高效液相色谱法及应用.ppt
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1、高效液相色谱法及应用,2004年3月14日,慢 中等 快,色谱分离,由于液体与气体性质的以下差异: 溶质在液体中的扩散系数比它在气 体中小105倍左右 液体粘度比气体约大102倍 液体表明张力比气体大104倍左右 液体密度比气体约大103倍 液体不可压缩,液相色谱以液体为流动相,固定相可以是固体或液体(担载在固体表面),与气相色谱比,带来一系列变化: 例如,填充柱气相色谱柱,一般填料的尺寸为80-100目,粒度大约是2毫米,而一般高效液相色谱的固定相粒度在210微米,因此流动相通过这样一段固定床时就产生了很高的反压。,因此,我们通常所说的高效液相色谱(High Performance Liqu
2、id Chromatography)实际也是高压液相色谱(High Pressure Liquid Chromatography),因为没有很高的压力就不可能产生很高的分离效率。 键合相高效液相色谱算是一种色谱模式,因为用的是键合相的固定相。,一、液相色谱的分类 按溶质在分离过程中的原理: 吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 体积排阻色谱 亲和色谱,2.按色谱固定相的形式: 平板色谱(平面色谱) 柱色谱 3.按分离的压力 高压液相色谱(高效液相色谱) 中压液相色谱 常压液相色谱,Hdp关系图,二、液固色谱法 一般也把吸附色谱法称为液固色谱法。液固色谱法的固定相一般为固体吸附剂,常用的是:碳酸钙、
3、硅胶、氧化铝、氧化镁、活性炭等。其中硅胶最为常用。 吸附色谱对中等分子量的油溶性样品可获得最佳的分离,而对强极性或离子型的样品,有时会发生不可逆吸附,不能得到满意的结果。,基本原理: 吸附剂一般为多孔性的物质,在它们的表明存在着分散的吸附中心,溶质分子和流动相分子在吸附剂表面的活性中心上进行竞争,同时不同溶质之间和同一溶质的不同官能团之间液也存在竞争。竞争的综合结果就是形成不同溶质在吸附剂表面吸附、解吸平衡。,吸附,解吸,X表示溶质分子,下标m为流动相,s为固定相 M表示流动相分子,下标m为流动相,s为固定相 n为被溶质分子取代的流动相分子数目,用一个式子表示如下:,极性吸附剂上有机化合物的保
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