2019高胆固醇血症对心脏电生理特性的影响.doc
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1、DOC格式论文,方便您的复制修改删减高胆固醇血症对心脏电生理特性的影响(作者:_单位: _邮编: _) 【关键词】 高胆固醇血症【Abstract】AIM: To elucidate the effect of hypercholesterolemia on cardiac electrophysiology. METHODS: Rabbits were fed with either high cholesterol or standard chows for 10 weeks. Electrocardiograph, ventricular fibrillation threshold a
2、nd the level of serum lipid were examined. Wholecell patch clamp technique was used to record Ica,L. RESULTS: High serum cholesterol level and atherosclerosis were observed in high cholesterol group. Ventricular fibrillation threshold was lower in high cholesterol group than that in control group (1
3、1.11.3) V vs (14.41.6) V, P0.05 and QTc intervals were longer in high cholesterol group than those in control group(33414) ms vs (30312) ms, P0.05. The densities of ICa,L were larger in high cholesterol group than those in control group (15.81.2) pA/pF vs (11.91.0) pA/pF, P0.01. CONCLUSION: Hypercho
4、lesterolemia can produce cardiac electrical remodeling, including increased ICa,L , prolonged repolarization and decreased ventricular fibrillation thresholds.【Keywords】 hypercholesterolemia;repolarization duration;ventricular fibrillation;calcium/metabolism【摘要】目的: 阐明高胆固醇血症对心脏电生理的影响.方法: 日本大耳白兔分为对照组和
5、高胆固醇饮食组,饲养10 wk后,检测血脂水平,心电图和室颤阈值,并利用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞的ICa,L,组织化学技术检测动脉粥样硬化发生情况.结果: 高胆固醇饮食组兔血脂水平明显高于对照组(P001),粥样硬化广泛分布在动脉血管中.高胆固醇饮食组兔室颤阈值为(11113) V,明显低于对照组(14416) V,P005.高胆固醇饮食组兔QTc间期(33414) ms,明显长于对照组(30312) ms,P005.高胆固醇饮食组心室肌细胞的ICa,L密度为(15812)pA/pF,明显高于对照组(11910) pA/pF,P001.结论: 高胆固醇血症对心肌细胞的电生理特性有影响,表
6、现在ICa,L的增加,复极时程的延长和室颤阈值的降低.【关键词】 高胆固醇血症;复极时程;心室颤动;钙/代谢0引言恶性室性心律失常是冠心病患者心脏性猝死的主要原因,高胆固醇血症是冠心病的最主要危险因素之一,已有大量的临床资料提示高胆固醇血症与室性心律失常之间存在着密切的联系1-4,但关于高胆固醇血症对心电生理的影响及其机制尚存在争议,一些学者认为高胆固醇血症对心肌电生理有直接影响5,其他学者则认为高胆固醇血症通过冠状动脉粥样硬化引起心肌缺血导致心律失常6.我们对高胆固醇血症兔的一些基本心脏电生理指标及其离子通道的变化进行研究,试图阐明高胆固醇血症对心脏电生理作用的可能机制.1材料和方法11材料
7、雄性日本大耳白兔18只,体质量(2201) kg,华中科技大学同济医学院实验动物中心提供.胶原酶I,牛血清白蛋白(BSA),HEPES,Na2ATP,Na2GTP均为Sigma 产品;EGTA购自Fluka Biochemika;其他试剂均为分析纯.台氏液的组成成份(mmol/L): NaCl 135; KCl 54;CaCl2 18; MgCl2 1; NaH2PO4 033; HEPES 10;Glucose 10; pH值用NaOH 调至73; 无钙台氏液,02 mmol/L Ca2 +台氏液分别为台氏液中不加CaCl2和加02 mmol/L CaCl2.记录钙电流的电极内液成份(mmo
8、l/L): CsCl2 120, CaCl2 1, MgCl2 5, Na2ATP 5, Na2GTP 035,EGTA 11, HEPES 10, Glucose 10,pH值用NaOH调至72;细胞外液的成分为18 mmol/L Ca2+台氏液.12方法121模型制备动物适应性饲养1 wk后,随机分为高胆固醇饮食组和对照组,高胆固醇饮食组: 每日给予含2 g胆固醇的兔料;对照组:给予标准兔料.均饲养10 wk.122血脂测定饲养前与实验第10周,经耳中央动脉采血,用AU1000型全自动生化分析仪(Olympus,Japan)酶法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇
9、(HDLC).123室颤阈值的测定实验第10周,戊巴比妥钠30 mg/kg静脉麻醉,气管插管接呼吸机,沿胸骨左侧缘开胸,暴露心脏并缝制心包吊床,心电监护,记录肢体导联心电图.起搏电极由两支针形电极组成(除针尖外均涂有聚四氟乙烯),直径03 mm,两针相距03 cm,左心室游离壁刺入2 mm深,用XD2A心脏诊疗仪(苏州东方电子仪器厂生产)取间断刺激(100 Hz,每次持续刺激1 s),强度从1 V开始,按递增05 V的方法通过起搏电极刺激心脏,以引起心室颤动的最低强度为室颤阈值.124单个心室肌细胞分离参照文献7,8方法,经静脉麻醉并给予肝素500 u/kg,开胸迅速取下心脏,放入4生理盐水中
10、,使心脏立即停跳.行主动脉插管,悬挂于Langendorff 灌流装置上,用无钙台氏液灌注5 min,冲洗掉血液和钙离子,再改用含075 g/L胶原酶I、005 mmol/L钙离子的台式液灌注40 min,取下心尖部心肌,稍吹打, 即得单个心肌细胞悬液.分离后的细胞存放在含1 g/L BSA和200 u/L氨苄青霉素的台氏液中,室温保存备用.实验在37下进行.125全细胞膜片钳记录采用全细胞膜片钳记录方法,在电压钳制下记录L型钙通道电流(I Ca,L).膜片钳放大器(HEKA, German)同计算机连接.刺激信号及电压输入信号的采集均由软件(Pulse+Pulsefit)控制.126动脉粥样
11、硬化检测取主动脉大体标本(从近主动脉弓部到腹腔干分支处),生理盐水冲洗后沿正中线剪开,铺平,摄像.图像分析仪测定斑块面积及内膜总面积,并计算斑块/内膜面积比.心脏标本置于100 mL/L中性缓冲甲醛溶液中浸泡固定1 h.常规乙醇脱水,石蜡包埋,将其横断面制成4 厚连续切片行HE染色.统计学处理: 实验数据以x s表示,使用SPSS 120统计软件,采用t检验比较两组间各参数差异的显著性,方差不齐时采用t检验,P005认为有统计学意义.2结果21血脂检测结果造模期间,动物体质量渐增,第10 周时两组间体质量有差异(P005).高胆固醇饲养前,两组间各项血脂水平无差异(P005).第10周时,高胆
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