目的.ppt
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1、小鼠骨髓细胞微核试验,1 目的,通过本次实验,学习和掌握小鼠骨髓多染红细胞(PCE)微核测定方法。 2 原理 微核是在细胞的有丝分裂后期染色体有规 律地进入子细胞形成细胞核时,仍然留在细胞质中的染色单体或染色体的无着丝粒断片或环。它在末期以后,单独形成一个或几个规则的次核,被包含在细胞的胞质内而形成,由于比核小得多故称微核。,微核成因,化学致突变物,染色体,作用于纺锤丝,无着丝点,片或环,整条染色体 带着丝粒的环和断片,于细胞分裂末期细胞质中,形成微核,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的形成,因此,微核试验用于检测断裂剂和部分非整倍体致突变剂。 微核可出现在多种细胞中,但在有核细胞 中较难与正常核的分
2、支相区别,由于红细胞在成熟前最后一次分离后数小时可将主核排出,而仍保留微核于PCE细胞中,因此,通常计数PCE细胞中的微核数。,3 器材与试剂,3.1 器材 解剖器械,生物显微镜,载玻片等。 3.2 试剂 甲醇(分析纯)、甘油(分析纯)、小牛血清、生理盐水、Giemsa 储备液、 pH 6.8磷酸盐缓冲液 3.3 阳性对照物 环磷酰胺,4 操作步骤,4.1 试验动物及处理 动物选择 小鼠是微核试验的常规动物,通常用712周龄,体重1820g的小鼠。每组10只,雌雄各半。,剂量及分组 受试物应至少设三个剂量组,最高剂量组原则上为不产生动物死亡的最大毒作用剂量。一般取受试样品1/5、1/10、1/
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