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1、考试 7,1.间接计数法包括哪三种方法? 2.平板上菌落数为多少时适合计数? 3.滤膜的孔径是多少?MPN的含义是什么? 4.重量法包括哪些方法? 5.生理生化指标法的依据是什么?包括哪些指标? 6.间歇培养活细菌重量生长曲线包括那几个阶段?,作业问题,细菌C:H:O:N 质量百分数比例为50.89%:6.2%:30.52%:12.3% 分子式摩尔百分数比例 50.89 6.2% 30.52% 12.3%,12 1 16 14,:,:,:,C5H7NO2 或 C24H35N5O11,2细菌数量生长曲线,稳定期,衰老期,细菌的数量很大,都是10的n次方,取对数作图时方便,010代表11010,总
2、菌数,活菌数,(1)缓慢期“万事开头难”,特征:,细,菌,缓,数,慢,目,期,的,对,数,值,0,时间t,提问:为什么会出现迟缓期呢?,代谢活跃,个体体积、重量增高 不立即进行细胞分裂、增殖,数量不变甚至减少,岗前培训,适应环境(合成相应的酶),营养储备(用于复制合成),提问:根据上述原因选择接种何种状态的细菌迟缓期会较长? 对数期的细菌、稳定期或衰亡期、受损细胞、富集培养基的细菌 后三种,稳定期细胞基本耗尽了各种辅酶或其他细胞成分,受损细胞养伤修复,富集培养基细菌需要合成“自力更生”酶,菌种本身的遗传特性(如转基因高效菌)和接种数量也会影响迟缓期的长短。,在实际工作中如接种菌种以启动新的水处
3、理设施,投加新鲜污泥时,接种的细菌不习惯于新环境,会出现或长或短的迟缓期,迟缓期的出现会增加操作时间,降低工作效率,采用处于高效菌群对数期的菌种、增大接种量、尽量保持接种前后所处的培养介质和条件一致等方法来缩短或消除迟缓期,提问:我们可以通过哪些手段缩短迟缓期呢?,(2)对数期(青年),所有细菌均繁殖,故称对数期。(相当于重量法细菌曲线的增长率上升阶段),细菌数目X增长率倍率的对数与时间成正比。,特点,平均代时(繁殖一代的时间)最短 提问:细菌的代时与哪些因素有关?,细,菌,数,目,的,对,对,数,数,期,值,0,时间t,如大肠杆菌在20时其代时是35条件下的2倍; 伤寒杆菌在含0.125的蛋
4、白胨培养基中的代时为800min,而在含1.0时仅为40min。,四个时期,繁殖速度最快,种类遗传,、个体健康情况(营养、环境条件),提问:哪个时期(迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期)代时最具有种属代表性?为什么? 最短值无限长(休眠) 对数期代时最短值 细菌代时通常指最适条件下的对数期代时,此时所有细菌在二分裂生长,分别测定t0时刻与t时间细菌的数量X0与X,对数期细菌代时G计算,122223(22)2)24252n,X=X0*2n,X/X0=2n,X0X024 X (X02n) (n=1、2、3),n繁殖代数,代时,(3)稳定期(中年),出生率死亡率,细,菌,缓,数,慢,目,期,的,对,稳定
5、期,对,数,衰老期,数,期,值,0 t,时间,死亡原因 营养短缺、代谢毒物增多 (相当于重量变化曲线中的增长率下降阶段),(3)死亡期(老年),死亡率出生率(相当于重量法的内源呼吸阶段) 提问:如何给细菌延年益寿呢? 补营养、环保(去除环境毒物),人类群体有类似规律吗 ?,如果把地球看作是封闭的间歇式培养基,人类看作是细菌,人口若不加控制,必将经历由于资源枯竭,污染物遍地而引发的大灭绝。 自救节约、节育防止“营养物消耗过快”,环保防止“有害代谢物毒性抑制”。,3.连续培养,一方面连续进料,另一方面又连续出料。 原理:进料=补足营养(“污染物”) 出料=稀释菌浓度、毒物浓度 它又分为两种:恒浊连
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