第四节培养基.ppt
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1、第四节 培养基,一、培养基配制应遵循的原则 二、培养基的类型,人工配制的、适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质。,用途:促使微生物生长;积累代谢产物;分离微生物菌种;鉴定微生物种类;微生物细胞计数;菌种保藏;制备微生物制品。,根据不同微生物的营养需求配制不同的培养基 营养物的浓度与比例应恰当 物理化学条件适宜(PH) 培养基无菌, 选用价格低廉,资源丰富的原料,一、培养基配制应遵循的原则,(一)培养基组分应适合微生物的营养特点,即根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。 不同营养类型的微生物,其对营养物的需求差异很大。如自养型微生物的培养基完全可以(或应该)由简单的无机物质组成
2、。异养做生物的培养基至少需要含有一种有机物质,但有机物的种类需适应所培养菌的特点。 按微生物的主要类类群来说,它们所需要的培养基成分也不同: 细菌:牛肉膏蛋白胨培养基 LB (Luria-Bertani) 放线菌:高氏一号培养基 真菌:查氏合成培养基 PDA (Potato-Dextrose-Agar) 酵母菌; 麦芽汁 当对试验菌营养需求特点不清楚的时候,可以采用生长谱法进行测定。,(二)营养物的浓度与比例应恰当,浓度过高微生物的生长起抑制作用,浓度过小不能 满足微生物生长的需要。 碳氮比(C/N)直接影响微生物生长与繁殖及代谢物的形成 与积累,故常作为考察培养基组成时的一个重要指标;,碳源
3、中的碳原子的mol数 氮源中所含的氮原子的mol数,C/N比值=,速效性氮(或碳)源与迟效性氮(或碳)源的比例 各种金属离子间的比例,(三)物理化学条件适宜,(1)pH: 各类微生物的最适生长pH值各不相同: 细 菌:7.08.0 放线菌:7.58.5 酵母菌:3.86.0 霉 菌:4.05.8 在微生物的生长和代谢过程中,由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累,培养基的初始pH值会发生改变,为了维持培养基pH值的相对恒定,通常采用下列两种方式: 内源调节:在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐;调节培 养基的碳氮比。 外源调节:按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液,(2)渗透压和aw,渗透压
4、 等渗溶液 适宜微生物生长 高渗溶液 细胞发生质壁分离 低渗溶液 细胞吸水膨胀,直至破裂,大多数微生物适合在等渗的环境下生长,而有的菌如Staphylococcus aureus则能在3mol/L NaCl的高渗溶液中生长。能在高盐环境(2.86.2/L NaCl)生长的微生物常被称为嗜盐微生物(Halophiles)。,(四)根据培养基的应用目的选择原料及其来源,用于培养菌体种子的培养基营养应丰富,氮源含量宜高(碳氮比低); 用于大量生产代谢产物的培养基其氮源一般应比种子培养基稍低,(但若发酵产物是含氮化合物时,有时还应提高培养基的氮源含量);若代谢产物是次级代谢产物时要考虑是否加入特殊元素
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