仪器使用说明.doc
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1、目 录FT-200动物跑步机实验简明指导2ZB-200小鼠转棒仪实验简明指导3BA-200避暗仪实验简明指导4DT-200小鼠跳台仪实验简明指导5MT-200水迷宫实验指导6RM-200八臂迷宫实验简明指导9CPP-100条件位置偏爱实验简明指导10PH-200双足平衡测痛仪操作简明指导11PL-200热刺痛仪实验简明指导12PV-200足趾容积测量仪实验简明指导13RB-200智能热板仪实验简明指导14SW-200光热尾痛仪实验简明指导15BP-6无创血压测量仪实验简明指导16HV-4离体组织器官灌流实验简明指导18GL-2离体心脏灌流系统实验简明指导19PM-200高架十字迷宫实验简明指导
2、22ZZ-6小鼠自主活动仪实验简明指导24TS-200悬尾测试仪实验指导25HX-300S动物呼吸机快速操作指南26注:有“ ”符号标记的指实验室没有配备的仪器设备FT-200动物跑步机实验简明指导一、实验原理FT-200动物跑步机配备有动物跑道,通过后端一个刺激装置来强迫动物持续奔跑,仪器自动记录动物所受电击次数和跑道上的奔跑总时间。可用于疲劳实验、运动协调实验、中枢神经抑制实验、骨骼肌松弛实验研究,观察药物对受试动物运动及协调能力的影响,也可用于大、小鼠抗疲劳实验,评测药物对动物体能的影响。二、操作步骤1、实验前一周,在喂食30分钟后,先进行跑步机适应训练;2、将实验动物(大鼠或小鼠)放入
3、跑步带上,盖上玻璃盖;打开电源开关;设定好“定时时间”、“转速”和“大/小鼠”的工作模式及调节刺激电流旋钮,按下“启/停”按钮,系统自动开始记录;3、末次给药后30、60分钟,将实验动物放在跑步机上,设置实验参数,按“启/停”按钮进行动物体能测试。 提示:可采用逐渐增加速度与坡度的方法使动物奔跑直至力竭(exhaustion),参数设置可参考下表(Bedford et al., 1979) 所列。若鼠落入电击区,而经过多次电击仍无法起身往前跑即判定已经力竭,记录开始跑步至力竭的跑步时间。 坡度 (%) 速度 (mph) 持续时间 (分)0 8.2 3 5 15.2 3 10 19.3 3 10
4、 26.8 3 11 30.3 3 4、当实验动物在跑步带一头落下时,液晶显示器上对应的该通道将停止计时,同时动物落带次数加1。实验动物会因受电击后离开刺激源,继续在跑步带上活动,此时通道计时继续累加。实验用时到达设定时间后,实验停止。三、适用动物环境及其他要求1、成年标准体重的大小鼠为宜,大鼠体重200g左右,小鼠体重20g左右;2、在通风、安静、相对昏暗的环境下进行实验。四、实验指标 1、电击次数:动物在实验过程中落带的次数(即为受到电击的次数)2、奔跑时间:实验过程中动物在跑步带上活动的总时间。实验动物体能较好者电击次数相对较少,而奔跑时间相对较长。五、注意事项 跑步机使用一段时间后,跑
5、步带会出现微量的伸长,如果有打滑现象,说明跑步带偏松,请在专业人员指导下用紧固调节螺栓调节。ZB-200小鼠转棒仪实验简明指导一、实验原理动物在旋转的棒上为保持身体平衡不致跌下,需要向转动棒的反方向移动,并保持四肢肌肉协调运动,否则将从棒上落下。有中枢抑制作用和肌肉松弛作用的药物,可缩短动物从棒上落下的时间,此法反映动物的被动活动。二、操作步骤1、将6只小鼠分别放在转棒的6个通道上,设置好 “日期”、“转速”、“TRAIN”(训练模式);2、转速设置为16r/min,按下“启/停”按钮,仪器开始计时,并匀加速运动到设置到的转速后作匀速转动,选择能在棒上3min而不落下的动物进行实验,此时为筛选
6、适应过程,不记录数据;3、将已训练的实验动物分组,设置好“转速”、“定时时间”、“TEST0”(顺时针)或“TEST”(逆时针),按下“启/停”按钮,把小鼠放在旋转棒上的同时遮挡一下本通道落棒感应器,系统发出提示音,触发计时,当任意通道的小鼠落棒时,对应的液晶显示器上的通道将停止计时。4、统计落棒的百分率,并比较对照组和给药组的差异;三、适用动物、环境及其他要求1、成年标准体重的小鼠为宜,小鼠体重20g左右;2、在通风、安静、相对昏暗的环境下进行实验。四、结果评价1、根据不同药物的给药方式和吸收速率,选择间隔时间测定实验动物在定时时间内的落棒率;2、可比较给药组和对照组的差异;3、可做疲劳实验
