3.2《月季的花药培养》课件姚玲.ppt
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1、课题2 月季的花药培养,课题2 月季的花药培养,一、课题目标: 说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径,说出影响花药培养的因素,学习花药培养的基本技术,尝试用月季或其他植物的花药进行培养。 二、课题重点和难点: 选取适宜的培养材料和培养基。 三、技能目标: 知道被子植物花粉发育的过程;说出产生花粉植株的两种途径;记住影响花药培养的因素,尝试花药培养的实验操作过程,并进行无菌操作;知道花药培养在育种上的意义。,高度不育,秋水仙素处理,染色体加倍后可育,可育,可育性,有性生殖,无性生殖,生殖方式,单倍体植株,正常植株,培养结果,影响因素,操作流程,生殖细胞,体细胞,外植体细胞类
2、型,脱分化再分化,脱分化再分化,基本过程,细胞的全能性,细胞的全能性,理论依据,月季的花药培养,菊花的组织培养,花的结构,基础知识 一、被子植物的花粉发育,阅读课本P37P40,一、被子植物的花粉发育,雄蕊:,花丝,花药:囊状结构,内有很多花粉粒,花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。 花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、双核期,花粉发育过程,减数分裂,有丝分裂,注意: 二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管中形成) 三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样的花粉在成熟时,含有一个营养
3、核和两个精子。 两个精子和一个营养核的基因型相同。 1花粉母细胞,4个小孢子,减分,有分,4个花粉管细胞核,4个生殖细胞核,有分,8个精子,练习: 写出花粉的发育过程的发育过程(学生板书) 假如一种生物体细胞有条染色那么它的小孢子母细胞、小孢子、花粉管细胞核、生殖细胞核各有多少条染色体?如果小孢子母细胞的基因型为AB(两对基因位于两对同源染色体上)那么小孢子、花粉管细胞核和生殖细胞核的基因型是什么?,答案:小孢子母细胞个小孢子单核居中期单核靠边期花粉粒,答案:、,AB或A或B或。无论哪一种,来源于同一个小孢子的花粉管和生殖核的基因一定相同,二、产生花粉植株的两条途径,花粉,花粉,胚状体,愈伤组
4、织,丛芽,丛芽,生根,移栽,脱分化,分化,再分化,诱导,胚状体,1、材料的选择 2、培养基的组成(MS培养基+不同比例的激素) 3、亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功率都有一定影响,三、影响花药培养的因素,影响花药培养的因素 1、材料的选择: 不同种类植物的诱导成功率不同。 同一种植物,亲本植株的生理状况对诱导成功率有直接影响。 合适的花粉发育时期:花期早期时的花药最佳。 选择最合适的花粉发育时期 不选择单核期之前花药原因:花药质地幼嫩,容易破碎; 不选择单核期之后花药原因:花瓣开始松动,给材料消毒带来困难困难; 挑选单核期花药方法:应当选择完全未开放的花蕾,菌少,易
5、消毒。,2、培养基的组成 花药培养所采用的培养基各成分中植物生长调节剂的水平和配比起决定作用。 诱导愈伤组织或胚状体产生的培养基:广泛使用2,4-D、IAA和KT; 诱导分化的培养基常除去2,4-D而以IBA或BA等代之。 3、其他因素: 材料的低温处理、接种密度、培养的环境条件等对诱导的成功率都有一定的影响。,实验操作,一、材料的选取 二、材料的消毒 三、接种和培养,(一)材料的选取 1、选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 2、确定花粉发育时期最常用方法:醋酸洋红法;焙花青铬矾法。,实验操作,鉴定花粉: 最常用的方法是醋酸洋红法: 花药(载玻片上)1%的醋酸洋红1滴用
6、镊柄将花药捣碎,盖上盖玻片镜检(花粉粒的细胞核被染成红色) 某些植物的花粉细胞核不易着色,需要采用焙花青铬钒法: 花药(在卡诺氏固定液中处理20min)取出,置于载玻片上焙花青铬钒溶液染色盖上盖玻片镜检(花粉粒的细胞核被染成蓝黑色),注:花粉细胞核内有染色体,染色体主要由DNA和蛋白质组成,醋酸洋红为碱性染色剂,染色体容易被染色。通过染色,可以确定细胞核为单核期还是双核期,是单核居中期还是单核靠边期。一般单核靠边期的花药培养成功率最高。,(二)材料的消毒,1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中24分
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