酶的异常调控会严重影响生物的生命活动,引发许多疾病。在本论文中,我们利用电化学技术设计了两种巧妙的电化学传感体系,用于检测这两类酶催化的磷酸化与
2、去磷酸化反应。与一些传统的检测方法相比,本论文中构建的电化学方法具有灵敏度高、选择性好、成本低及操作简便等优点,在一些疾病的医疗诊断上有一定的应用前景。1.基于滚环扩增检测蛋白质激酶催化磷酸化的电化学方法我们提出了一种基于滚环扩增的电化学方法,用来检测蛋白质激酶催化的磷酸化反应。首先,底物多肽通过其C端半胱氨酸的巯基固定在金电极表面,同时,蛋白质激酶A能够将底物多肽中的丝氨酸催化磷酸化。然后,Zr4+通过静电结合作用将该磷酸化位点与DNA引物上的磷酸基团相连,再.【英文摘要】Phosphorylation and dephosphorylation is the key to the casc
3、ade signal amplification system in cells. A series of exponential phosphorylation may be induced to answer the physical or chemical signals outside cells, which can further cause the expression of some specific genes. Accordingly, some functional proteins are thus activated. Later, the phosphorylate
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