7、、骨骼肌松驰实验、中枢神经抑制实验以及其它需用运动方式检测药物作用的实验,如毒性对运动能力的影响,体内某种物质缺乏对运动能力的影响,心脑血管药物对运动能力的影响等等。五、注意事项1、动物需要速度从慢到快适应过程。2、注意筛选动作不协调的动物;BA-200避暗仪实验简明指导一、实验原理BA-200避暗仪利用鼠类的嗜暗习性而设计,以光、电击为联合刺激使实验动物产生由被动回避转为主动回避的条件反射。记录此条件反射建立过程中的主动回避反应指标来反映实验动物的学习、记忆能力的变化。 二、操作步骤(一)、训练模式:动物学习阶段,经训练后获得记忆1、打开电源开关,根据实验需求完成实验条件参数的设定(实验时间
8、、刺激电压、实验日期)。2、拉动门控手柄关闭通道门洞,将小鼠背向洞口放入活动箱明室中。3、按下“启/停”按键开始实验,并立即打开门洞。这时主机液晶屏显示实验时间开始进行倒计时,同时各通道的潜伏期开始正向计时。4、当小鼠第一次从明室进入暗室,潜伏期计时停止,小鼠进入暗室后会因受到电击而逃出进入明室,同时液晶屏显示出错次数加1。5、到达实验设定时间或再次按下“启/停”按键,实验停止(一般情况下训练时间常设置为5min,仪器自动记录此时间段内出错次数可反映动物的学习成绩)。(二)、测试模式:测试动物的记忆能力1、经训练24 h或48 h后进行记忆测验,操作步骤同上,记录每只动物进入暗室的潜伏期和5
9、min内的电击次数,并计算5 min内进入暗室(错误反应)的动物百分率(记忆巩固)。2、停止训练5 d后可以在不同的时间进行一次或多次记忆消退实验测试(记忆再现)。三、适用动物、环境等其他要求1、20-30g小鼠为宜,过小动物探测可能不灵敏。2、实验最好在安静,昏暗下进行,环境温度为20度左右。四、实验指标潜伏期:动物从放入明室按实验开始到进入暗室遭电击的计时时间。 出错次数:实验时间内小鼠从明室进入暗室受到电击的次数。五、注意事项1、动物的回避性反应差异较大,如需减少差异或少用动物,可对动物进行预选或按学习成绩好坏档次进行实验。2、动物的个体差异对电击刺激反应较大,实验时宜先设置相对较低的刺
10、激电压,以免过多电死动物。DT-200小鼠跳台仪实验简明指导一、实验原理 DT-200小鼠跳台仪是以电击为刺激,利用动物对电击刺激的逃避反应,使实验动物产生由被动回避转为主动回避的条件反射而设计的。在一个底面可以通电的反射箱内放置一个绝缘的跳台,当动物在训练中受到电击时,可以跳上跳台逃避电击,由此获得记忆,通过测试动物在平台上的潜伏期测试记忆,从而反应出实验动物的学习、记忆能力的变化。二、操作步骤 1、将动物放入反应箱内适应环境三分钟。2、打开电源开关,设定实验参数,设定相对较低的刺激电压。3、训练测试:按下“启/停”开关,系统立即通电。当动物在底部栅栏上受到电击后,其正常反应是跳回平台,以逃
11、避电击。多数动物可能再次或多次跳至铜栅上,当它们再次受到电击后又会迅速跳回平台。训练数次后,动物获得记忆,可以按固定时间的错误次数(number of errors)作为训练时动物的学习成绩。4、记忆测试:设定好测试时间后,按“启/停”开关,将经过训练后筛选分组的动物依次放入各通道反应箱内的平台上,系统将依次自动触发该通道计时。当某通道动物第一次跳下平台时,该通道计时结束此即为该动物的记忆潜伏期,动物在测试时间内反复上下的次数记录为受到电击的次数即出错次数。5、24 h或48 h以后,将动物以同样方式再次放置于平台上,按记忆测试模式进行测定动物的记忆巩固情况。6、停止训练5 d后(包括第5 d
12、)可以在不同的时间进行一次或多次按记忆测试测定动物的记忆消退。三、适用动物、环境等其他要求大鼠和小鼠跳台法均较常用,实验在常温下进行即可。四、实验指标 潜伏期:训练后的实验动物测试时第一次跳下平台所用的时间。 错误次数:为设定时间内动物跳下平台受到电击的次数。 记忆损伤动物由于记忆力下降,表现为潜伏期缩短,同时错误次数增加。而具有益智作用的重要可以改善这种现象,使潜伏期延长,而错误次数减少。五、注意事项 1、动物的回避性反应差异较大,可对动物进行预筛选或按学习成绩好坏档次进行实验。2、由于个体差异,实验宜先施加相对较低的刺激电压,以避免电死动物的可能性。3、实验时间可根据需要自行调整设定。MT
13、-200水迷宫实验指导一、实验原理 大小鼠厌恶处于水中的状态,同时游泳对于大小鼠来说十分消耗体力,因此在水中它们会本能的寻找水中的休息场所。寻找休息场所的行为涉及到一个复杂的记忆过程,包括收集与空间定位有关的视觉信息,再对这些信息进行处理、整理、记忆、加固、然后再取出,目的是能成功的航行并且找到隐藏在水中的站台,最终从水中逃脱。Morris水迷宫(Morris water maze, MWM)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的一种实验,主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力。二、实验操作 (一)实验前的准备与设置1、将圆形反应水箱与固
14、定支架放置在适当位置,将摄象头固定在圆形水箱垂直上方。在水池中注入清水,然后注入适量新鲜牛奶或奶粉,使水池成为不透明的乳白色。2、将平台置于某一象限中央,且使水面高于平台0.52cm(根据实验动物的大小决定),使动物无法凭视觉辨别水中平台的位置。将实验动物(大小鼠)用实验室常见的苦味酸在实验动物的头部和背部涂抹成较大相连的区域作为标记色。3、将摄像头用视频信号电缆与计算机上的捕捉卡相联接。完成加密狗和软件系统的安装。启动软件,进入软件主界面。4、调整摄象镜头位置和焦距,使视频显示范围刚好覆盖整个容器水区域。以屏幕上的黑色基准线为准,移动水容器使容器上的标记点与准线相重合。(若屏幕上未出现黑色基
15、准线则可通过选择屏幕右侧的“显示基准”显示)。5、点击“新建项目”开始新的实验项目, 点击“场景设定”来进行实验场景的设定:按住鼠标左键在左侧标记点按下不放,拖动鼠标沿着左侧标记点到右侧标记点放开鼠标。然后按住鼠标左键在上侧标记点按下不放,拖动鼠标沿着上侧标记点到下侧标记点放开鼠标。则系统自动根据以上标记画出场景6、场景设置完成后,用户可点击“确定平台”按键进行平台位置和大小的设置。第一次实验时实平台和虚平台的位置和大小是一致的,以后每次实验点击该按键时所确定的为实平台的位置,虚平台自动设为第一次实验时的设置,不用再设定。7、将有标记色的小鼠放在摄像头下,点击“目标选取”,屏幕上出现了红色色块
16、,如果色块不明显或与实际标记的部分相差太大说明阈值设置不合适或摄像头设置不当。可通过“调节阈值”调节到出现合适形状为止(确保屏幕上只有实验动物标记的地方为红色,这样实验过程中的追踪才准确可靠)。8、点击“清除屏幕”按钮,恢复到正常显示状态。点击“保存设置”按钮,保存当前合适的颜色配置为默认值。9、设置系统坐标参数,点击“系统定标”,本系统使用的实验桶已设定了四个标记点,只需移动鼠标到相应标记点,按住鼠标左键拖动鼠标到其对应标记点松开即可,此时系统弹出一个对话框,在其中选择正确的单位即完成本项操作。完成以上步骤后,即可开始实验。(二)实验开始:1、在软件主界面右方中部有“实验设置”面板,其中有“
17、定位航行实验”,“空间搜索实验”,两种实验类型可根据实验需求选择,系统默认为“定位航行实验”。 (1)定位航行实验观察和记录小鼠寻找并爬上平台的路线图及所需时间,即记录其潜伏期和游泳速度,无设定时间限制。 (2)空间搜索实验要求动物在设定时间内能否能够找到平台,用于测量动物对平台空间位置记忆的保持能力。2、在 “动物编号”选择框中选择本次实验的小鼠编号,然后放入实验动物(小鼠、大鼠),点击“开始实验”进行实验。3、训练: (1)每日将动物头朝池壁按东、南、西、北4个入水点分别放入水池,将站台置于某一象限中央,实验过程保持站台位置不变。 (2)每次实验以120s为限,系统自动记录动物从入水点到达
18、站台所需时间以及在这段时间内的游泳路程,以所需时间作为学习和记忆成绩,若设定时间内未找到站台,计算机停止跟踪,记录时间为120s。(3)训练中若动物在120s内找到站台,让其在站台上停留20s,若动物未找到站台,将其放在站台上使其停留20s。20S后将其从平台上拿下,休息一分钟后再次开始训练。一般正常动物经56个训练日可学会以最快最佳的轨迹找到平台的正确位置。4、测试:第7日开始可将平台转移到另一象限,记录动物入水后找到迁移后的平台的潜伏期,在原来平台位置所逗留的时间以及动物找到迁徙后的平台的路径。5、数据的导出:1)轨迹的导出当一次或多次实验结束后,点击“数据查看”切换到实验结果显示窗口,此
19、时模式为“图像模式”,窗口中显示的为实验的轨迹图像。窗口正下方有一轨迹选择框,可用鼠标选择需显示的轨迹,此时点击“导出”按钮将窗口中的图像保存为一幅位图(后缀名为.BMP)。可用“画笔”或PHOTOSHOP等图像软件打开进行修正和打印等操作。2)实验结果的导出在点击“数据查看”后点击“数据模式”则切换到实验结果数据显示窗口,此时窗口中显示的为本项目中所有实验的结果数据信息。点击“导出”则可将这些信息保存为一个EXCEL文件(扩展名为.CSV)。这个文件可用EXCEL打开进行统计打印。三、适用动物、环境等其他要求 适用动物:大鼠、小鼠适用环境:1、实验水温2325,安静的环境下。2、实验过程中在
20、视频区域内必须没有干扰标记色存在。四、实验指标1、潜伏期:动物入水后找到迁移后的平台所用的时间。2、总路径长度:动物入水后到找到迁移后的平台游泳路径的长度总和。3、朝向角:动物入水点和动物入水后一秒钟所在位置点两点形成的直线与入水点和平台所在点俩点形成的直线之间的夹角,即为朝向角。4、平均运动速度:总路径长度与潜伏期的比值。5、经过虚平台次数:动物在空间搜索过程中经过平台移动前位置的次数。6、虚平台停留时间:动物在空间搜索过程中停留在平台移动前位置的时间总和。7、四个象限的时间/路径:软件将圆形水箱划分为四个象限,动物在任一象限所用的时间之和/路径长度之和。8、内/中/外环的时间/路径长度:软
21、件可将圆形水箱用两个直径依次增大的圆形划分为内、中、外三个区域,动物分别在三个区域中所用的时间之和/运动的路径长度之和。9、有效区时间/路径:用户可通过软件将平台周围区域划分为有效区,有效区直径一般为平台直径的2倍。10、6时段中各时段有效率:将整个实验过程分为6段,各个时段中动物呆在有效区内的时间与对应的时段时间的比值即为此时段的有效率。五、注意事项1、在训练时,动物需要利用实验室内的固有环境和设施的空间定位作为参照物来综合判断安全位置或途径,所以实验时,实验室内的一切设备的位置(包括仪器、工作台、门窗、灯具、椅子等)以及实验者的位置都需保持相对固定,以减小实验误差。2、动物上平台后,让其环
22、顾四周20秒时间,让其辨别记忆空间线索。3、实验结束后注意动物的除湿保暖。不要把血管固定器浸泡酸性溶液中,放置堵塞气道出口。RM-200八臂迷宫实验简明指导一、实验原理八臂迷宫广泛应用于测试动物空间探索工作记忆和参考记忆实验。该实验方法基于受试动物耗费最小的努力完成寻找各臂上的食物为前提,记录潜伏期、参考错误(RME)和存取错误(WME)。实验时,记录动物在中央隔离区到有放置食物臂的记忆能力,比如第1,2,4,7号臂放置有食物(食物放置在臂端头的食物槽内不可见),动物能够全部吃完这四臂所需的时间为潜伏期,参考错误次数(Reference Memory Error,RME)指跑到无食物臂的次数,
23、工作记忆错误次数(Work Memory Error,WME)指多次跑到已经吃过的食物臂上。二、操作步骤1、开机进入传感器检查界面,正常无异物时传感器不触发,用手去通道臂内试探观察传感器能否正常被触发;2、将动物放在八臂迷宫的中央区域内,旋转中央区盖子使门洞不对准臂入口,以免动物进臂;3、打开仪器电源,选择 “设置”,通过上下方向键设定哪些放置食物的臂(即工作臂),黑底数字表示该臂号有食物,设定实验时间等参数;4、旋转中央区盖子使门洞对准臂入口,按下“启/停”按钮,仪器开始计时;5、动物进入全部吃完食物臂,实验自动结束,计时时间为潜伏期,同时统计出WME和RME。三、适用动物、环境及其他要求1
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